植物对砷、硒、锑的富集及抗性机理研究

发布时间：2020-08-17 14:11

【摘要】： 随着工业和农业的发展,重金属不可避免的大量进入环境,导致环境污染问题日益严重。超富集植物以其对重金属的耐性、富集性等特性展示了它在重金属污染修复方面的巨大潜力。近年来,利用超富集植物修复环境污染的研究获得了学术界和公众的普遍关注。砷、硒、锑三种元素的污染问题在世界范围内广泛存在。研究这三种元素在植物体内的吸收、富集机理及相互作用过程,对于认识植物耐性机理以及植物修复技术的实践均具有理论与实际意义。本文通过一系列的水培与土培试验,以蕨类植物为主要材料,应用生理生化测定技术、氢化物原子荧光光谱法、ICP-OES测定技术以及亚细胞分离技术等手段,研究了植物对硒、锑的吸收、富集机理以及砷、硒、锑在植物体内的两两相互作用,探索研究了利用硒缓解砷、锑毒性的策略。研究成果不仅有助于了解环境有害元素在植物体内的行为特征,对于降低有害元素的环境以及健康风险也提出了可行的技术手段。取得的主要结果有: (1)研究了蜈蚣草富集硒的能力及硒胁迫条件下的抗氧化反应。结果表明:蜈蚣草是一种硒的耐性植物,其地下部硒的最大富集量为1573.3 mg kg~(-1),远高于地上部硒的富集量263.6 mg kg~(-1)。0-2 mg L~(-1)硒处理浓度对蜈蚣草有益,显著降低蜈蚣草叶片中MDA的含量;但是≥5 mg L~(-1)硒处理浓度对蜈蚣草产生损伤,显著增加植物叶片中MDA的含量,特别是在硒的最高处理浓度20 mg L~(-1)时。0-5 mg L~(-1)的硒处理显著诱导了酶POD,APX和CAT的活性,而＞5 mg L~(-1)的硒处理浓度则降低了这三种酶的活性。＞5 mg L~(-1)的硒处理浓度显著增加了蜈蚣草叶片中GSH的含量以及GR酶的活性,20 mg L~(-1)的硒处理浓度显著增强蜈蚣草叶片中SOD酶。以上结果说明,GSH、GR酶以及SOD酶可能与蜈蚣草的耐硒机理有关,起到调控超氧阴离子自由基(O_2~-)的作用;而酶POD,APX和CAT仅在低浓度硒处理条件下起到清除H_2O_2的作用。 (2)利用水培和土培试验研究了硒对蜈蚣草体内必需营养元素含量及分布的影响。结果表明:水培条件下蜈蚣草硒富集量高于土培条件下蜈蚣草的富硒量。在土培条件下,蜈蚣草同样也富集了大量的硒,其地上部和地下部硒的最大富集量分别为81 mg kg~(-1)和233 mg kg~(-1)。在土培试验中,硒抑制了几乎所有测定元素的吸收,包括镁(Mg)、钾(K)、磷(P)、铁(Fe)、铜(Cu)和锌(zn)。在水培试验条件下,当蜈蚣草体内硒含量相对较低时,硒同样也抑制了几乎所有被测元素的吸收。然而,当蜈蚣草体内硒含量增加时,硒则促进了蜈蚣草对Ca,Mg,K的吸收。在水培条件下,低剂量硒(或低硒含量)抑制、而高剂量硒(或高硒含量)促进了蜈蚣草对Fe的吸收。以上结果说明Ca,Mg,K可能与蜈蚣草的耐硒机理有关,同时我们推测硒对Fe的吸收调控可能与硒在蜈蚣草体内的双面作用有关。 (3)采用正交旋转回归设计,利用水培试验研究了蜈蚣草体内砷硒间的交互作用。结果表明:当硒处理水平小于2.5 mg L~(-1)时,增加砷处理浓度促进蜈蚣草根部硒的吸收,这一促进作用可能与硒对植物的有益作用有关。而当硒处理浓度高于2.5 mgL~(-1)时,砷抑制了蜈蚣草根部硒的吸收。蜈蚣草地上部和地下部砷的吸收均被硒抑制,表明硒对砷的拮抗作用。另外,当硒的处理浓度小于2.5 mg L~(-1)时,砷的加入促进了硒向蜈蚣草地上部的转移;硒却导致砷向蜈蚣草地上部转移能力的降低。 (4)利用水培试验比较研究了四种蕨类植物对锑的吸收富集能力以及相应的耐性机理。结果表明:锑的加入没有显著影响砷超富集植物白玉凤尾蕨的生物量,却抑制了贯众、鳞盖蕨和齿牙毛蕨的生物量。与各自对照相比,随着锑的加入,贯众、鳞盖蕨和齿牙毛蕨的生物量降低幅度分别达到12.5%,35.0%和38.3%。表明四种植物由高到低的耐锑能力。四种植物吸收的锑主要富集在根部,表明四种植物转移锑的能力较低。四种植物中,白玉凤尾蕨根部锑最大平均富集量为358 mgkg~(-1),贯众为224 mg kg~(-1),齿牙毛蕨为124 mg kg~(-1),鳞盖蕨为123 mg kg~(-1)。在20 mg L~(-1)锑处理条件下,与各自对照相比,鳞盖蕨和齿牙毛蕨叶片中MDA的含量分别增加41.3%和171.6%,而白玉凤尾蕨和贯众叶片中MDA的含量没有显著性变化,表明这两种蕨类植物中脂质过氧化反应较低。在5 mg L~(-1)锑处理条件下,白玉凤尾蕨叶片中抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(POD)以及过氧化物酶(CAT)活性均显著高于其他三种蕨类植物,表明这三种酶类在抵御锑毒性的过程中起到重要作用。在锑胁迫下,白玉凤尾蕨不变的生物量、较高的根部锑富集量、较低的叶片MDA含量以及较高的叶片抗氧化酶活性均表明白玉凤尾蕨耐锑能力高于其他三种蕨类植物。结果表明,抗氧化物酶类可能与白玉凤尾蕨较高的耐锑能力有关。 (5)利用水培试验研究了砷、锑在砷超富集植物大叶井口边草体内的相互作用以及亚细胞分布特征。结果表明:大叶井口边草是一种潜在的锑超富集植物。在不加砷、锑处理条件下,大叶井口边草叶片和茎部胞液组份聚集了绝大部分砷和锑,而细胞壁和细胞器中砷、锑含量相对较少;在单独加入锑处理时,随着锑处理浓度的增加,大叶井口边草体内锑的含量逐渐增加,叶片、茎和根部中的各个亚细胞组份中锑的含量也逐渐增加,胞液中锑含量的相对比例却降低,而细胞壁组份中锑含量的比例随着锑处理浓度的增加而增加。当砷、锑联合处理时,砷的加入显著促进了植物对锑的吸收,并且低剂量砷的促进作用要高于高剂量砷的促进作用。增加的砷处理浓度诱导更多的锑被转移富集于植物胞液组份中,而这一过程伴随着砷在胞液中比例的降低。在低砷处理条件下,锑的加入轻微促进了植物对砷的吸收,然而这种促进作用伴随着植物富集砷潜力的降低,表现为大叶井口边草胞液组份中砷含量以及相对比例的降低;在高砷处理下,锑的加入抑制了植物对砷的吸收,显著降低了茎部砷的含量,同时也降低了叶片和茎不胞液组份中砷含量的比例。表明锑对水稻具有很强的毒性。当不加锑时,0.1 mg L~(-1)硒的加入未显著影响水稻的生物量,却显著抑制了叶片MDA;≥1 mg L~(-1)硒的加入则显著降低了水稻的生物量并增加了叶片MDA的含量,表现出硒对水稻的两面性作用。硒的加入显著增加了水稻叶片中蛋白质的含量,而5 mg L~(-1)锑的加入却逆转了这一趋势,蛋白质含量随着硒处理浓度的增加而降低。当硒、锑联合处理时,增加的硒处理浓度降低了水稻各个部位锑的含量,表现出硒对锑的拮抗作用。另外,与5 mg L~(-1)单独锑处理浓度相比,1 mg L~(-1)硒的添加降低了5 mg L~(-1)单独锑处理下的叶片MDA含量,并且显著增加了该锑处理下的水稻生物量,此时水稻的生物量甚至要高于不加硒、锑的对照处理下水稻的生物量,以上结果表明硒缓解了锑对水稻的毒性。5 mg L~(-1)锑的加入也能缓解1 mg L~(-1)或者5 mg L~(-1)硒对水稻的毒害,表现为水稻生物量的增加、降低的叶片MDA含量以及降低的地上部硒含量。意外的是,当硒处理浓度为1 mg L~(-1)或者5 mg L~(-1)时,随着锑处理浓度的增加,硒被优先富集在水稻根部。以上结果反映了水稻体内硒、锑互相解毒的过程,而硒对锑的解毒功能可能主要与硒对锑的拮抗作用有关,而部分与硒的抗氧化功能有关。
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：X173
【图文】：

