一株异养硝化细菌的分离培养及鉴定
发布时间：2021-02-11 12:08
目的:分离培养泰安市奈河水系城区段水样中具有硝化能力的细菌,并对其进行分离培养和鉴定。方法:采集泰安市奈河水系城区段的水样,使用选择性培养基进行增菌培养、分离培养和纯培养,获得纯培养的菌株并保存;对水样中分离培养得到的细菌进行硝化能力检测、16SrDNA的基因测序与对比、形态特征观察、生化实验与鉴定。结果:分离一株具有硝化能力的菌株,测序分析该菌株属于黄杆菌属,生化反应鉴定该株细菌为金黄杆菌Ⅱb。结论:泰安市奈河水系城区段水样中含有异养型硝化细菌,其在生态循环中可能发挥重要作用。
【文章来源】：生物化工. 2020,6(04)
【文章页数】：4 页
【部分图文】：
图1 分离菌株硝化能力统计图
通过测序，获得4号菌株16SrDNA有效长度为1 477 bp。测序结果使用BLAST＿W与Gen Bank数据库中序列进行比对，与数据库中的Flavobacterium sp.WB2.1-16有98.15%的同源性；与数据库中的Flavobacterium sp.UMI-01有97.35%的同源性；与数据库中的Flavobacterium sp.WB2.1-19有97.40%的同源性。其系统发育树图见图2。所以，可以确定4号菌株属于黄杆菌属（Flavobacterium sp.）细菌。2.3 生化鉴定结果
根据核酸测序与比对结果以及以上生物学特性，选择HX-21细菌鉴定系统的非发酵鉴定板，其结果见表1。通过与鉴定数据库比对，4号菌株属于金黄杆菌Ⅱb菌种，概率为99%。环境中的氮素分为有机氮和无机氮，且以无机氮为主。氮素输出有多种方式，其中与植物吸收利用密切相关的是硝态氮中的硝酸根。自然环境中，氨氮转化为硝酸根的过程被普遍认为由微生物完成，其中包括亚硝化细菌、硝化细菌以及非硝化细菌但具有硝化能力的其他微生物。近年来，异养型具有硝化能力的细菌被陆续发现。唐伟等[2]2019年报道了6株具有异养硝化作用的细菌，其中一株对NH4+-N去除率为75.67%，经16SrDNA测序鉴定，菌株HNM-4为假单胞菌（Pseudomonas sp.）。邰勇等[3]2019年报道了一株农杆菌属（Agrobacterium sp.）的异养硝化菌BT1，该菌株具有高效的异养硝化性能及优异的氨氮耐受性，在高氨氮浓度（500 mg/L和1 000 mg/L）下生长良好且NH4+-N去除率均超过64.69%。杨垒等[4]2019年报道了一株高效异养硝化细菌（Pseudomonas aeruginosa YL），结果表明，菌株YL不但具有高效的异养硝化能力，而且具有好氧反硝化能力。本研究在泰安市泰山区奈河城区河段分离培养出异养型具有亚硝化能力的一株细菌，经16SrRNA测序鉴定，属于黄苷菌属，生化鉴定为金黄杆菌Ⅱb。此类细菌的存在，与其所处环境的微生物生态环境直接相关，并且在整个生态链条中发挥着不可或缺的作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]北运河底泥中异养硝化菌的筛选及其脱氮特性[J]. 唐伟,张远,刘缨,王书平,刘志培,丁森. 环境工程. 2019(10)
[2]异养硝化细菌Pseudomonas aeruginosa YL的脱氮过程及N2O产生特性[J]. 杨垒,崔珅,任勇翔,郭淋凯,张志昊,肖倩,陈宁,汪旭晖. 环境科学. 2020(02)
[3]一株Agrobacterium sp.异养硝化菌的分离鉴定及其氨氧化性能[J]. 邰勇,邓敬轩,任洪艳,黄振兴,阮文权. 应用与环境生物学报. 2020(02)
[4]脱氮菌Flavobacterium sp.FL211T的筛选与硝化特性研究[J]. 甘美君,曾庆鹏,王海蓉,麦热当·努热苏里坦,赵鑫,胡筱敏. 环境保护与循环经济. 2017(11)
