大鼠视神经挫伤后GAP-43表达与PRVEP检测的时序性研究

发布时间：2017-09-11 22:46

  本文关键词：大鼠视神经挫伤后GAP-43表达与PRVEP检测的时序性研究

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【摘要】：【研究背景】眼外伤导致的视功能下降是法医学鉴定时最常见的临床表现之一，其严重程度与被鉴定人的损伤程度和伤残等级直接相关。由于此类案件一般都涉及到经济赔偿问题，因此，大部分被鉴定人在检测过程中往往出现不同程度的掩饰、夸大症状或伪装视功能损害。视觉诱发电位（Visual evoked potential，VEP）是目前临床上应用较为广泛的一种评估视功能的检测方法，它从电生理水平上客观反映了眼外伤后视功能的状况。但其检测结果易受受试者精神状态、注视度等多因素的影响，从而限制了其在临床上的广泛应用。生长相关蛋白（Growthassociated protein, GAP-43）作为神经再生的特异性标志物，其在伤后的时序性表达可在一定程度上反映伤后视功能恢复的情况，能从蛋白水平阐述视功能变化的分子机制。伤后不同时间点视功能可能不同，目前尚缺乏眼外伤后VEP检测与GAP-43表达的联合研究，深入研究两者之间的联系对于全面评价视功能有着重要的意义。 【目的】从电生理及蛋白分子水平探讨视神经损伤后视功能变化规律，为准确评价视神经损伤及伤后视功能提供有力的依据。 【材料与方法】SD成年大鼠42只，分为对照组（正常对照组和假手术组）及损伤组，损伤组再按不同时间分为5组(1d、3d、7d、14d、28d)，每组6只，同期行模式翻转视觉诱发电位（Patternreversal evoked potential, PRVEP）检测伤眼及正常眼视功能状况，而后灌流固定，眼球取材切片，光镜观察视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells, RGCs)的改变，免疫组化方法检测RGCs中GAP-43的表达水平。对GAP-43表达的时间规律进行分析，并与伤后模式翻转视觉诱发电位的检查结果进行比较，，分析其与PRVEP的相关性。 【结果】（1）正常对照组大鼠P100潜伏期73.532.11ms，波幅13.342.88uv，假手术组与其相比无显著性差异（P0.05）。伤后1d组P100潜伏期明显延长（106.377.33ms），延长率44.7%，较对照组有显著性差异（P0.05），此后逐渐延长，14d组潜伏期最长(120.6713.11ms)，延长率64.1%。此后逐渐缩短，28d组变化已不明显（74.073.59ms），与对照组相比无显著性差异（P0.05）。伤后1d组P100波幅较正常组明显降低（4.79uv），下降64.1%。3d组波幅降至谷底（4.09 1.23uv），下降69.3%。此后逐渐上升，28d组基本趋于稳定（13.064.49uv），与对照组相比无显著性差异（P0.05）。（2）正常对照组及假手术组大鼠视网膜仅有少量GAP-43表达（平均光密度值0.241±0.068），主要位于内丛状层。伤后1d组，GAP-43表达不明显(平均光密度值0.275±0.068)，3d组在RGCs中表达明显增加（平均光密度值0.304±0.110，较正常组增加26.1%），7d组在RGCs中达到峰值（平均光密度值0.389±0.182，较正常组增加61.8%），随后开始下降，28d组表达已不明显（平均光密度值0.269±0.099），同对照组相比无显著性差异（P0.05）。（3）损伤组GAP-43的平均光密度值与P100潜伏期和波幅间存在相关关系，但不同组间有较大差别。GAP-43平均光密度值与P100潜伏期相关系数分别为：r1d=0.183，r3d=0.356，r7d=-0.524，r14d=0.498，r28d=0.233，相关均有统计学意义（P0.05）。GAP-43平均光密度值与P100波幅的相关系数分别为r1d=-0.123， r3d=-0.243，r7d=0.424，r14d=0.408，r28d=0.134，相关均有统计学意义（P0.05）。 【结论】PRVEP潜伏期在伤后1天开始出现显著变化，在伤后14天开始恢复，在伤后28天时已基本稳定，其变化规律对于法医学正确运用VEP评价视功能、估计预后及掌握鉴定时机有明确的指导意义,也为临床治疗及神经保护研究提供了理论依据。GAP-43在正常大鼠的视网膜中仅有少量表达，损伤早期GAP-43表达的上调是视功能恢复的重要基础。在伤后不同时间大鼠视网膜出现特异性的GAP-43表达上调和下调，并且与PRVEP的变化具有明显的时间关联性，能从分子水平客观反映视神经挫伤后视功能恢复的状况。
【关键词】：视神经损伤 生长相关蛋白 视觉诱发电位 视网膜 视功能
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：D919.4
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-12
• 材料与方法12-17
• 结果17-23
• 讨论23-31
• 小结31-32
• 参考文献32-35
• 附照及说明35-39
• 综述39-46
• 参考文献44-46
• 致谢46-47
• 附录 课题研究相关图片47

【参考文献】

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1 司克媛;刘忠虎;刘重斌;孙兰弟;王芳春;梁桂霞;俞诗源;王子仁;;强光照和全黑暗条件下荒漠沙蜥视网膜内GAP-43表达的免疫组织化学[J];动物学杂志;2006年01期

2 霍妍;袁容娣;叶剑;尹小磊;邹欢;;新生大鼠视神经损伤后视觉系统中GAP-43的表达[J];吉林大学学报(医学版);2010年02期

3 曾勇;万静;万琨;李圆圆;李力燕;王廷华;冯忠堂;金顺祥;李燕;;视网膜神经节细胞轴突再生相关神经胶质酸性蛋白和生长相关蛋白-43基因研究[J];南方医科大学学报;2010年04期

4 郑传斐,刘兴本,刘技辉,徐晓明;屈光不正对P-VEP的影响及法医学意义[J];中国法医学杂志;2004年01期

5 耿文静;王广勇;方超;竞花兰;;注视程度对视诱发电位检查结果的影响[J];法医学杂志;2011年05期

6 周鑫;舒玲华;张玲莉;陈晓瑞;;应用视觉诱发电位技术评估视力[J];国际眼科杂志;2006年01期

7 杨新光;王颖维;金文亮;孙董洁;杭超;王百忍;;慢性高眼压兔模型视网膜中生长相关蛋白-43表达的变化[J];国际眼科杂志;2008年01期

8 尚建科;俞诗源;刘国安;陈玉琴;张虎林;张t

本文编号：833527