代谢工程方法降解六氯苯的研究

发布时间：2024-02-24 10:44

　　六氯苯(Hexachlorobenzene,C6Cl6,简称HCB)的化学性质稳定,很难降解,对生态环境具毒性效应,被《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》列为12种持久性有机污染物(persistent organic pollutants,POPs)之一。由于目前尚未分离到可以矿化六氯苯的纯培养物,因此得到可彻底降解六氯苯的工程菌,解决六氯苯的难降解问题,具有重要的理论和实际意义。 本研究首先探讨了共培养E. coli DH5α[pCWSGB-camC]与ATCC39723降解六氯苯的可能性。 接着利用同源重组方法将表达单元cam A+B+C定点重组在五氯酚降解菌ATCC39723非必需基因pcpM上,把五氯酚降解菌改造成六氯苯降解菌。利用气相色谱(GC-ECD)对重组工程菌ZWY005进行功能测定,在重组工程菌细胞培养液中加入4.3μM六氯苯,6小时后菌液经过正己烷萃取,气相分析结果显示细胞培养液中六氯苯绝大部分已经完全降解(只有痕量的六氯苯残余),降解速度为0.67 nmol·mg(细胞干重)-1·h-1。 由于ATCC39723降解五氯酚的相关代谢基因的表达需要底物五氯酚的...

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【部分图文】：

图1-1工程菌Pseudomonasaeruginosa中构建的2-氯甲苯降解途径[86]

PA142和JB2都不能将2-氯甲苯作为唯一的碳源生长[86]。如图1-1所示。图1-1工程菌Pseudomonasaeruginosa中构建的2-氯甲苯降解途径[86]Fig.1-1Assemblyofanovelpathwayforbiodegrad....

图1-2鞘氨醇假单胞菌ATCC39723中五氯酚的降解途径[118]

[118]。图1-2鞘氨醇假单胞菌ATCC39723中五氯酚的降解途径[118]Fig1-2PCPdegradationpathwayinSphingobiumchlorophenolicumATCC39723[118].PcpB,PCP4-monooxyg....

图1-3ATCC39723中相关五氯酚降解基因簇pcpEMAC和pcpBDR的基因排列方式

图1-3ATCC39723中相关五氯酚降解基因簇pcpEMAC和pcpBDR的基因排列方式[118]Fig.1-3GeneorganizationofthepcpEMACfragmentandthepcpBDRfragmentinATCC39723.Th....

图2-2pZWY010的构建Fig2.2ConstructionoftheepressionvectorpZWY010camA+,camB+和camC分别表示编码putidaredoxinreductase(PdR)，putidaredoxin(Pd)和cytochromeP-450突变体F87W/Y96F/L244A/V247L/C334A；bla，氨苄抗性基因

图2-2pZWY010的构建Fig2.2ConstructionoftheepressionvectorpZWY010,camB+和camC分别表示编码putidaredoxinreductase(PdR)，putidarP-450cam突变体....

本文编号：3908876