水产品中重金属和氯霉素的快速检测方法研究

发布时间：2018-08-31 12:05

【摘要】：重金属离子和氯霉素对人类和动植物都具有很大的毒害作用,并且可能会在水产品中有一定的残留,因而检测水产品中重金属离子和氯霉素对人类健康和生态环境有很重要的意义,本文分别建立了基于谷胱甘肽的胶体金比色法和基于核酸适配体的免疫分析法检测水产品中重金属离子和氯霉素含量。(1)基于谷胱甘肽的胶体金比色法检测水产品中的重金属Cd~(2+),Pb~(2+)和Hg~(2+)我们通过谷胱甘肽的巯基与金纳米粒子结合将谷胱甘肽固定在胶体金表面,应用谷胱甘肽能够螯合金属离子作为识别元素进行重金属离子识别,使胶体金之间的距离接近而改变胶体金表面的等离子共振效应,从胶体金颜色上表现出胶体金从红色变为蓝色,,又通过紫外-可见吸收光谱进行了定性分析。在最佳的试验条件下,我们得到Cd~(2+),Pb~(2+)和Hg~(2+)的可视检测下限分别为0.1μM,0.1μM和1nM,并且经过测定紫外-可见吸收光谱建立的标准曲线的R2值分别为0.9865,0.9974和0.9869。而且在其他金属离子浓度下显示出极好的特异性。我们还根据本研究能够同时检测三种重金属离子,建立了OR逻辑门,其检测结果与OR逻辑门的真值表规律相同。同时本研究应用在水产品斑马鱼的检测中,与OR逻辑门的规律相结合,检测的结果与我们预期结果一致。(2)基于核酸适配体的免疫分析法检测水产品中氯霉素我们以氯霉素核酸适配体为识别探针,先与部分DNA杂交,再与氯霉素特异性结合,破坏DNA的杂交,检测氯霉素的标准品溶液。选择链霉亲和素浓度为5μg/m L,1 mg/m L的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素稀释到4000倍,CAP aptamer浓度为2 nM,检测氯霉素标准品的标准曲线线性范围为0.001 ppb-1 ppm,检测限为0.001 ppb,R2为0.9935,且检测特异性高,检测结果不受其他抗生素类物质影响。同时本研究还用于鱼糜样品的检测中,回收率良好,检测结果与我们预期结果也一致。
[Abstract]:Heavy metal ions and chloramphenicol are toxic to humans, animals and plants, and may have residues in aquatic products. Therefore, the detection of heavy metal ions and chloramphenicol in aquatic products is of great significance to human health and ecological environment. In this paper, glutathione based colloidal gold colorimetry and nucleic acid aptamer based immunoassay were established for the detection of heavy metal ions and chloramphenicol in aquatic products. (1) Glutathione based colloidal gold colorimetry was used to detect aquatic products. The heavy metals Cd~ (2) Pb2 and Hg~ (2) in Glutathione were immobilized on the surface of colloidal gold by the combination of glutathione mercapto and gold nanoparticles. Glutathione can chelate metal ions as recognition elements to make the distance between colloidal gold close and change the surface plasmon resonance effect of colloidal gold. The color of colloidal gold changed from red to blue, and was analyzed qualitatively by UV-Vis absorption spectrum. Under the optimum experimental conditions, the visual detection limits of Cd~ (2) Pb2 and Hg~ (2) were 0.1 渭 M 0.1 渭 M and 1 nm respectively, and the R2 values of the standard curves determined by UV-Vis absorption spectra were 0.9865 ~ 0.9974 and 0.9869, respectively. Moreover, it shows excellent specificity at the concentration of other metal ions. According to this study, we can detect three kinds of heavy metal ions at the same time and establish OR logic gate. The result is the same as the rule of truth table of OR logic gate. At the same time, this study was applied to the detection of zebrafish in aquatic products, and combined with the rule of OR logic gate. The detection results were consistent with our expected results. (2) chloramphenicol in aquatic products was detected by immunosorbent assay based on nucleic acid aptamer. We used chloramphenicol aptamer as the identification probe, first hybridized with some DNA, then specifically combined with chloramphenicol. DNA hybridization was destroyed and chloramphenicol standard solution was detected. When the concentration of Streptomycin was 5 渭 g / mL and the concentration of horseradish peroxidase was 1 mg/m / L, the standard curve linear range of standard curve for detection of chloramphenicol was 0.001 ppb-1 ppm, and the limit of detection was 0.001 ppb,R2, when the concentration of CAP aptamer was 2 nM, and the dilution of Streptomycin was 4000 times. 0.9935, and the detection specificity is high. The results were not affected by other antibiotics. At the same time, this study was also used in the detection of surimi samples, the recovery is good, and the results are in agreement with our expected results.
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：TS254.7

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本文编号：2214931