哈氏噬纤维菌中蛋白折叠和定位相关基因的功能研究

发布时间:2021-01-03 16:38
  哈氏噬纤维菌(Cytophaga hutchinsonii)是一株广泛存在于土壤中的好氧的纤维素降解细菌,属于拟杆菌门(Bacteroidetes)。不同于已知的游离纤维素酶协同降解机制和纤维小体降解机制,C.hutchinsonii采用一种全新且未知的方式降解纤维素,其在降解纤维素时需要菌体与纤维素直接接触,没有外切纤维素酶,并且多数纤维素酶活是细胞偶联的。此外,C.hutchinsonii还具有滑动能力,但没有鞭毛或菌毛,其滑动机制也是未解之谜。本实验室前期研究发现C.hutchinsonii存在细胞表面和周质空间两种纤维素降解途径,而且外膜蛋白在细胞表面参与纤维素的吸附和解构。因此蛋白在周质空间的正确折叠、分泌以及外膜上的定位决定了其功能的正常发挥。二硫键氧化还原酶催化蛋白质的半胱氨酸残基之间形成二硫键,对稳定蛋白质空间结构和功能具有重要作用,在拟杆菌中少有报道。前期研究发现C.hutchinsonii中未知功能蛋白CHU-1165,与同样来自拟杆菌门的Flavobacterium psychrophilum中推测的二硫键氧化还原酶TlpB序列一致性为32%,CHU1<... 

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【部分图文】:

哈氏噬纤维菌中蛋白折叠和定位相关基因的功能研究


图1-1纤维素单元分子结构??

示意图,纤维素酶系,纤维素酶,纤维素


?CelluJosome?<??Bacterial?Cell?〇?^??Exoglucanase?Endoglucanase?(^-glucosidase?Scaffoldin??CohesirVOocxer?O?Glucose?〇〇?Cellotxose??Fig.?1-2?Schematic?diagrams?of?the?noncomplexed?and?complexed?cellulase?systems?(Zhu?and??McBride?2017)??图1-2游离纤维素酶系和纤维素酶复合体纤示意图??1.3.2.3第三种降解机制??尽管上述两种纤维素降解机制在纤维素降解微生物中被广泛采用,但还是存??在少数微生物具有特殊的纤维素降解特点。好氧的哈氏噬纤维菌??和厌氧的产玻拍酸丝状杆菌(F/fo-oAflc/ers〃(:c/?ogenes)都能高效彻??底的降解结晶纤维素,但他们既没有游离的纤维素酶系,也没有纤维小体结构,??在降解纤维素时菌体需要与纤维素直接接触,而且多数纤维素酶活是细胞偶联的,??可能采用一种新的纤维素降解策略(Wilson?2011;?Wilson?2009;?Wilson?2008)。??5??

纤维素,机制,周质,纤维素酶


//?som7和A???wcc//?oge/?es的基因组分析发现,它们没有编码??外切纤维素酶的基因,所含的纤维素酶不含能与结晶纤维素结合的碳水化合物结??合模块(CBM),也没有编码?dockerin?或?scaffoldind?的基因(Suenetal.?2011;Xie??et?al.?2007)。因此他们采用了第三种纤维素降解策略。??2009年,Wilson针对nj能利用的第三种纤维素降解机制提出??了一种假说(Wilson2009),该假说认为纤维素是在细胞内被降解的。如图1-3所??示,C.?的细胞表面可能存在非酶的蛋白或蛋白复合体形式,将单链??纤维素分子从纤维素纤维中分离出来,单链纤维素通过外膜通道被运送到周质空??间,在周质空间被纤维素酶降解。细胞表面蛋白如何将单链纤维素从纤维素纤维??素中剥离出来,并将其运送到周质空间是验证该机制的关键。??Cellulose?fiber????I?11'?Extracellular?cellulose??||j?I?「disrupting?complex??If?I?\t\j?\??I?HI?|?\?■10*?r?Integral?membrane??G?I?)?Bacterial?i?[?polysaccharide??HII??c?11?^?i?transporters??I?l?J?l……[i-Llhr??圓vyy?丄??Penplasmic?space??containing?endocellLilases??Fig.?1-3?Potential?mechanism?for?cellulose?degradation?by?C?hutch

【参考文献】:
博士论文
[1]Cytophaga hutchinsonii基于FLP-FRT重组系统敲除方法的建立及Ⅸ型分泌系统相关基因的研究[D]. 王颖.山东大学 2014



本文编号:2955139

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