阳离子脂质体基因转染能力及其环境效应研究

发布时间：2021-04-23 19:29

　　基因治疗是癌症等疾病的有效治疗手段,高效、安全的基因载体是基因治疗成功的关键技术之一。阳离子脂质体因其安全性高、易生产、低免疫原性以及基因递送的有效性日益受到广泛关注,基于阳离子脂质体的复合载体也显示出良好的发展前景。新的类脂分子不断涌现,研究结构与转染效率的构效关系,细胞递送机制对于提高转染效率和指导类脂分子的合成以及化学修饰具有重要意义。论文以4类新型季铵盐表面活性剂为阳离子类脂制备脂质体,采用TEM, DLS,凝胶电泳对脂质体进行物化性质表征。结果表明,脂质体平均粒径为100-300nm,脂质体与DNA结合能力强。以GFP和荧光素酶为报告基因,进行了转染能力评价。结果显示,部分阳离子脂质体对Hela和Hep-2细胞可实现高效转染。构效关系研究表明,C3系列双子型双电荷头部的基因载体相对于单子型单电荷C1系列以及增加延伸区的单电荷C2系列和双电荷C4系列具有较高的细胞转染能力,其中,化合物C3-12的基因转染能力较高。构建了低分子量壳聚糖/脂质体/pDNA三元非共价键新型复合载体,显著提高了脂质体的基因递送核酸能力。凝胶延滞和AFM实验表明,复合载体与pDNA结合能力强,可完全延滞... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 阳离子脂质体基因转染及其环境效应文献综述
    1.1 基因治疗
    1.2 基因载体
        1.2.1 病毒载体
        1.2.2 非病毒载体
    1.3 阳离子脂质体基因载体
        1.3.1 类脂结构
        1.3.2 阳离子脂质体结构
        1.3.3 复合物形态
        1.3.4 基于阳离子脂质体的复合型载体
        1.3.5 血清
        1.3.6 毒性
    1.4 阳离子脂质体基因转运过程
        1.4.1 载体细胞吸附和摄入
        1.4.2 内涵体释放和复合物解离
        1.4.3 核摄入
    1.5 阳离子类脂（季铵盐类表面活性剂）的环境效应
        1.5.1 表面活性剂的环境行为
        1.5.2 环境中表面活性剂生物降解
        1.5.3 表面活性剂及其降解产物的生物效应
    1.6 季铵盐类化合物的污染控制技术
        1.6.1 吸附分离法
        1.6.2 催化氧化法
        1.6.3 泡沫分离法
        1.6.4 混凝法
        1.6.5 生物处理法
        1.6.6 联合处理法
    1.7 论文研究内容及意义
第二章 脂质体和复合基因载体物理化学性质研究
    2.1 论文选用阳离子类脂的结构
    2.2 脂质体形态研究
        2.2.1 材料与方法
        2.2.2 结果与讨论
    2.3 脂质体与DNA的结合作用
        2.3.1 材料与方法
        2.3.2 结果与讨论
    2.4 脂质体/壳聚糖/DNA三元复合基因载体物理化学性质研究
        2.4.1 材料与方法
        2.4.2 结果与讨论
    2.3 本章小结
第三章 脂质体和复合基因载体细胞转染研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 阳离子脂质体转染研究
        3.2.2 阳离子脂质体/壳聚糖复合载体基因转染研究
    3.3 本章小结
第四章 脂质体和复合载体胞内基因递送过程研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果与讨论
        4.2.1 阳离子脂质体胞内过程研究
        4.2.2 阳离子脂质体/壳聚糖复合载体胞内过程研究
    4.3 本章小结 #
第五章 脂质体及复合基因载体毒性研究
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 结果与讨论
        5.2.1 动物细胞毒性
        5.2.2 栅藻毒性
        5.2.3 裙带菜配子体毒性
        5.2.4 发光细菌毒性
    5.5 本章小结
第六章 脂质体基因载体活性污泥降解性研究
    6.1 材料与方法
        6.1.1 材料
        6.1.2 方法
    6.2 结果与讨论
        6.2.1 脂质体基因载体生物降解研究
        6.2.2 生物降解性与表面活性剂结构的关系
    6.3 本章小结
第七章 结论与展望
    7.1 主要结论
    7.2 建议
创新点摘要
参考文献
攻读博士学位期间发表学术论文情况
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]表面活性剂废水无害化处理的研究进展[J]. 佘航,尹鹏,金鸽,史德佩,李祥.  天津化工. 2011(06)
[2]阳离子脂质体介导的基因转移机制[J]. 王冰,张树彪,周集体,赵不凋,杨宝灵,崔绍辉,赵轶男.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(08)
[3]表面活性剂生物降解性研究现状与展望[J]. 郭睿,来肖,赵艳艳,韦鹏,孙江.  湖北造纸. 2010(03)
[4]表面活性剂CTAC和STAB对蛋白核小球藻的毒作用[J]. 卓静,荆国华,李小林,周作明.  农业环境科学学报. 2010(08)
[5]季铵化合物对环境的影响及微生物降解研究进展[J]. 张冲,李克勋,刘东方.  环境污染与防治. 2009(08)
[6]三氯异氰尿酸与盐酸环丙沙星对蛋白核小球藻的毒性效应[J]. 聂湘平,王翔,陈菊芳,鹿金雁,李潇,杨永涛.  环境科学学报. 2007(10)
[7]脂质体物理稳定性和包封率的影响因素[J]. 郭海燕,莫穗林.  中国新药杂志. 2004(06)
[8]改性粉煤灰处理含阳离子表面活性剂废水的研究[J]. 于晓彩,邵红,王武名,王恩德.  环境工程. 2003(05)
[9]季铵盐类化合物灭杀赤潮异弯藻的实验研究[J]. 曹西华,俞志明.  海洋与湖沼. 2003(02)
[10]脂质体处方和制备方法对阿昔洛韦棕榈酸酯脂质体稳定性的影响[J]. 刘辉,汤韧,何晓霞,张宜.  药学学报. 2002(07)



本文编号：3155904