克雷伯氏肺炎杆菌中甘油代谢副产物敲除对1,3

  本文关键词：拟南芥和水稻减数分裂同源重组事件的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《华东理工大学》 2013年

克雷伯氏肺炎杆菌中甘油代谢副产物敲除对1,3-丙二醇发酵的研究

周佳佳  

【摘要】：克雷伯氏肺炎杆菌(Kpneumoniae)是重要的工业微生物,可利用甘油为底物发酵产生1,3-丙二醇(1,3-PD)。在代谢途径中,还原途径产生1,3-PD,氧化途径产生一系列副产物,如乳酸、乙酸、2,3-丁二醇(2,3-BD)等。在本文中,首先选择敲除乳酸来探讨其对1,3-PD发酵的影响,利用Red同源重组的方式分别敲除了两个编码D-乳酸脱氢酶的基因IdhA (99pbp)和dld-ldhA (1746bp),获得突变株KG1-1和KG1-2。对KG1-1和KGl-2的发酵液进行分析,证实了KG1-1为D-乳酸不产的菌株,但其1,3-PD生产能力没有明显提高。为了获得1,3-PD高产菌株,本文又尝试敲除2,3-BD途径,构建了KG1-3和KG1-4两个菌株,代谢产物分析表明,KG1-3是2,3-BD不产的菌株,且敲除2,3-BD途径后,导致1,3-PD浓度和菌浓分别降低60%和43%,而乳酸和丙酮酸则分别提高了225%和140%。为了进一步提高1,3-PD产量,在KG1-3的基础上敲除1dhA,构建了KG1-5菌株,该菌株的1,3-PD产量和菌浓与原始菌比恢复了70%和90%。

【关键词】：
【学位授予单位】：华东理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：TQ923
【目录】：

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