聚乙二醇/聚乙二醇—脂肪烷定点修饰生长激素和生长激素拮抗剂N末端的研究

发布时间：2025-01-07 02:55

　　重组人生长激素(hGH)被广泛应用于治疗生长激素缺乏症,慢性肾功能不全和特纳氏综合症等疾病。生长激素拮抗剂(GHA)可通过阻止生长激素与其受体(GHR)的结合,治疗生长激素过度分泌引起的肢端肥大症等疾病。由于生长激素和生长激素拮抗剂的半衰期短,必须频繁注射才能达到有效的血药浓度。聚乙二醇(PEG)修饰和人血清白蛋白(HSA)修饰可延长hGH和GHA的半衰期,但同时会显著降低hGH和GHA的体外生物活性。为了解决上述问题,本论文探讨了使用不同链长的PEG定点单修饰GHA的N末端,寻找药代动力学与药效动力学的平衡点。在此基础上,采用刚性苯环连接桥介导PEG形成相对致密的构象,定点单修饰hGH,考察致密构象的PEG对hGH药代动力学和药效学参数的影响。为了进一步提高hGH的药效学参数,本论文将PEG修饰和长链脂肪烷修饰技术结合起来,定点单修饰hGH。本论文分为三个部分。第一部分采用分子量为20kDa和40kDa的PEG定点单修饰GHA的N末端,得到GHA的定点单修饰产物,并探讨了修饰产物的药代动力学与药效学间的平衡点。结果表明：PEG修饰能显著增加GHA的流体力学体积,从而延长了药物的血浆半衰...

【文章页数】：157 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．５?ＨＳＡ的射线结构（左）和Ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ的结构图（右）??

图２．１生长激素和生长激素括抗剂与受体结合模型［１６１］??

?ａｎｄ?ｐｅｇｖｉｓｏｍａｎｔ?（ｒｉｇｈｔ）??本章拟采用分子量为２０?ｋＤａ和４０?ｋＤａ的ＰＥＧ酸定点修饰ＧＨＡ的Ｎ末端的??ａ－氨基，如图２．２所示，制备分子量均一的定点修饰Ｎ末端的ＰＥＧ化ＧＨＡ。使??最终修饰产物成分单一，易于分离纯化，产物收率高，预期能减少ＧＨＡ生....

图２．８修饰产物的犯Ｓ－ＰＡＧＥ电泳图??Ｆｉ．?２．８?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?ａｎａｌｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＰＥＧｌａｔｅｄ?ＧＨＡｓ??

＇，?图２．７?ＧＨＡ修饰样品的纯度分析??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．７?ＳＥＣ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＧＨＡ?ｓａｍｐｌｅｓ??２．４．２．２?ＳＤＳ－ＰＡＣＥ分析鉴定产物纯度??采用犯Ｓ－ＰＡＧＥ进一步分析ＧＨＡ修饰样品。如图２．８所示，ＧＨＡ为单一的??电泳条带，分子量....

图２．９?ＧＨＡ的总离子流图??Ｆｉｇｕｉ＊ｅ．?２．９?Ｔｈｅ?ｔｏ化?１?Ｉｏｎ?Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｇｒａｐｈｙ?ｏｆ?ＧＨＡ??

２Ａ２．３修饰位点鉴定??在进行酶解化图分析前，将ＧＨＡ用族蛋白酶酶切，利用反相ＨＰＬＣ分离酶??解肋段，并通过电喷雾离子陷阱质谱得到ＧＨＡ样品的总离子流图（如图２．９所??示），通过分析确定狀段的分子量。对解析的每个肋段参照ＧＨＡ的一级氨基酸??序列进行鉴定（表２．１）。??如....

本文编号：4024389