拟南芥WRKY12和WRKY13转录因子参与年龄途径介导开花的机制研究

发布时间：2023-03-12 15:46

　　对植物而言,从营养生长到生殖生长的转换是开花繁殖的关键阶段,在合适的时间开花对植物的繁衍以及农作物的产量有着至关重要的影响。植物开花是一个极为复杂的过程,受到内部遗传因子和外部环境条件的双重调控。经过多年来对植物开花调控途径的研究,尤其是对模式植物拟南芥的研究,已取得非常显著的成果,目前已探明5条主要的开花调控途径,分别为春化途径,光周期途径,赤霉素途径,年龄途径,自主途径。在短日照条件下,植物开花主要受到赤霉素途径和年龄途径的调控。我们前期的研究表明,WRKY12和WRKY13通过与DELLA蛋白形成复合物参与赤霉素途径调控开花,同时,它们的表达模式与发育时间密切相关,WRKY12的表达量稳步上升,而WRKY13则逐渐降低。在年龄途径中,miR156和SPL转录因子在转录水平上随年龄的发展呈现出相反的表达模式,miR156逐渐下降,SPLs逐渐增加。根据这些证据我们推测,WRKY12和WRKY13可能也参与年龄途径介导的植物开花诱导过程。为了验证这个假设,我们首先通过荧光定量PCR检测了短日照下WRKY12和WRKY13在WT,35S::MIR156和35S::MIM156植株中不同...

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩写对照表
第一章 前言
    1.1 植物开花研究进展
    1.2 光周期途径调控植物开花
    1.3 自主途径调控植物开花
    1.4 春化途径调控开花
    1.5 赤霉素途径调控开花
    1.6 年龄途径调控开花
    1.7 调控开花时间的其他途径
    1.8 SPL转录因子研究进展
        1.8.1 SPL转录因子调控营养生长到生殖生长的时期转换
        1.8.2 SPL转录因子调控间隔期
        1.8.3 SPL转录因子调控分蘖
        1.8.4 SPL转录因子调控叶夹角/穗分枝角/雄穗分枝角
        1.8.5 SPL转录因子其他方面的调控功能
    1.9 WRKY转录因子研究进展
        1.9.1 WRKY转录因子的结构特征和分类
        1.9.2 WRKY转录因子响应植物生物胁迫
        1.9.3 WRKY转录因子响应植物非生物胁迫
        1.9.4 WRKY转录因子调控植物发育
    1.10 本研究课题的背景、目的和意义
第二章材料与方法
    2.1 实验材料、菌株和试剂
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株及质粒
        2.1.3 主要试剂
    2.2 研究方法
        2.2.1 基因克隆及载体构建
        2.2.2 质粒转化大肠杆菌及Mini质粒提取
        2.2.3 材料种植与处理
        2.2.4 农杆菌感受态的制备及转化
        2.2.5 转基因植株的鉴定与检测试剂
        2.2.6 酵母杂交转化实验
        2.2.7 细菌蛋白的诱导表达及纯化
        2.2.8 GST Pull-down实验及Western Blot检测
        2.2.9 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)实验
        2.2.10 原生质体瞬时表达检测系统
        2.2.11 凝胶迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay)
第三章 实验结果
    3.1 WRKY12和WRKY13的表达受到miR156的调控
    3.2 SPL10直接结合WRKY12和WRKY13的启动子
    3.3 SPL10调控WRKY12和WRKY13的转录
    3.4 SPL10调控开花部分依赖于WRKY12和WRKY13
    3.5 SPL10与WRKY12和WRKY13相互作用
    3.6 SPL10和WRKY12/WRKY13直接调控miR172b的转录
    3.7 过表达miR172b部分互补wrky12-2突变体和WRKY13过表达晚花的表型
    3.8 WRKY12促进SPL10的转录活性,WRKY13抑制SPL10的转录活性
第四章 讨论
参考文献
致谢
附录
作者简介
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果



本文编号：3761497