山西长针线虫和三孔线虫的分类研究

发布时间:2017-04-14 05:07

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【摘要】:本研究利用形态学和rDNA分子特征相结合的方法,对山西省不同地域采集的930份土样中的长针线虫和三孔线虫的种类进行了分类鉴定,并通过核糖体大亚基(LSU)和小亚基分子(SSU)的D2/D3 rDNA对其进行系统发育研究。从所采集的样本中共鉴定出出5属12种线虫,其中4个新种、4个中国新记录种、2个山西新记录种和1个雄虫新报道,并构建了5个属的系统发育树;同时对山西汾阳疑似赤枯病的白皮松根际线虫多态性进行了分析,并对长针线虫种群数量与发病程度之间的相关性进行了探讨。主要研究结果如下:1、鉴定并描述了长针属的1个新种Longidorus viburnum sp. nov.。新种的模式生境为山西晋城荚劸根围。该新种的主要特征:雌虫中等长度L=4.85mm,齿尖针103 gm,唇区宽22 μm,唇区扁平,无缢缩,侧器囊长漏斗状,导环位于齿尖针较后,距离体前端59μm,尾部钝圆锥形。雄虫交合刺显著,长73~89μm,近肛门区前端有附器8-9个。据Chen等(1997)多歧检索表其代码为A4-B4-C5-D3-E4-F2-G1-H1-I2。2、鉴定并描述了3个长针属线虫,分别为伯纳德长针线虫Longidorus bernardi Robbins Brown 1996、雪松长针线虫Longidorus cedari (Khan, Saha Seshadri 1978) Decraemer Coomans 2007和琼斯长针线虫Longidorus jonesi Siddqi 1962,其中前2种均为中国新记录种,并首次报道了Longidorus jonesi的雄虫特征。3、鉴定并描述了剑属线虫2个山西新记录种,分别为短颈剑线虫Xiphinema brevicolle Lordello Da Costa 1961和标明剑线虫Xiphinema insigne Loos 1949。并描述了短颈剑线虫的3个龄期幼虫的形态特征。4、鉴定并描述了Tripylina属的1个新种蒲县小三孔线虫Tripylina puxianensis sp. nov.和1个山西省新记录种浙江小三孔线虫Tripylina zhejiangensis Pham, Wang, Zhao Zheng 2013。蒲县小三孔线虫主要特征:虫体粗壮,6根长刚毛和4根短刚毛在同一圈上,背牙位于亚腹牙前端,三角形,指向腹侧。亚腹牙2颗,形状和大小类似于背牙。在颈部有1根亚腹中刚毛,单生殖腺无后阴子宫囊,尾部有1对亚背尾刚毛。5、鉴定并描述了Trischistoma属的1个新种Trischistoma taiguensis sp. nov和1个中国新记录种Trischistoma pellucidum Cobb 1913。Trischistoma taiguensis sp. nov主要特征:虫体细小,6根长刚毛和4根短刚毛在不同圈上,食道和肠连接处的贲门不明显,单生殖腺,无后阴子宫囊,尾部有1对亚背尾刚毛。6、鉴定并描述了Tripyla属的1个新种五台三孔线虫Tripyla wutai sp. nov和1个已报道种Tripyla setifera Biitschli 1873.五台三孔线虫主要特征:体较长L=1447~1644μm,外唇刚毛和颈刚毛在不同圈上,外唇刚毛向外伸直,不及唇区,楔形背牙位于亚腹牙之后,食道和肠连接处的贲门明显,双生殖腺,阴门较靠前V=47~56%,尾部最宽的部位在肛门处,尾尖较短2~4 μm。Tripyla setifera虽然在中国已有报道,但并没有对该种群的详细描述,本文详细描述了中国种群的形态特征。7、本研究用SSU和LSU的D2/D3序列分析了上述5个属的系统亲缘关系。并根据形态学特征编制了我国的长针科和三孔科线虫的分类检索表。8、对山西汾阳疑似赤枯病的白皮松根围的线虫多样性进行了研究,发现长针线虫主要集中在根际20~40 cm处,罹病程度严重的白皮松根际周围的长针线虫数量较多,其在罹病白皮松根际周围的分布数量与发病程度存在一定的相关性。
