河南华溪蟹ShToll1和ShToll3对镉暴露和嗜水气单胞菌攻毒的免疫应答研究

发布时间：2021-07-23 06:56

　　Toll信号通路是无脊椎动物先天性免疫中的重要一环,对于无脊椎动物抵抗细菌、真菌和病毒等感染具有重要作用。虽然,在甲壳动物中已经鉴定出一些Toll基因,但是在河南华溪蟹（Sinopotamon henanense）中还没有发现。此外,镉（cadmium,Cd）对Toll基因的影响,在生活于底泥中、易累积重金属的溪蟹类中尚未见报道。我们对河南华溪蟹肝胰腺组织的转录组分析发现,Cd暴露使Toll3基因表达降低。因此,本课题将从以下四个方面对河南华溪蟹ShToll1和ShToll3基因在Cd暴露和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）攻毒的应答模式进行研究。主要研究内容包括以下四个方面:1.河南华溪蟹ShToll1和ShToll3基因的序列分析与分布模式。通过RACE方法,克隆获得Shtoll1和Shtoll3基因全长序列;预测ShToll1和ShToll3的蛋白结构域,分析ShToll1和ShToll3蛋白各功能结构域的特点;同时,构建相似物种间的系统发育进化树,预测ShToll1和ShToll3的进化地位,并推测它们的功能。同时,取河南华溪蟹血淋巴、鳃、肝胰腺、中肠、肌... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：123 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

本学位论文的研究内容和研究方法

河南华溪蟹ShToll1和ShToll3对镉暴露和嗜水气单胞菌攻毒的免疫应答研究18Shtoll3基因。(a)(b)图2.1河南华溪蟹Shtoll1（a）和Shtoll3（b）全长序列凝胶电泳1，Shtoll1；2，Shtoll3Figure2.1Gelelectrophoresisresultsoffull-lengthsequenceofShtoll1(a)andShtoll3(b)fromS.henanense1，Shtoll1；2，Shtoll3Shtoll1基因的全长cDNA长度为4746bp，ORF区3033bp可编码1011个氨基酸，5’UTR为255bp，3’UTR为1713bp（图2.2）。氨基酸序列分析表明，ShToll1

第二章河南华溪蟹Shtoll1和Shtoll3基因的克垄生物信息学分析与组织表达模式19含有一个典型的Toll蛋白结构，其中包括：（1）由17个LRR、2个LRRCT和1个LRRNT组成的胞外域（氨基酸144-786）;（2）跨膜段（氨基酸794-816）;（3）胞内TIR结构域（氨基酸846-984）（图2.3）。在胞外域（图2.2）中预测了19个潜在的N-糖基化位点。三维结构预测结果发现，ShToll1可以形成经典的U形结构，胞外域卷曲并折叠成马蹄形（图2.4）。对细胞外LRR结构进行序列图谱分析，发现所有LRR结构符合"xLxxLxLxxNxφxxφxxxxFxx"的保守序列模式，其中x表示任何氨基酸，N表示丝氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸或苏氨酸，φ表示任何疏水氨基酸，L和F表示其他疏水氨基酸（图2.5）。图2.2河南华溪蟹Shtoll1基因全长序列Figure2.2Full-lengthsequenceofShtoll1fromS.henanense

【参考文献】：
期刊论文
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[3]温度变化对锯缘青蟹免疫因子的胁迫影响[J]. 丁小丰,杨玉娇,金珊,王国良.  水产科学. 2010(01)

硕士论文
[1]环境胁迫对养殖锯缘青蟹主要免疫因子的影响[D]. 周素琴.中国海洋大学 2006



本文编号：3298841