偶氮染料高效降解基因工程菌构建与特性研究

发布时间：2021-07-18 08:08

　　偶氮染料的生物降解已得到较为深入的研究，分离得到多种具有偶氮染料脱色活性的微生物，并有数种偶氮还原酶基因经大肠杆菌表达获得高纯度、高效率的偶氮还原酶，但是酶制剂的应用受到各种条件的限制，成本较高。因此，考虑提高微生物本身的偶氮染料脱色活性，以便于工程应用。 本文的目的是构建一株具有较高偶氮染料脱色活性的基因工程菌，并考察其对偶氮染料的脱色特性。该工程菌是以沼泽红假单胞菌／大肠杆菌穿梭质粒为载体，将外源基因（来自球形红细菌Rhodobacter sphaeroides AS1.1737的偶氮还原酶基因）导入受体菌（沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas palustris AS1.2352），使受体菌表达外源偶氮还原酶，从而提高该工程菌的偶氮染料脱色能力。为达到以上目标，首先，在工程菌构建之前，通过考察外源偶氮还原酶基因的供体菌（球形红细菌）和受体菌（沼泽红假单胞菌）的偶氮染料脱色活性，以及受体菌细胞中质粒DNA的种数及其复制等相关情况，验证该构建途径的可行性；进而构建穿梭质粒及工程菌；最后，以原始受体菌为对照，考察工程菌的生长及脱色特性。 对球形红细菌Rhodoba... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

粗酶纯化的垂直电泳图

温度(℃)图3.11不同温度下SDS对染料脱色的影响Fi.g3·11E月免ctofDSSondeeolorh，tionatdi月erernttemPearutesr无机盐培养基，含0.4%酵母膏，酸性红Bsoom叭，30℃，光照缺出了不同温度下，SDS(0.1%)对染料脱色影响。由图可以

峨，seudomonas夕aulsrtsiAs1.2352野生质粒的提取和鉴定.42.2.1野生质粒的提取与回收用上述改进的质粒提取方法对该菌进行初步提取操作，结果如图.42所示，共显示有8条较为明显的DNA带。

【参考文献】：
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本文编号：3289191