杀螨剂唑螨酯对牙鲆及其鳃细胞系的毒性研究
发布时间：2020-07-14 12:48
【摘要】： 唑螨酯是日本在二十世纪九十年年代开发的一种新型吡唑类杀螨剂,由于其具有高选择性杀螨作用,在世界各国农业生产中的使用越来越广泛。对唑螨酯的代谢和残留研究表明唑螨酯在土壤和水体中具有较长的残留期,而且与其作用机理相似的农药均显示对鱼类高毒,并且与人类帕金森综合征有密切关系。因此唑螨酯对水体的污染以及对水生生物的毒性和人类健康的影响也越来越受到关注。本文采用了牙鲆活体及其鳃细胞系FG-9307作为体内外检测体系,系统研究了唑螨酯对于牙鲆这种海洋经济鱼类代表物种的急性毒性作用,并初步探讨了牙鲆及其鳃细胞系这两种体内外检测体系对污染物毒性检测的相关性。 本研究首先探讨了唑螨酯对FG细胞系的体外急性毒性作用。研究发现:(1)三种检测方法测定的唑螨酯对FG细胞的48h IC50介于0.48-0.51μmol/L之间,96h IC50介于0.89-1.25μmol/L之间,说明唑螨酯对于体外培养鱼类细胞系具有毒性作用;同时也说明牙鲆鳃细胞系对于唑螨酯毒性作用比较敏感;(2)唑螨酯在0.1-30μmol/L浓度范围内对FG细胞生长具有明显抑制作用,并引起细胞形态明显改变;(3)唑螨酯影响了细胞抗氧化系统活性以及超氧阴离子的含量。经唑螨酯处理后的FG细胞,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和过氧化物酶(CAT)的活性均受到显著抑制,而超氧阴离子的含量明显升高。 其次,本研究通过对牙鲆幼体LC50测定、肝脏抗氧化酶系统活性检测以及组织化学染色等研究方法,探讨了唑螨酯对牙鲆体内急性毒性作用。研究发现:(1)唑螨酯对牙鲆幼体48h和96h LC50分别为28.77 nmol/ L和11.74 nmol/ L;(2)唑螨酯影响了牙鲆肝脏抗氧化系统活性。肝脏抗氧化酶SOD、CAT和GPX活性在唑螨酯作用下出现明显的升高,随后又降低至低于正常的水平;(3)唑螨酯还能够造成牙鲆鳃、肝脏等组织器官的急性组织结构损伤,影响组织器官正常功能。 最后,本研究对本实验室近年采用FG细胞系及玫瑰无须靶和牙鲆作为体内外毒性检测体系开展的环境污染物毒性研究数据资料进行了汇总分析,初步探讨了FG细胞系体外毒性与体内毒性检测结果之间的相关性。分析结果表明:体外毒性检测体系对环境污染物毒性检测敏感度低于体内检测体系,目前研究资料尚不能对牙鲆体内外检测体系的相关性关系做出明确判断,需要更多数据资料支持。 总之,本研究表明唑螨酯对于牙鲆显示出高毒性。牙鲆及其鳃细胞系在近年来被越来越多应用于环境污染物毒性检测中,在本实验室开展的研究中也显示出对于环境污染物具有较高的敏感性,说明牙鲆及其鳃细胞系能够很好地反映环境污染物对海洋鱼类的体内外毒性效应。这对牙鲆及鳃细胞系作为环境污染物对海洋鱼类污染检测的模式动物提供了很好的理论依据。
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：X174
【图文】：
22图 1-2 唑螨酯化学名，化学结构及代谢产物Fig 1-2 Chemical name, Chemical structure and metabolites offenpyroximate.
