睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因功能及表达调控研究
发布时间：2021-06-28 12:30
睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonas testosteroni）具有降解许多难降解化合物的能力,在污染物的生物修复上具有很高的应用价值。但是,该菌对甾类物质的代谢酶并不是组成型表达的,其表达受到环境中甾类化合物的诱导。因此,该菌对污染物的消化降解速度很慢,限制了该菌在生物修复中的大规模应用。睾丸酮丛毛单胞菌中受睾丸酮诱导表达的调节因子称为teiR基因（testosterone-inducible regulator, teiR）,teiR基因在类固醇代谢过程中具有十分重要的意义,可以激活或抑制相关代谢酶基因的表达。因此,本研究通过对teiR基因的克隆及功能分析,从基因转录调控的角度入手,对睾丸酮丛毛单胞菌进行定向调控,提高其降解能力,揭示睾丸酮丛毛单胞菌包括关键酶3a-HSD/CR在内的一系列基因的表达调控机制。该研究对于改造睾丸酮丛毛单胞菌,开发利用睾丸酮丛毛单胞菌进行污染物的环境生物修复等都具有十分重要的意义。研究结果如下:1.根据已报道的睾丸酮丛毛单胞菌调节因子序列设计引物,从睾丸酮丛毛单胞菌ATCC11996菌株中克隆了teiR基因（GenBank登录号:FJ890932）。序...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：144 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
甾体母核Fig.1-1Thenucleusofsteroid
15图1-2 睾丸酮丛毛单胞菌类固醇化合物代谢途径Fig.1-2 Putative pathways of steroids degradation in C. testosteroni TA441(Coulterand Talalay, 1968; Dodson and Muir, 1958a, b, 1961; Gibson et al., 1966; Sih et al.,1963, 1965a, b, 1966; Horinouchi et al., 2001a, b, 2003a, b, 2004a, b, 2005, 2006,2008; Fahrbach, 2006; Kieslich, 1985)4.2 睾丸酮丛毛单胞菌类固醇代谢基因簇在睾丸酮丛毛单胞菌（C. testosteroni）TA441基因组DNA上存在至少两个类固醇代谢酶编码基因的基因簇，其中一个包含ORF10、steA、steB、ORF7、ORF6、tesB、ORF1、ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF21、ORF22、ORF23、ORF25、ORF26、ORF27、ORF28、ORF30、ORF31、ORF32、ORF33和tesR基因，另外一个包含ORF18、ORF17、tesI、tesH、tesA2、tesA1、tesD、tesE、tesF和tesG基因，目前已对基因簇部分基因的功能进行了分析（Horinouchi et al. 2001a, b, 2003a,b, 2004a
图 1-3 3α-HSDH 单体的三维结构 Three-dimensional structure of the 3α-HSDH monomer（Grimm et a-HSD/CR 基因位于睾丸酮丛毛单胞菌（C. testosteroni） ATCC 119A 的 5.257-kb EcoRI 的酶切片断上（M bus and Maser, 1998, 199个 5.257-kb EcoRI 酶切片断的结构示意图。3a-HSD/CR 基因上游bp 回文操纵基因序列，研究发现这两个操纵基因能够形成茎-structure）（Xiong et al., 2003c）。同时在 3a-HSD/CR 基因附近还含repA、repB、activator、ksi）和 2 个阅读框（ORF1 和 ORF3）。5–3-酮类固醇异构酶（Δ5–3-ketosteroid isomerase）（Cho et al., 1992; Zhao et al., 1996）。ORF1 与 ORF3 的方向相反，activator 基因码基因，能够诱导睾丸酮丛毛单胞菌相关代谢酶基因的表达（戴2006；陈建秋等，2008a）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因载体构建及在大肠杆菌中的表达[J]. 陈建秋,潘大仁,周以飞,卢文标,程晓春,王占成,陈雅艳,林钿. 农业生物技术学报. 2008(04)
[2]土壤中阴离子表面活性剂对17β-雌二醇吸附脱附的影响[J]. 王联芝,章飞芳,薛兴亚,徐青,梁鑫淼. 精细化工. 2008(07)
[3]天然及人工合成雌激素在环境中迁移转化的研究[J]. 杨诗家. 有色冶金设计与研究. 2008(03)
[4]tac启动子碱基突变对睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonas testosteroni）降解能力的影响[J]. 陈建秋,潘大仁,周以飞,程晓春,张剑亮,卢文标,陈雅艳,林钿. 农业生物技术学报. 2008(02)
[5]天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中dnrV基因的克隆及应用[J]. 宫倩,谢丽萍,胡又佳,朱春宝,朱宝泉. 中国医药工业杂志. 2007(02)
[6]睾丸酮丛毛单胞菌活化因子基因的质粒载体构建及表达[J]. 戴艺民,潘大仁,吴明霞,周以飞. 农业生物技术学报. 2006(03)
[7]不同-10区保守序列的tac启动子表达睾丸酮丛毛单胞菌中的活化因子[J]. 戴艺民,周以飞,吴明霞,潘大仁. 农业生物技术学报. 2005(06)
