蓝莓花色苷积累规律及其提取物对炎症相关结直肠癌的影响机制研究
发布时间：2021-03-28 12:50
蓝莓,果实酸甜,适宜鲜食和加工,其经济价值和营养价值较高。研究表明,不同产地、栽培方式、品种及生长阶段直接影响果实的理化营养品质,因此研究不同品种及不同生长阶段蓝莓果实的理化性质、风味特征及营养价值对指导蓝莓生产及产品开发具有重要意义。炎症性肠病已经成为我国常见的消化系统疾病,持续的炎症导致结直肠癌的发生,严重威胁患者健康及家属生活质量。因此,研究蓝莓花色苷联合癌症临床用药对炎症性肠病及其相关结直肠癌的抑制作用机制,为蓝莓花色苷提取物作为结肠癌的临床辅助治疗药物提供理论依据,极具意义。本研究基于不同品种、生长阶段对蓝莓果实关键品质影响的分析,筛选出成熟阶段北青品种蓝莓果实制备纯化的蓝莓花色苷提取物,通过体内、体外实验,分别从炎症因子分泌、氧化损伤、细胞增殖、细胞凋亡角度分析蓝莓提取物联合临床用药对炎症性肠病及其相关结直肠癌的抑制作用及机制。主要研究结果如下:通过分析北青和蓝丰两个品种蓝莓果实不同生长阶段的花色苷及总酚含量,及分析比较转录组的差异,探究了蓝莓花色苷合成的分子机制。在两个品种中共发现13799条差异表达的直系同源基因,并将这些差异表达的直系同源基因进行功能富集。共筛选出9个...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：150 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
蓝莓样品形态特征
第二章蓝莓果实花色苷合成的比较转录组学分析26了33.8%和42.8%，而且在各个生长阶段，北青品种蓝莓总酚含量都高于蓝丰品种蓝莓总酚含量。花色苷是蓝莓果实中的主要酚类物质。如图2-2B所示，两个品种蓝莓总花色苷含量均随果实发育而显著增加（P<0.05）。随着果实颜色由绿-粉-蓝的变化，蓝丰品种蓝莓总花色苷含量由22.0mgCYD-3-G/100gFW增加至57.6mgCYD-3-G/100gFW；而北青品种蓝莓总花色苷含量由9.1mgCYD-3G/100gFW增加至210mgCYD-3-G/100gFW。北青品种蓝莓果实在蓝果期的花色苷含量比绿果期的蓝莓花色苷含量增加了2.6倍；尽管在绿果期蓝丰品种蓝莓花色苷含量高于北青品种蓝莓花色苷含量，而随着果实发育过程中北青品种蓝莓花色苷含量迅速增加，至蓝果期时北青品种蓝莓花色苷含量高达绿果期时的23.2倍，且明显高于蓝丰品种蓝莓蓝果期花色苷含量。注：小写字母不同表示差异显著（P＜0.05）。图2-2两个品种蓝莓果实在不同发育阶段总酚和总花色苷含量Figure2-2Totalpolyphenolandanthocyaninlevelsvaryduringblueberryfruitmaturationoftwocultivars2.2.1.2蓝莓果实不同组织中的总酚和总花色苷含量实验测定了两个品种蓝莓果实、果皮、果肉组织中的总酚和总花色苷含量，结果分别如图2-3A，2-3B所示。蓝莓果实的总酚和总花色苷含量在不同品种间存在差异，在相同组织中北青品种的总酚和总花色苷含量高于蓝丰品种。蓝丰和北青品种蓝果期果实的果皮组织中总酚和花色苷含量均显著高于果肉组织中总酚和总花色苷含量（P<0.05）。蓝丰和北青品种蓝果期果实果皮中总酚含量分别为果肉中总酚含量的1.31倍和1.41倍。尽管同一品种、同一发育时期，蓝莓果实不同组织器官的总花色苷含量仍然差异显著。蓝丰和北青品种蓝果期果实果皮中总花色苷含量分别高达果肉中?
