基于蛋白质组学和免疫学技术的丝绸文物分析研究

发布时间：2021-01-31 01:54

　　丝绸,是古代中华文明的重要组成部分,为后世传达着各个历史阶段重要的政治、经济和文化信息。近几十年来,随着考古人员的不断探索,越来越多的古代丝绸文物在中国及其他国家的文明遗址中被发现,引发科研工作者对丝绸起源的讨论和丝绸传播路径的分析。同时,出土丝织品文物的老化降解状况,也是众多研究者关注的重点。因此,鉴定丝绸文物的种属、分析丝绸文物的降解机理,对探究丝绸的起源和保证丝绸文物的流传具有重要意义。本论文首先采用蛋白质组学技术对蚕茧蛋白质进行定性和定量分析,筛选出不同蚕丝的标志性蛋白,然后将该蛋白质（或其中的特异性序列）作为抗原（或半抗原）,通过动物免疫获得不同蚕丝的特异性抗体,并成功鉴定出不同种属的蚕丝蛋白,从而建立起基于蛋白质组学和免疫学技术的蚕丝蛋白研究体系;并将该体系用于人工酶解样品、碱老化样品和古代丝织品的降解分析中,从分子水平探究丝绸文物的老化降解规律。1)采用定量蛋白质组学对不同方法提取的桑蚕和柞蚕蚕茧蛋白进行分析,根据蛋白质的功能,将桑蚕茧蛋白划分为7类;柞蚕茧蛋白划分为和5类;分别筛选出具有高丰度和特异性的蛋白质P05790和蛋白质O76786作为桑蚕丝和柞蚕丝的标志性蛋白... 

【文章来源】：浙江理工大学浙江省

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１研宄技术路线示意图??１．７．２研宄难点??（１）抗体的制备：根据蛋白质组学结果，筛选出不同种属蚕丝的特异性蛋白或特异性??序列作为免疫原，以保证抗体的高效性和特异性

图２．１基于蛋白质组学和免疫学技术的桑蚕茧蛋白质组研宄示意图??温培养箱中孵育１４?ｈ

＾ｊＶＶ??＾?＼?１６５２?１５２５?１２３５?Ｙ?５?＼?１６５７?１６２３?１５４３?１２４０?／?Ｙ?１??？?，??ｉ?ｉ???＂ｌ＿ｒ—１?■?＂ＴＴ－－－￣?？?ｉ?■?ｉ?￣ｉ?？?＾?？?ｉ?＿?蜃?■?ｉ?＿??２０００?１８００?１６００?１４００?１２００?１０００?８００?２０００?１８００?１６００?１４００?１２００?１０００?８００??Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒ?（ｃｍ?＊）?Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒ?（ｃｍ?＊）??图２．２蚕茧蛋白的红外光谱图（ａ）桑蚕茧蛋白，（ｂ）柞蚕茧蛋白??傅里叶红外变换光谱（ＦＴＩＲ）常用于蛋白质分子构象的表征。图２．２是不同溶解方法??得到的蚕茧蛋白的红外光谱，其特征区域包括酰胺Ｉ区（１７００－１５９０ｃｍ－１）、酰胺ＩＩ区（１５９０－??１４６０?ｃｍ－１）和酰胺ＩＩＩ区（１３００－１１８０?ｃｍ－１）?［２４】ｓ在所有桑蚕样品的红外光谱中（图２．２ａ），??均在１６５２ｃｍ－１、１５２５ｃｍ－１和１２３５ｃｍ－１附近出现吸收峰。其中，ＷＳＺｃｒｒＴ１处的吸收峰代表??酰胺Ｉ区的无规卷曲和ａ－螺旋结构。１５２５?ｃｎｒ１处的吸收峰代表酰胺ＩＩ区的Ｐ－折叠结构。??１２３５?ｃｍ－１处的吸收峰代表酰胺ＩＩＩ区的无规卷曲构象。此外，桑蚕茧对照样在９７７?ｃｍ－１附??近出现明显的吸收峰，是由肽链结构“Ｇｌｙ－Ｇｌｙ”和“Ｇｌｙ－Ａｌａ”中Ｃ－Ｃ键的伸缩振动产生，??与结晶区的重复氨基酸序列“ＧＡＧＡＧＳ”和“ＧＡＧＡＧＹ”密切相关［６９］。但在溶解的丝素蛋??白中未出现此吸收峰，说明溶解过程对蚕茧蛋白的二级结构，特别是结晶区结构，具有


本文编号：3009996