[8]代谢工程酵母菌合成紫杉烯的研究[J]. 王伟,孟超,朱平,程克棣. 中国生物工程杂志. 2005(08)
[9]睾丸酮丛毛单胞菌的分离和鉴定及3α-羟类固醇脱氢酶在大肠杆菌中的克隆表达[J]. 张国华,丛爱日,徐国宾,孙立颖,严岩,夏铁安. 北京大学学报(医学版). 2005(02)
[10]阿维菌素B产生菌寡霉素合成阻断株的构建[J]. 张晓琳,陈芝,赵金雷,宋渊,文莹,李季伦. 科学通报. 2004(01)
博士论文
[1]睾丸酮丛毛单胞菌3α-HSD/CR等基因的表达调控研究[D]. 戴艺民.福建农林大学 2005
本文编号：3254322
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：144 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
甾体母核Fig.1-1Thenucleusofsteroid
15图1-2 睾丸酮丛毛单胞菌类固醇化合物代谢途径Fig.1-2 Putative pathways of steroids degradation in C. testosteroni TA441(Coulterand Talalay, 1968; Dodson and Muir, 1958a, b, 1961; Gibson et al., 1966; Sih et al.,1963, 1965a, b, 1966; Horinouchi et al., 2001a, b, 2003a, b, 2004a, b, 2005, 2006,2008; Fahrbach, 2006; Kieslich, 1985)4.2 睾丸酮丛毛单胞菌类固醇代谢基因簇在睾丸酮丛毛单胞菌（C. testosteroni）TA441基因组DNA上存在至少两个类固醇代谢酶编码基因的基因簇，其中一个包含ORF10、steA、steB、ORF7、ORF6、tesB、ORF1、ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF21、ORF22、ORF23、ORF25、ORF26、ORF27、ORF28、ORF30、ORF31、ORF32、ORF33和tesR基因，另外一个包含ORF18、ORF17、tesI、tesH、tesA2、tesA1、tesD、tesE、tesF和tesG基因，目前已对基因簇部分基因的功能进行了分析（Horinouchi et al. 2001a, b, 2003a,b, 2004a
图 1-3 3α-HSDH 单体的三维结构 Three-dimensional structure of the 3α-HSDH monomer（Grimm et a-HSD/CR 基因位于睾丸酮丛毛单胞菌（C. testosteroni） ATCC 119A 的 5.257-kb EcoRI 的酶切片断上（M bus and Maser, 1998, 199个 5.257-kb EcoRI 酶切片断的结构示意图。3a-HSD/CR 基因上游bp 回文操纵基因序列，研究发现这两个操纵基因能够形成茎-structure）（Xiong et al., 2003c）。同时在 3a-HSD/CR 基因附近还含repA、repB、activator、ksi）和 2 个阅读框（ORF1 和 ORF3）。5–3-酮类固醇异构酶（Δ5–3-ketosteroid isomerase）（Cho et al., 1992; Zhao et al., 1996）。ORF1 与 ORF3 的方向相反，activator 基因码基因，能够诱导睾丸酮丛毛单胞菌相关代谢酶基因的表达（戴2006；陈建秋等，2008a）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因载体构建及在大肠杆菌中的表达[J]. 陈建秋,潘大仁,周以飞,卢文标,程晓春,王占成,陈雅艳,林钿. 农业生物技术学报. 2008(04)
[2]土壤中阴离子表面活性剂对17β-雌二醇吸附脱附的影响[J]. 王联芝,章飞芳,薛兴亚,徐青,梁鑫淼. 精细化工. 2008(07)
[3]天然及人工合成雌激素在环境中迁移转化的研究[J]. 杨诗家. 有色冶金设计与研究. 2008(03)
[4]tac启动子碱基突变对睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonas testosteroni）降解能力的影响[J]. 陈建秋,潘大仁,周以飞,程晓春,张剑亮,卢文标,陈雅艳,林钿. 农业生物技术学报. 2008(02)
[5]天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中dnrV基因的克隆及应用[J]. 宫倩,谢丽萍,胡又佳,朱春宝,朱宝泉. 中国医药工业杂志. 2007(02)
[6]睾丸酮丛毛单胞菌活化因子基因的质粒载体构建及表达[J]. 戴艺民,潘大仁,吴明霞,周以飞. 农业生物技术学报. 2006(03)
[7]不同-10区保守序列的tac启动子表达睾丸酮丛毛单胞菌中的活化因子[J]. 戴艺民,周以飞,吴明霞,潘大仁. 农业生物技术学报. 2005(06)
[8]代谢工程酵母菌合成紫杉烯的研究[J]. 王伟,孟超,朱平,程克棣. 中国生物工程杂志. 2005(08)
[9]睾丸酮丛毛单胞菌的分离和鉴定及3α-羟类固醇脱氢酶在大肠杆菌中的克隆表达[J]. 张国华,丛爱日,徐国宾,孙立颖,严岩,夏铁安. 北京大学学报(医学版). 2005(02)
[10]阿维菌素B产生菌寡霉素合成阻断株的构建[J]. 张晓琳,陈芝,赵金雷,宋渊,文莹,李季伦. 科学通报. 2004(01)
博士论文
[1]睾丸酮丛毛单胞菌3α-HSD/CR等基因的表达调控研究[D]. 戴艺民.福建农林大学 2005
本文编号：3254322
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