沈阳农业大学博士学位论文27注：小写字母不同表示差异显著（P＜0.05）。图2-3两个品种蓝莓果实在不同组织中总酚和总花色苷含量Figure2-3Totalpolyphenolandtotalanthocyaninlevelsvaryintheskinandpulpofripeblueberriesoftwocultivars2.2.2转录组测序数据及分析结果2.2.2.1RNA质量评价琼脂糖凝胶电泳对RNA完整性进行检测，结果如图2-4所示，28S/18S条带亮于18S/16S，提取得到的RNA条带清晰，说明RNA完整度高。图2-4蓝莓RNA的琼脂糖凝胶电泳图Figure2-4AgarosegelelectrophoresisoftotalRNAfromblueberry使用Nanodrop2000分光光度计对RNA浓度及纯度进行检测，结果如表2-2所示，A260/A280的比值均大于2.0且浓度均大于50μg/mL，说明RNA浓度、纯度较高。为了保证RNA的质量，采用Agilent2100生物分析仪检测RNA，发现RIN值为7~9.4（表2-2），28S/18S的比值为1.3~3.7，说明RNA质量好，未降解，可以用于测序文库的构建。
本文编号：3105589
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：150 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
蓝莓样品形态特征
第二章蓝莓果实花色苷合成的比较转录组学分析26了33.8%和42.8%，而且在各个生长阶段，北青品种蓝莓总酚含量都高于蓝丰品种蓝莓总酚含量。花色苷是蓝莓果实中的主要酚类物质。如图2-2B所示，两个品种蓝莓总花色苷含量均随果实发育而显著增加（P<0.05）。随着果实颜色由绿-粉-蓝的变化，蓝丰品种蓝莓总花色苷含量由22.0mgCYD-3-G/100gFW增加至57.6mgCYD-3-G/100gFW；而北青品种蓝莓总花色苷含量由9.1mgCYD-3G/100gFW增加至210mgCYD-3-G/100gFW。北青品种蓝莓果实在蓝果期的花色苷含量比绿果期的蓝莓花色苷含量增加了2.6倍；尽管在绿果期蓝丰品种蓝莓花色苷含量高于北青品种蓝莓花色苷含量，而随着果实发育过程中北青品种蓝莓花色苷含量迅速增加，至蓝果期时北青品种蓝莓花色苷含量高达绿果期时的23.2倍，且明显高于蓝丰品种蓝莓蓝果期花色苷含量。注：小写字母不同表示差异显著（P＜0.05）。图2-2两个品种蓝莓果实在不同发育阶段总酚和总花色苷含量Figure2-2Totalpolyphenolandanthocyaninlevelsvaryduringblueberryfruitmaturationoftwocultivars2.2.1.2蓝莓果实不同组织中的总酚和总花色苷含量实验测定了两个品种蓝莓果实、果皮、果肉组织中的总酚和总花色苷含量，结果分别如图2-3A，2-3B所示。蓝莓果实的总酚和总花色苷含量在不同品种间存在差异，在相同组织中北青品种的总酚和总花色苷含量高于蓝丰品种。蓝丰和北青品种蓝果期果实的果皮组织中总酚和花色苷含量均显著高于果肉组织中总酚和总花色苷含量（P<0.05）。蓝丰和北青品种蓝果期果实果皮中总酚含量分别为果肉中总酚含量的1.31倍和1.41倍。尽管同一品种、同一发育时期，蓝莓果实不同组织器官的总花色苷含量仍然差异显著。蓝丰和北青品种蓝果期果实果皮中总花色苷含量分别高达果肉中?
沈阳农业大学博士学位论文27注：小写字母不同表示差异显著（P＜0.05）。图2-3两个品种蓝莓果实在不同组织中总酚和总花色苷含量Figure2-3Totalpolyphenolandtotalanthocyaninlevelsvaryintheskinandpulpofripeblueberriesoftwocultivars2.2.2转录组测序数据及分析结果2.2.2.1RNA质量评价琼脂糖凝胶电泳对RNA完整性进行检测，结果如图2-4所示，28S/18S条带亮于18S/16S，提取得到的RNA条带清晰，说明RNA完整度高。图2-4蓝莓RNA的琼脂糖凝胶电泳图Figure2-4AgarosegelelectrophoresisoftotalRNAfromblueberry使用Nanodrop2000分光光度计对RNA浓度及纯度进行检测，结果如表2-2所示，A260/A280的比值均大于2.0且浓度均大于50μg/mL，说明RNA浓度、纯度较高。为了保证RNA的质量，采用Agilent2100生物分析仪检测RNA，发现RIN值为7~9.4（表2-2），28S/18S的比值为1.3~3.7，说明RNA质量好，未降解，可以用于测序文库的构建。
本文编号：3105589
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