酶促高效转化L-丝氨酸过程优化及其生命周期评价

发布时间：2024-10-05 08:03

　　作为一种常见的组成蛋白质的氨基酸,L-丝氨酸主要应用于食品、医药、化妆品等领域。生物体内,L-丝氨酸可以用于合成嘌呤、胸腺嘧啶、胆碱等前体,L-丝氨酸还可作为中间体,用于合成L-色氨酸、L-多巴、L-半胱氨酸等物质。L-丝氨酸合成方法中,酶法以良好的催化专一性、反应条件温和、易满足等优点成为生产和研究的主要方向。但是,酶法合成L-丝氨酸存在检测技术落后、转化率低、产酸量低、污染严重等问题,为了解决上述酶法合成L-丝氨酸工艺存在的技术难题,本文开展了详细研究并得出如下主要结论：(1)建立了一种新型的灵敏度高、重现性和选择性好的HPLC-ESI-MS测定氨基酸含量的方法。A流动相：0.01%甲酸水溶液,B流动相：乙腈：水=70：30(v/v),流速为1 mL min-1,采用Agilent Eclipse plus C18 (4.6mm×250mm×5μm)色谱柱,柱温30℃,进样量为10μL,UV检测波长为254 nm。洗脱梯度：0 min=90% A and 10% B,12 min=70% A and 30% B,20 min=52% A and 48% B,30min=100% B,...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２．５?ＰＩＴＣ－ＡＡ液相色谱留??Ｆｉｇ．２．５?Ｌｉｑ山ｄ?ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ?ｆｏｒ?ＰＩＴＣ－ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄｓ??氨基酸标准混合溶液（２．５ｍｌｏｌｍＬ－ｌ）?—，一？打（

华中科技大学博去学位论文??在化０５％甲酸水溶液为Ａ流动相、Ｂ流动相乙腊；水＝７０；?３０条件下，对比Ｈ种??不同的流速下Ｇｌｙ和Ｓｅｒ两种物质的分离效果，由结果（图２．３），流动相流速ｖ?＝化８??ｍＬｍｉｉｆｉ时，两种物质对应的分离度较好，但Ｇｌｙ和Ｓｅｒ两种物质的出峰时间相....

图３．４不同浓度的ＰＬＰ对巧活的影响??Ｆｉｇ．３．４?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＰＬＰ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ＳＨＭＴ?ａｃｔｉｖｉｔｙ??

Ｆｉｇ．３．３?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＤＬｐ－Ｐｈｅｎｙｌｓｅｒｉｎｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ＳＨＭＴ?ａｃｔｉｖｉｔｙ??ＣＴＡＢ浓度为化０３ｇ?Ｌ￣ｉ时，向底物中加入ＤＬｐ－苯基丝気酸，浓度依次为５０、??１００、１５０、２００和２５０?＾１１１〇１１７１，....

图３．７不同反应温度对心丝氨酸产量的影响分析．（■■■ＭＭ四种國案依次代表温度??为?２５°Ｃ、３０

综合考虑ＳＨＭＴ热稳定性、试验设备耐热性能，选择２５?°Ｃ、３０?°Ｃ、３５?Ｘ、４０?°Ｃ??进行酶促转化实验，连续转化反应４．０?ｈ，确定转化反应温度对产物心丝氨酸积累量??的影响。根据实验结果（图３．７），２５°Ｃ、３０°Ｃ、３５°Ｃ和４０°Ｃ条件下，０￣０．５ｈ，??产物....

图３．口甲整滴加方法实施前反应体系中组分及转化率变化，（？）甘巧酸，（＊）心丝安敌

Ｉ?（６）?ＨＣＨＯ滴加策咯及其应用??！?酶促转化反应混合溶液中含甘気酸１５?ｍｍｏｌ?Ｌ￣ｉ、ｐｉｐ?０．４?ｍｍｏｌ?Ｌ￣ｉ，ＴＨＦＡ?７?ｍｍｏｌ??１１７１，通入氮气３０１１１；１１，加甲醒１２１１１１１１〇１［１，３０°＜：，１５０巧〇１条件下，连续进行转化??反应，....

本文编号：4007735