取代苯对花翅摇蚊解毒酶生化和分子毒理学机制研究

发布时间：2024-05-30 06:05

　　本文在中国优先控制污染物“黑名单”及课题组前期研究的基础上,筛选出10种取代苯,以花翅摇蚊(Chironomus kiiensis Tokunaga)4龄幼虫为研究对象,测定了取代苯的单一毒性、二元联合毒性,并用AI、TU、MTI和λ法对联合毒性效应进行了综合评价。研究结果表明:取代苯对摇蚊幼虫表现为低毒性,10种取代苯对摇蚊虫24 h的LC50范围为40～450 mg/L;取代苯毒性的大小取决于取代基种类及位置,基团毒性的贡献为:-OH≈-NO2>-CH3>-H,同分异构体毒性大小依次为:邻甲苯>间甲苯>对甲苯,对苯二胺>间苯二胺。对8组等比毒性配比的二元取代苯混合物联合毒性作用评价结果表明4种评价结果并不完全一致,但TU法与MTI法评价结果完全一致,AI与λ法完全一致;4种评价方法对于协同和简单相加毒性效应的评价结果一致,对于部分相加和拮抗作用的评价结果则有所不同;综合4种评价方法结果表明部分相加、拮抗、协同作用和简单相加作用均占总数的25%。4种评价方法对不同毒性单位配比(1:1,1:2,2:1)的对氯苯酚+硝基苯的联合毒性效应评价结果表明4种评价结...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 取代苯类有机污染物对水环境的影响
    1.2 联合毒性
    1.3 主要解毒酶对有机污染物胁迫响应
        1.3.1 乙酰胆碱酯酶
        1.3.2 羧酸酯酶
        1.3.3 谷胱甘肽S-转移酶
    1.4 水生指示生物摇蚊
    1.5 研究目的与意义
2 取代苯对花翅摇蚊的急性毒性
    2.1 材料与方法
        2.1.1 供试取代苯
        2.1.2 供试昆虫
        2.1.3 急性毒性生物测定
        2.1.4 联合毒性生物测定
        2.1.5 联合毒性效应评价方法
        2.1.6 数据统计与分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 取代苯急性毒性
        2.2.2 取代苯类联合毒性
    2.3 结果与讨论
    2.4 本章小结
3 花翅摇蚊主要解毒酶对取代苯类有机污染物胁迫响应
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要仪器
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 蛋白质含量测定
        3.1.4 致毒处理
        3.1.5 摇蚊乙酰胆碱酯酶(AChE)体内活性测定
        3.1.6 摇蚊羧酸酯酶(CarE)体内活性测定
        3.1.7 摇蚊谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)体内活性测定
        3.1.8 摇蚊解毒酶体外抑制测定
        3.1.9 数据统计与分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 取代苯对摇蚊体内解毒酶活性影响
        3.2.2 取代苯对摇蚊解毒酶体外抑制作用
    3.3 结论与讨论
    3.4 本章小结
4 苯酚对花翅摇蚊谷胱甘肽S-转移酶分子毒理学机制
    4.1 实验材料与方法
        4.1.1 主要试剂
        4.1.2 主要仪器设备
        4.1.3 致毒处理
        4.1.4 RNA提取
        4.1.5 cDNA合成
        4.1.6 GSTs基因克隆与分析
        4.1.7 实时荧光定量RT-PCR
        4.1.8 数据统计与分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 GSTs基因cDNA全长特性分析
        4.2.2 系统进化分析
        4.2.3 摇蚊GSTs基因各发育阶段特异性表达
        4.2.4 苯酚胁迫下摇蚊GSTs基因表达
    4.3 结果与讨论
    4.4 本章小结
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3984660