【关键词】:长针线虫 三孔线虫 分类 rRNA序列 系统发育
【学位授予单位】:山西农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:Q959.17
【目录】:
  • 摘要7-9
  • 第一章 文献综述及研究背景9-34
  • 1、线虫分类的研究进展9-12
  • 1.1 早期阶段9-10
  • 1.2 两纲分类法10-11
  • 1.3 三纲分类法11
  • 1.4 多纲分类法11-12
  • 2、长针线虫分类的研究进展12-19
  • 2.1 长针线虫的经济危害12-14
  • 2.2 长针线虫的分类研究14-16
  • 2.3 我国长针线虫分类研究现状16-19
  • 3、三孔线虫的研究进展19-23
  • 3.1 三孔线虫的分类地位19
  • 3.2 三孔线虫的分类现状19-23
  • 3.3 我国三孔线虫分类研究现状23
  • 4、线虫的现代分类技术及方法23-25
  • 5、本研究的目的意义及主要研究内容25-27
  • 参考文献27-34
  • 第二章 山西长针线虫分类鉴定和系统发育分析34-78
  • 1、材料和方法34-38
  • 1.1 线虫的采集34-35
  • 1.2 线虫的分离35-36
  • 1.3 线虫的杀死、脱水和制片36
  • 1.4 形态学观察和测量36-37
  • 1.5 DNA提取、PCR扩增和电泳37
  • 1.6 PCR产物的测序及系统发育树的构建37-38
  • 2、结果与分析38-74
  • 2.1 长针属线虫的鉴定结果及系统发育分析38-62
  • 2.2 剑属线虫的鉴定结果及系统发育分析62-72
  • 2.3 我国长针线虫形态学鉴定检索表72-74
  • 3、结论与讨论74-75
  • 参考文献75-78
  • 第三章 山西三孔线虫分类鉴定和系统发育分析78-124
  • 1、材料和方法78-80
  • 1.1 线虫的采集78-79
  • 1.2 线虫的分离79
  • 1.3 线虫的杀死、脱水、制片和观察79
  • 1.4 电镜观察79-80
  • 1.5 DNA提取、PCR扩增和电泳80
  • 1.6 PCR产物的测序及系统发育树的构建80
  • 2、结果与分析80-120
  • 2.1 Tripylina线虫的鉴定结果及系统发育分析80-92
  • 2.2 Trischistoma线虫的鉴定结果及系统发育分析92-104
  • 2.3 Tripyla线虫的鉴定结果及系统发育分析104-119
  • 2.4 我国三孔线虫形态分类检索表119-120
  • 3、结论与讨论120-122
  • 参考文献122-124
  • 第四章 罹病白皮松根际线虫种群动态与发病程度的相关性分析124-132
  • 1、材料和方法124-126
  • 1.1 线虫的采集124-125
  • 1.2 线虫的分离125
  • 1.3 线虫固定与计数125
  • 1.4 线虫类群的划分125-126
  • 2、结果与分析126-129
  • 2.1 根际土壤不同线虫营养类群及数量与发病级别的关系分析126-127
  • 2.2 根际土壤线虫总数量与发病级别的关系分析127
  • 2.3 根际土壤线虫的垂直分布与发病级别的关系分析127-128
  • 2.4 根际土壤长针线虫数量与发病级别的关系分析128-129
  • 3、结论与讨论129-131
  • 参考文献131-132
  • 第五章 小结132-135
  • 1、长针线虫的种类鉴定结果132-133
  • 2、三孔线虫的种类鉴定结果133-134
  • 3、线虫种群动态与发病程度的相关性探讨134-135
  • Abstract135-139
  • 附表139-153
  • 攻读博士期间发表的论文153-155
  • 致谢155

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本文编号:305246

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