所有实验都重复 3 次。数据分析采用 SPSS13 版本统计软件。所有way ANOVA 评价，显著性差异设定 p＜0.05。果 唑螨酯对 FG 细胞的 48h-IC50 值和 96h-IC50 值如图 2-1 和 2-2 所示，MTT、中性红和蛋白质含量分析测定的唑螨48h-IC50值分别为0.89、0.95和1.25 μmol/L，96h-IC50值分别为0.49μmol/ L。在最低浓度组 0.1μmol/L 浓度下唑螨酯就开始表的毒性作用，而且这种毒性作用呈现明显的剂量效应关系。随着唑，细胞生长抑制程度也增大。从图中还可以看出，所选用的 MTT、质含量分析三种检测体系测得的细胞毒性作用趋势基本相同。
2-2 暴露于不同浓度唑螨酯 96 小时 FG 细胞生长抑制曲线。唑螨酯对 FG毒性作用采用中性红、MTT 和蛋白质含量三种测试终点进行测试。数值均正常对照组百分比±标准差表示。Fig. 2-2 Cell proliferation inhibition curves of FG cells exposed to differenoncentrations of fenpyroximate for 96 h.In vitro cytotoxicity of fenpyroximate ells was determined by NR assay, MTT assay, and cell protein assay. The indivdata points are expressed as the arithmetic mean percentage of control±SE.2 细胞形态变化如图 2-3 所示，FG 细胞在正常的生长状态下细胞形态呈上皮样，细胞大，细胞内颗粒少，没有空泡，胞膜清晰。经不同浓度唑螨酯处理 48 小胞均呈现不同程度皱缩，细胞间隙增大。随唑螨酯浓度增加，镜下观察到皱缩程度逐渐严重，崩解细胞数量明显增加，大量细胞脱离培养瓶底变圆壁细胞数量明显减少，到 30uM 浓度下贴壁细胞数量已经非常少。
本文编号：2754992
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：X174
【图文】：
22图 1-2 唑螨酯化学名，化学结构及代谢产物Fig 1-2 Chemical name, Chemical structure and metabolites offenpyroximate.
所有实验都重复 3 次。数据分析采用 SPSS13 版本统计软件。所有way ANOVA 评价，显著性差异设定 p＜0.05。果 唑螨酯对 FG 细胞的 48h-IC50 值和 96h-IC50 值如图 2-1 和 2-2 所示，MTT、中性红和蛋白质含量分析测定的唑螨48h-IC50值分别为0.89、0.95和1.25 μmol/L，96h-IC50值分别为0.49μmol/ L。在最低浓度组 0.1μmol/L 浓度下唑螨酯就开始表的毒性作用，而且这种毒性作用呈现明显的剂量效应关系。随着唑，细胞生长抑制程度也增大。从图中还可以看出，所选用的 MTT、质含量分析三种检测体系测得的细胞毒性作用趋势基本相同。
2-2 暴露于不同浓度唑螨酯 96 小时 FG 细胞生长抑制曲线。唑螨酯对 FG毒性作用采用中性红、MTT 和蛋白质含量三种测试终点进行测试。数值均正常对照组百分比±标准差表示。Fig. 2-2 Cell proliferation inhibition curves of FG cells exposed to differenoncentrations of fenpyroximate for 96 h.In vitro cytotoxicity of fenpyroximate ells was determined by NR assay, MTT assay, and cell protein assay. The indivdata points are expressed as the arithmetic mean percentage of control±SE.2 细胞形态变化如图 2-3 所示，FG 细胞在正常的生长状态下细胞形态呈上皮样，细胞大，细胞内颗粒少，没有空泡，胞膜清晰。经不同浓度唑螨酯处理 48 小胞均呈现不同程度皱缩，细胞间隙增大。随唑螨酯浓度增加，镜下观察到皱缩程度逐渐严重，崩解细胞数量明显增加，大量细胞脱离培养瓶底变圆壁细胞数量明显减少，到 30uM 浓度下贴壁细胞数量已经非常少。
【引证文献】
相关博士学位论文 前1条
1 于贞;三种海洋滤食动物对有机磷农药的反应及降解[D];大连理工大学;2011年
相关硕士学位论文 前1条
1 耿德玉;构建转基因鱼类细胞以快速检测环境污染物的遗传毒性[D];中国海洋大学;2012年
本文编号：2754992
本文链接：https://www.wllwen.com/shengtaihuanjingbaohulunwen/2754992.html
