新型纳米材料在沙丁胺醇试纸条中的应用研究

发布时间：2017-10-09 19:02

  本文关键词：新型纳米材料在沙丁胺醇试纸条中的应用研究

  更多相关文章： 沙丁胺醇 免疫层析试纸条 胶体金 GPG 胶体碳

【摘要】：论文选择沙丁胺醇(SAL)作为目标物,研究了胶体金、纳米金-聚苯胺-纳米金微球(GPG)、胶体碳三种标记抗体方法,分别建立了沙丁胺醇免疫层析分析方法,并应用于动物源性食品中沙丁胺醇残留的可视化检测。建立了沙丁胺醇胶体金标记免疫层析分析方法,在最优条件下组装试纸条,将金标抗体铺在结合释放垫上的组装方式其方法检出限为2嵋L-1；将金标抗体冻干在微孔板中的组装方式其方法检出限为1鹏L-1。选择猪肉、牛肉、羊肉和猪肝四种实际样品进行添加回收实验,样品检出限为5μg L-1。合成新材料GPG,建立了沙丁胺醇GPG标记免疫层析分析方法,在最优条件下组装试纸条,将GPG标记抗体铺在结合释放垫上的组装方式方法检出限为5μgL-1；将GPG标记抗体冻干在微孔板中的组装方式其方法检出限为2 μg L-1。选择猪肉、牛肉、羊肉和猪肝四种实际样品进行添加回收实验,样品检出限为10μgL-1。SB4型号炭黑平均粒径约为50 nm。建立了沙丁胺醇胶体碳标记免疫层析分析方法,在最优条件下组装试纸条。将碳标抗体铺在结合释放垫上不可行；将碳标抗体冻干在微孔板中以及在溶液状态下与标准品混合上样两种方式灵敏度基本一致,方法检出限为2μgL-1。选择猪肉、牛肉、羊肉和猪肝四种实际样品进行添加回收实验,样品检出限为10μgL-1。三种标记材料所建立的免疫层析分析方法灵敏度基本一致,采用胶体金作为标记物灵敏度略高；对于纳米材料GPG和胶体碳,其批间差异小,稳定性优于胶体金；炭黑作为工业材料,成本远远低于氯金酸,采用胶体碳作为标记物可以节约成本,同时,胶体碳标记抗体,平均每根试纸条抗体用量约为使用胶体金作为标记材料的1/12,可以节约大量抗体,有利于实现试纸条产品的市场化。
【关键词】：沙丁胺醇 免疫层析试纸条 胶体金 GPG 胶体碳
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TB383.1;TS207.3
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 1 前言9-24
• 1.1 兽药残留现状及其危害9-10
• 1.2 β-肾上腺素受体激动剂简介10-11
• 1.2.1 常见β-兴奋剂简介10-11
• 1.2.2 β-兴奋剂的使用以及残留现状11
• 1.3 沙丁胺醇简介11-15
• 1.3.1 沙丁胺醇理化性质11-13
• 1.3.2 沙丁胺醇残留限量13
• 1.3.3 沙丁胺醇检测研究进展13-15
• 1.4 胶体金免疫层析技术(GICA)15-20
• 1.4.1 胶体金免疫层析技术检测原理15-17
• 1.4.2 胶体金免疫层析技术的发展与应用17
• 1.4.3 增强型胶体金的发展与应用17-19
• 1.4.4 纳米金-聚苯胺-纳米金微球(GPG)简介19-20
• 1.5 炭黑(carbon black)简介20-22
• 1.5.1 炭黑的理化性质及分类20
• 1.5.2 炭黑的应用现状20-21
• 1.5.3 SB4(Special Black 4)型号炭黑简介21-22
• 1.5.4 胶体碳标记免疫层析试纸条的优势22
• 1.6 研究目的及意义22-23
• 1.7 研究内容23-24
• 2 材料与方法24-41
• 2.1 实验材料24-29
• 2.1.1 主要实验药品及试剂24-25
• 2.1.2 主要实验仪器与设备25-26
• 2.1.3 常用溶液的配制26-28
• 2.1.4 实际样品28-29
• 2.2 实验方法29-41
• 2.2.1 沙丁胺醇包被抗原的制备29
• 2.2.2 沙丁胺醇多克隆抗体预处理29-30
• 2.2.3 试纸条的组装30-32
• 2.2.4 胶体金标记免疫层析分析方法的建立32-35
• 2.2.5 GPG标记免疫层析分析方法的建立35-37
• 2.2.6 胶体碳标记免疫层析分析方法的建立37-40
• 2.2.7 基于三种标记材料的试纸条检测方法有效性的验证40-41
• 3 结果与讨论41-75
• 3.1 沙丁胺醇半抗原的表征41
• 3.2 沙丁胺醇多克隆抗体的纯化41
• 3.3 胶体金标记免疫层析分析方法的建立41-51
• 3.3.1 胶体金的制备及质量鉴定41-42
• 3.3.2 胶体金标记抗体的制备及鉴定42-44
• 3.3.3 层析条件的优化44-46
• 3.3.4 胶体金标记免疫层析分析方法检出限的确定46-48
• 3.3.5 胶体金免疫层析分析方法的特异性48-49
• 3.3.6 胶体金标记免疫层析分析方法实际样品检测49-50
• 3.3.7 试纸条稳定性实验50-51
• 3.4 GPG标记免疫层析分析方法的建立51-60
• 3.4.1 GPG的制备及质量鉴定51-52
• 3.4.2 GPG标记抗体最适pH值以及最佳抗体量的确定52-54
• 3.4.3 层析条件的优化54-57
• 3.4.4 GPG标记免疫层析试纸条检出限的确定57-58
• 3.4.5 GPG标记免疫层析分析方法用于实际样品检测58-59
• 3.4.6 GPG标记免疫层析试纸条稳定性实验59-60
• 3.5 胶体碳标记免疫层析分析方法的建立60-73
• 3.5.1 胶体碳的表征60
• 3.5.2 胶体碳分散缓冲液的选择60-61
• 3.5.3 胶体碳标记抗体的制备61-63
• 3.5.4 层析条件的优化63-68
• 3.5.5 胶体碳标记免疫层析试纸条检出限的确定68-70
• 3.5.6 胶体碳标记免疫层析分析方法用于实际样品检测70-71
• 3.5.7 胶体碳标记免疫层析试纸条稳定性实验71-73
• 3.6 ELISA法验证试纸条检测方法的有效性73-75
• 4 结论75-77
• 5 展望77-78
• 6 参考文献78-85
• 7 攻读硕士学位期间发表论文情况85-86
• 8 致谢86

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