显齿蛇葡萄叶多酚的α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

发布时间：2017-12-22 08:12

  本文关键词：显齿蛇葡萄叶多酚的α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究　出处：《河南科技学院》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：显齿蛇葡萄叶(Ampelopsis grossedentata Leaves,AGL)是我国特有的一种富含多酚的功能性食品植物原料。长期以来,AGL的多酚研究主要集中在其以二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)为代表的小分子酚类物质上,而对其单宁组分(Tannin fraction,TF)的研究却鲜见报道。有鉴于此,本文采用响应面法优化了超声-微波协同提取AGL多酚的工艺,分离纯化了其单宁类组分,并运用波谱分析手段鉴定了其结构。在此基础上,系统研究了TF和DMY的α-葡萄糖苷酶抑制和抗氧化活性。以水为溶剂,超声-微波协同提取AGL多酚的最适条件为:超声功率50 w,提取时间10 min,液固比50:1(v/w),微波功率350 w,微波时间100 s。在该条件下多酚得率为19.35%(以DMY计)。经喷雾干燥后,产物中的DMY含量为43.08%。采用柱色谱法分离了AGL水提取物中的TF,并采用紫外、红外、核磁等波谱分析手段对其结构进行了鉴定,结果表明该TF成分为没食子酸和糖结合而成的缀合物,属于水解单宁类物质。在α-葡萄糖苷酶抑制试验中,AGL水提物、TF、DMY展示了抑制活性,其IC50值分别为23.10,1.94和72.21μg/mL,TF的活性远高于DMY,表明TF是AGL中抑制α-葡萄糖苷酶的重要成分,可能与AGL的降血糖活性有重要关联。抑制动力学试验发现三者对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均为竞争性与非竞争性的混合型抑制。通过荧光光谱扫描试验发现三者与α-葡萄糖苷酶结合后,会使α-葡萄糖苷酶发生荧光猝灭现象。在DPPH自由基清除试验、ABTS自由基清除试验、还原力测试等三种化学抗氧化模型中,AGL水提物、TF、DMY均表现了很强的抗氧化能力。AGL水提物、TF和DMY清除DPPH自由基的IC50值分别为15.78,10.17和7.66μg/m L。三者对清除ABTS自由基的IC50值分别为60,39.02和29.51μg/mL。还原力测试中三者的活性与浓度线性相关(r20.996)。在上述抗氧化活性测试中,DMY展现了最高活性,TF和水提物则次之。在HepG2细胞模型中,AGL水提物、TF、DMY均表现了很强的细胞抗氧化能力。在“无PBS清洗”处理方案中,AGL水提物、TF和DMY抑制细胞中过氧化自由基生成的EC50值分别为80.10,13.13和12.56μg/m L。而在“PBS清洗”处理方案中,三者的EC50值分别为163.16,30.62和78.94μg/m L,TF的活性显著高于DMY。本课题建立了AGL多酚的超声-微波协同提取方法,分析鉴定了AGL的TF组分,发现TF对AGL的抗氧化和降血糖活性有重要贡献,该发现为理解显AGL的生物活性提供了参考。
【学位授予单位】：河南科技学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：TS201.2

【参考文献】

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本文编号：1319044