[5]异养硝化细菌的生物脱氮[J]. 周宁一. 微生物学通报. 2016(10)
本文编号：3029087
【文章来源】：生物化工. 2020,6(04)
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【部分图文】：
图1 分离菌株硝化能力统计图
通过测序，获得4号菌株16SrDNA有效长度为1 477 bp。测序结果使用BLAST＿W与Gen Bank数据库中序列进行比对，与数据库中的Flavobacterium sp.WB2.1-16有98.15%的同源性；与数据库中的Flavobacterium sp.UMI-01有97.35%的同源性；与数据库中的Flavobacterium sp.WB2.1-19有97.40%的同源性。其系统发育树图见图2。所以，可以确定4号菌株属于黄杆菌属（Flavobacterium sp.）细菌。2.3 生化鉴定结果
根据核酸测序与比对结果以及以上生物学特性，选择HX-21细菌鉴定系统的非发酵鉴定板，其结果见表1。通过与鉴定数据库比对，4号菌株属于金黄杆菌Ⅱb菌种，概率为99%。环境中的氮素分为有机氮和无机氮，且以无机氮为主。氮素输出有多种方式，其中与植物吸收利用密切相关的是硝态氮中的硝酸根。自然环境中，氨氮转化为硝酸根的过程被普遍认为由微生物完成，其中包括亚硝化细菌、硝化细菌以及非硝化细菌但具有硝化能力的其他微生物。近年来，异养型具有硝化能力的细菌被陆续发现。唐伟等[2]2019年报道了6株具有异养硝化作用的细菌，其中一株对NH4+-N去除率为75.67%，经16SrDNA测序鉴定，菌株HNM-4为假单胞菌（Pseudomonas sp.）。邰勇等[3]2019年报道了一株农杆菌属（Agrobacterium sp.）的异养硝化菌BT1，该菌株具有高效的异养硝化性能及优异的氨氮耐受性，在高氨氮浓度（500 mg/L和1 000 mg/L）下生长良好且NH4+-N去除率均超过64.69%。杨垒等[4]2019年报道了一株高效异养硝化细菌（Pseudomonas aeruginosa YL），结果表明，菌株YL不但具有高效的异养硝化能力，而且具有好氧反硝化能力。本研究在泰安市泰山区奈河城区河段分离培养出异养型具有亚硝化能力的一株细菌，经16SrRNA测序鉴定，属于黄苷菌属，生化鉴定为金黄杆菌Ⅱb。此类细菌的存在，与其所处环境的微生物生态环境直接相关，并且在整个生态链条中发挥着不可或缺的作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]北运河底泥中异养硝化菌的筛选及其脱氮特性[J]. 唐伟,张远,刘缨,王书平,刘志培,丁森. 环境工程. 2019(10)
[2]异养硝化细菌Pseudomonas aeruginosa YL的脱氮过程及N2O产生特性[J]. 杨垒,崔珅,任勇翔,郭淋凯,张志昊,肖倩,陈宁,汪旭晖. 环境科学. 2020(02)
[3]一株Agrobacterium sp.异养硝化菌的分离鉴定及其氨氧化性能[J]. 邰勇,邓敬轩,任洪艳,黄振兴,阮文权. 应用与环境生物学报. 2020(02)
[4]脱氮菌Flavobacterium sp.FL211T的筛选与硝化特性研究[J]. 甘美君,曾庆鹏,王海蓉,麦热当·努热苏里坦,赵鑫,胡筱敏. 环境保护与循环经济. 2017(11)
[5]异养硝化细菌的生物脱氮[J]. 周宁一. 微生物学通报. 2016(10)
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