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大鼠死后脑、心肌和肾组织β-actin mRNA的降解与早期死亡时间的关系

发布时间:2019-12-02 06:16
【摘要】:目的研究SD大鼠脑、心肌和肾组织细胞内β-actin mRNA的降解与早期死亡时间的关系,为早期死亡时间的推断寻找新的指标。方法大鼠处死后置于20℃的环境中,分别于死后不同时间点提取脑、心肌、肾的总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测总RNA中β-actin mRNA的水平(Ct值),分析死后经过时间与Ct值的线性关系,并建立推断早期死亡时间的线性回归方程。结果随死亡时间的延长,3种组织内β-actin mRNA的水平均发生了显著的下降,心肌和肾组织中β-actin mRNA死后24h内的降解速率更显著,而脑组织中β-actin mRNA的降解速率变化不明显。各组织的Ct值变化与死亡时间之间存在一定的线性关系。结论大鼠死亡早期脑、心肌和肾组织内β-actin mRNA降解明显,可以通过其降解规律来推断早期死亡时间。
【图文】:

电泳,定量检测,肾组织,时间点


均在 1.8~2.0,质量浓度介于500~3 000 ng/μL。 琼脂糖凝胶电泳显示各时间点所提取的样品电泳图均出现了 3 条清晰的条带(图 1),说明所有样品的完整性良好。0 h 4 h 8 h 12 h 16 h 20 h 24 h 36 h 48 h 72 h 96 h28S5S18S图 1 RNA 电泳结果图2.2 β-actin mRNA 定量检测结果对各组织所提取的 RNA 样本进行反转录和实时荧光定量 PCR 定量检测,检测结果用循环阈值(Ct值)表示(表 1)。表 1 脑、心肌、肾组织中 β-actin mRNA各个时间点的 Ct 值(n=6,x±s)PMI/h 脑组织 心肌组织 肾组织0 17.101±0.450 19.071±0.906 16.841±0.6194 17.671±0.277 19.939±0.216 17.762±0.8218 17.762±0.193 19.711±0.686 18.537±1.06212 17.756±0.567 20.475±1.372 17.912±0.63916 17.883±0.724 21.232±1.099 18.813±1.25420 18.051±0.769 22.041±0.944 20.299±1.00424 18.281±0.120 22.543±2.099 21.444±1.42136 19.188±0.438 23.575±0.843 23.051±0.83548 20.681±0.519 24.672±0.398 23.043±0.93672 22.183±0.386 26.171±1.294 24.385±1.00296 22.361±0.221 26.025±1.035 26.493±0.6492.3 死亡早期不同组织中 β-actin mRNA 的降解与PMI 的相关性将死后 24h 内各组织 mRNA 的含量与 PMI 进行线性回归分析,结果表明:脑、心肌、肾组织中 mRNA的 Ct 值(y)均与 PMI(x)存在相关性,且不同组织 β-actin mRNA 的降解速率不同。 各组织的线性回归方程如下:· 6·

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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