核糖体展示Anticalin模拟抗体库的构建及其在雌二醇、百草枯模拟抗体筛选中的应用
发布时间：2022-02-08 22:03
本论文介绍了核糖体展示（ribosome display）方法用于小分子环境化学污染物模拟抗体（anticalin）筛选的原理、实验技术，并以典型环境化学污染物雌二醇、百草枯为研究对象，对它们的模拟抗体进行了活性鉴定。雌二醇是一种小分子甾体类激素,在组织液及血液中的含量可反应妇产科、内科、内分泌科、骨科及肿瘤等多种疾病,具有广泛的临床应用价值。因其可以提高畜禽瘦肉比并促进动物生长，在畜禽养殖业曾经被广泛应用。但由于雌二醇可在动物组织内形成残留，通过食物链危害人类健康，使男性儿童乳腺发育呈女性化，男性生殖系统发育异常或引起病变，女性儿童提前发育，并导致女性乳腺癌和子宫内膜异位症的发生率上升。因此，对肉及其肉制品中雌二醇的监测是确保广大市民食用“放心肉”的必要措施。百草枯（Paraquat, PQ）又名克芜踪，是一种速效触杀型灭生性季铵盐类除草剂，是我国广泛使用的除草剂之一。百草枯有效成分为1，1′-二甲基-4，4′-联吡啶阳离子盐,它在农作物中的残留对人、兽有毒害作用。百草枯可以经胃肠道、呼吸道和皮肤吸收，以导致肺纤维化。我国国标GB1633321996规定:菜籽油、柑桔、成品粮、梨和苹...
【文章来源】：天津大学天津市211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
雌二醇的结构式
1.2 百草枯：1,1-二甲基-4,4-联吡啶阳离Fig 1.2 The structure of Paraquats用及毒副作用是一种联吡啶类、触杀型、灭生性除草剂应用于园林除草、非耕地化学除草（例如等的除草），能杀灭大部分阔叶杂草及禾药液接触土壤后，能被土壤的胶体迅速并自从 1955 年英国 ICI 作物保护公司发现世界上 130 多个国家和地区得到推广和应用量在进一步扩大[24]。我国是百草枯最大毒性有很强的毒性作用。大多数是由于误服或收中毒致死。有资料显示，使用百草枯除
过来自美国、瑞士、英国等不同研究组的不断改进和完善，该展示技术已经日臻成熟，目前成为一种十分有效的研究体外分子选择与进化强有力的工具。图1.3 Ribosome Display 技术流程图Fig 1.3 Schematic representation of a ribosome display selection round1.2.5 核糖体展示的优势RD 技术的应用使得构建大容量分子文库变得容易，随之采用合适的筛选方法，可以快速、非常简便、有效的筛选到生物活性物质。RD 的优点有：(1) 建库方法简便。RD 技术完全在体外进行，通过 PCR 进行所有复制与扩增，因此，可方便地建立核糖体表面展示文库。(2)库容量大，分子多样性增加，增加了获得目标分子的机会。在一般情况下，蛋白质配体反应功能分子比非功能分子序列要少得多，所以，能否获得具有特定活性分子的机率与可供筛选的 RD 展示库容量成正比[61-63]。大容量具有两个优势：可提高给定亲和力值分子序列的多样性，也可提高目标分子筛选的机率。RD 技术完全在体外进行，无细胞系中含有高浓度的核糖体(1013～1015/mL)
【参考文献】：
期刊论文
[1]百草枯人工抗原的合成及抗体的制备[J]. 杨婷婷,孙秀兰,邵景东,王洪新. 细胞与分子免疫学杂志. 2008(09)
[2]百草枯中毒所致的肺损害及治疗进展[J]. 宁宗,李其斌. 蛇志. 2007(03)
[3]血中百草枯的紫外分光光度测定法[J]. 赵燕燕,刘会芳,郝丽娜,王丽娟. 环境与健康杂志. 2007(05)
[4]百草枯中毒的肺部损害[J]. 冯亚宾,崔朝勃. 临床肺科杂志. 2006(05)
[5]畜产品中雌二醇检测方法的研究进展[J]. 戴小华,吴国娟,沈红,李焕荣,赵晓萌,陆彦,康荣芹. 中国农学通报. 2005(05)
[6]血液中百草枯的GC-MSD快速检测法[J]. 麦剑平,许启荣. 职业与健康. 2004(04)
[7]半抗原:N-甲基-N′-戊酸基-二吡啶-二溴化物的合成[J]. 马兆扬,黄金祥. 卫生研究. 2004(02)