子培,幼苗

APX、CAT、POD、GR、可溶蛋白含量。2.2.2试验过程娱蛤草抱子在温室中进行萌发与培养，见图2一1。抱子萌发及幼苗生长的介质中没有人为的加入硒。在温室条件下，将娱蛤草抱子播撒在过100目的高温消毒过的通州(北京)土壤上，抱子萌芽长出3一5片叶片后，将娱蛤草移栽至生长基质为:1/3蛙石，1/3沙石和2/3草炭土中培养。等幼苗长到具有8一12片羽叶时，选择健康大小一致的娱蛤草植株进行水培试验。生长的温室条件如下:温度25oc到28℃，相对湿度大约75%，14个小时的光照

照片,状况,照片,子培

e灯的测定参照陈建勋等(2002)以及Brennan和Frenkel(1977)的方法;pOD的测定参照陈建勋等(2002)以及La幼mini(1991)的方法。图2一1抱子培养、幼苗栽培与温室条件FigZ一 1GerminationofChinesebrakefernsPores， eultivationofsPorelingsandtheeonditionsofgreenhouse2.2.3.4蛋白质含量的测定考马斯亮蓝G一250染色法，参照李合生等(2000)以及Bradford(1976)的方法。

照片,状况,照片,水培试验

娱蛤草体内植物必需营养元素吸收、分布的影响。3.2材料与方法3.2.1试验设计设计不同水平的Se处理进行土培和水培试验，其中土培试验Se处理分别为:o，10，20，50，一00mgkg一，;而水培的se处理分别为:o，l，2，5，10，20mgL一，。其中水培试验的幼苗收获后测定:l)植物地上部和地下部矿质养分的含量(P、K、ca、Mg、Mn、Zn、Fe、Cu等);2)测定植物地上和地下组织中的硒的含量:3)植物生理指标:GSH、SOD、APX、CAT、POD、GR、可溶蛋白含量。关于水培植物生理指标的结果，我们已经在上面第二章中讨论，这里我们仅就元素含量进行讨论。上培试验的植物收获后同样也要测定上述矿质养分的含量以及地上部和根部硒的含里乳。3.2.2试验过程

【引证文献】