大鼠脑挫伤后细胞间粘附因子1的表达与损伤时间推断的研究

发布时间：2017-08-18 14:00

  本文关键词：大鼠脑挫伤后细胞间粘附因子1的表达与损伤时间推断的研究

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【摘要】：目的观察大鼠脑挫伤后不同损伤时间段ICAM-1蛋白的表达，采用免疫组织化学方法（SABC）和免疫印迹法（Western Bloting）定性定量检测大鼠脑挫伤后ICAM-1表达，寻找ICAM-1蛋白表达与损伤时间变化的规律，为脑损伤时间推断提供新的方法。 方法选取健康成年Wistar大鼠56只（雌雄不限），随机分成7组，对照组和脑挫伤后1h,6h,24h,48h,72h,7d组,每组8只。正常对照组动物经假手术处理后直接处死，实验组分别在大鼠脑损伤1h，6h,24h,72h,7d处死，常规消毒后打开头骨，取出挫伤区脑组织，称重80mg，-80℃液氮密封保存，用于免疫印迹检测提取蛋白。剩余脑组织用10!的甲醛溶液中固定，用于HE染色和免疫组织化学染色。 结果：(１)ＨＥ染色结果：ＨＥ染色结果：对照组脑组织细胞结构正常,细胞核核蓝染清晰，损伤组挫伤区可见脑组织间隙中聚集大量红细胞，蛛网膜下腔出血严重，神经元细胞肿胀,胞浆变空,核染色逐渐变淡，甚至消失，神经元坏死消失。 (２)免疫组织化学染色伤后1 h即可观察到血管内皮细胞和胶质细胞内少量棕黄色反应物，挫伤24 h阳性表达物逐渐增多;72h后棕黄色反应物大量聚集，达到顶点，大鼠脑组织中几乎所有的神经细胞均有阳性反应物，一些淡染的神经元胞核内也有微量表达，随后棕黄色反应物逐渐减少,挫伤7 d后仍可观察少量棕黄色反应物,且明显多于对照组。 （3）Western Bloting法结果：，经内参β-actin的校正，使用Image-.Pro Plus 6.0图像分析软件对ICAM-1免疫印迹条带进行分析，以IOD值作为相对含量，可见大损脑损伤1h可见ICAM-1蛋白微量表达，，随着损伤时间的延长，ICAM-1的表达逐渐增多，到72h达到最高峰，其后ICAM-1表达降低，伤后7d仍有表达，且高于对照组水平。 结论：大鼠脑挫伤后组织中ICAM-1的表达与损伤时间有一定关联，，两种方试验检测结果显示，ICAM-1蛋白的表达随着损伤时间的变化表现出一定的规律性，可望为脑损伤早期损伤时间推断提供新的敏感指标
【关键词】：法医学 脑挫伤 ICAM-1 损伤时间
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：D919
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-9
• 实验主仪器试剂和方法9-14
• 结果14-22
• 讨论22-24
• 结论24-25
• 参考文献25-27
• 综述27-32
• 参考文献30-32
• 个人简介32-33
• 致谢33

【参考文献】

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1 张丽慧;魏尔清;;ICAM-1、VCAM-1在脑缺血损伤炎症机制中的作用及调控[J];中国药理学通报;2005年11期

2 周官恩;刘宗超;饶明俐;;实验性脑出血后ICAM-1和IL-1β的表达与p38MAPK通路关系研究[J];中风与神经疾病杂志;2011年01期

3 王

本文编号：694933