[8]保健食品中雌二醇激素的固相萃取反向高效液相色谱测定法[J]. 林春晓,邰昌松,李红华,陈小燕,尹江伟. 职业与健康. 2003(09)
[9]应用自动酶联免疫荧光仪（VIDAS）检测禽类组织中雌二醇水平[J]. 顾鸣,韩伟,孙文清. 检验检疫科学. 2003(04)
[10]百草枯在土壤中的安全性及残留检测技术简介[J]. 吴志凤,秦冬梅. 农药科学与管理. 2003(03)
硕士论文
[1]除草剂百草枯的毒理安全性研究[D]. 庄英男.吉林农业大学 2007
本文编号：3615833
【文章来源】：天津大学天津市211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
雌二醇的结构式
1.2 百草枯：1,1-二甲基-4,4-联吡啶阳离Fig 1.2 The structure of Paraquats用及毒副作用是一种联吡啶类、触杀型、灭生性除草剂应用于园林除草、非耕地化学除草（例如等的除草），能杀灭大部分阔叶杂草及禾药液接触土壤后，能被土壤的胶体迅速并自从 1955 年英国 ICI 作物保护公司发现世界上 130 多个国家和地区得到推广和应用量在进一步扩大[24]。我国是百草枯最大毒性有很强的毒性作用。大多数是由于误服或收中毒致死。有资料显示，使用百草枯除
过来自美国、瑞士、英国等不同研究组的不断改进和完善，该展示技术已经日臻成熟，目前成为一种十分有效的研究体外分子选择与进化强有力的工具。图1.3 Ribosome Display 技术流程图Fig 1.3 Schematic representation of a ribosome display selection round1.2.5 核糖体展示的优势RD 技术的应用使得构建大容量分子文库变得容易，随之采用合适的筛选方法，可以快速、非常简便、有效的筛选到生物活性物质。RD 的优点有：(1) 建库方法简便。RD 技术完全在体外进行，通过 PCR 进行所有复制与扩增，因此，可方便地建立核糖体表面展示文库。(2)库容量大，分子多样性增加，增加了获得目标分子的机会。在一般情况下，蛋白质配体反应功能分子比非功能分子序列要少得多，所以，能否获得具有特定活性分子的机率与可供筛选的 RD 展示库容量成正比[61-63]。大容量具有两个优势：可提高给定亲和力值分子序列的多样性，也可提高目标分子筛选的机率。RD 技术完全在体外进行，无细胞系中含有高浓度的核糖体(1013～1015/mL)
【参考文献】：
期刊论文
[1]百草枯人工抗原的合成及抗体的制备[J]. 杨婷婷,孙秀兰,邵景东,王洪新. 细胞与分子免疫学杂志. 2008(09)
[2]百草枯中毒所致的肺损害及治疗进展[J]. 宁宗,李其斌. 蛇志. 2007(03)
[3]血中百草枯的紫外分光光度测定法[J]. 赵燕燕,刘会芳,郝丽娜,王丽娟. 环境与健康杂志. 2007(05)
[4]百草枯中毒的肺部损害[J]. 冯亚宾,崔朝勃. 临床肺科杂志. 2006(05)
[5]畜产品中雌二醇检测方法的研究进展[J]. 戴小华,吴国娟,沈红,李焕荣,赵晓萌,陆彦,康荣芹. 中国农学通报. 2005(05)
[6]血液中百草枯的GC-MSD快速检测法[J]. 麦剑平,许启荣. 职业与健康. 2004(04)
[7]半抗原:N-甲基-N′-戊酸基-二吡啶-二溴化物的合成[J]. 马兆扬,黄金祥. 卫生研究. 2004(02)
[8]保健食品中雌二醇激素的固相萃取反向高效液相色谱测定法[J]. 林春晓,邰昌松,李红华,陈小燕,尹江伟. 职业与健康. 2003(09)
[9]应用自动酶联免疫荧光仪（VIDAS）检测禽类组织中雌二醇水平[J]. 顾鸣,韩伟,孙文清. 检验检疫科学. 2003(04)
[10]百草枯在土壤中的安全性及残留检测技术简介[J]. 吴志凤,秦冬梅. 农药科学与管理. 2003(03)
硕士论文
[1]除草剂百草枯的毒理安全性研究[D]. 庄英男.吉林农业大学 2007
本文编号：3615833
本文链接：https://www.wllwen.com/shengtaihuanjingbaohulunwen/3615833.html
