细胞自噬在seipin突变所致脂代谢异常和α粒子辐射旁效应中的作用

发布时间：2021-01-27 00:33

　　自噬是细胞应对胞内和胞外刺激的分子细胞学过程。本论文主要讨论细胞自噬在细胞受到内部刺激（脂代谢相关基因突变）及外部刺激（α粒子辐照）后所起的作用。基因突变所表达的异常蛋白是一种常见的胞内应激因素。seipin为定位于内质网的膜蛋白,其糖基化位点突变使蛋白质错误折叠,导致脂质代谢异常。我们通过体外转染实验,研究自噬系统对seipin基因糖基化位点突变导致脂滴形态异常的影响。实验中,用糖基化位点突变的seipin质粒与表达自噬体标分子GFP-LC3质粒共转染细胞,Nile Red（尼罗红）用来示踪细胞内脂滴,进行免疫荧光、免疫印迹以及流式细胞术检测分析。研究发现,在细胞中过表达突变seipin改变GFP-LC3的亚细胞分布,致胞浆出现大量空泡,(JFP-LC3与突变体seip in的亚细胞分布高度重合,细胞自噬系统被激活；并且,突变seipin使胞内被Nile Red染色的弥散小脂滴融合成大脂滴；抑制细胞自噬系统更易于使转染突变seipin的细胞内出现巨大空泡；蛋白质糖基化抑制剂能模拟突变seipin诱导的胞内变化,使转染正常型seipin质粒的细胞出现与转染突变体seipin质粒的细胞类... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

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本文编号：3002097