两种海参极性脂质对Aβ致老年性痴呆的保护作用研究

发布时间：2017-03-31 05:23

  本文关键词：两种海参极性脂质对Aβ致老年性痴呆的保护作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：阿尔兹海默病(Alzheimer's Disease, AD),又称老年性痴呆,是一种以脑内神经元损伤及认知功能障碍为主要表现的神经退行性疾病,其病理学特征包括神经纤维缠结及脑内淀粉样沉淀的形成。Aβ是脑内淀粉样沉淀的重要组成成分,近年来诸多研究表明其在老年性痴呆的发病过程中发挥着重要的作用。作为药食两用的传统海珍品,海参具有多种活性成分,如海参皂苷、海参多糖、海参脂质等。有研究表明海参磷脂具有抗氧化能力,可改善因痴呆造成的学习和认知能力障碍,但有关海参极性脂质在Aβ沉积方面的作用仍鲜见报道。本文首先建立两种AD体外模型评价海参极性脂质在Ap损伤方面的保护作用及对突触生长的促进作用,在此基础上利用动物模型进一步评价了海参脑苷脂在改善学习和认知能力方面的作用,并探讨了其作用机制。主要研究结果如下：本文采用Aβ25-35损伤PC12细胞及APP/PS1双转细胞,分别建立了两种不同的AD模型,并依此探究了海参脑苷脂和海参磷脂的神经保护作用。实验结果发现,Aβ25-35可明显降低PC12细胞的存活率,损伤细胞形态；海参脑苷脂预处理后可增加PC12细胞的存活率,抑制LDH漏出,保护细胞膜的完整性,降低促凋亡基因Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达并使GSK-3β的表达量恢复正常,表明海参脑苷脂抗Aβ25-35损伤作用可能依赖于其抗凋亡活性。在APP/PS1双转细胞体系中,海参磷脂可抑制其细胞外Aβ1-40和Aβ1-42的分泌量,高剂量时可降低细胞内APP的蛋白表达量,具有一定的神经保护的作用。与此同时,本文通过在低营养环境下孵育PC12细胞,探究海参极性脂质在促突触重塑方面的作用。实验结果表明,海参极性脂质可促进PC12细胞突触重塑,其作用机制可能依赖于刺激突触素和GAP-43的表达,使其维持在正常水平,从而抑制营养缺乏导致的细胞损伤。在体外实验的基础上,本文选取海参脑苷脂为研究对象,利用快速老化小鼠SAMP8小鼠为动物模型,通过多种行为学测定方法,进一步研究海参脑苷脂对老年性痴呆的影响。实验结果显示,SAMP8小鼠表现出明显的学习和认知能力障碍,而海参脑苷脂饮食干预后,Barnes迷宫实验中小鼠找到目标箱的潜伏期和错误次数明显降低,Morris水迷宫实验中小鼠找到隐藏平台的潜伏期缩短、穿越平台次数增加、目标象限停留时间明显延长,表明海参脑苷脂可以提高小鼠的学习和记忆能力,改善认知障碍。结合动物实验和细胞实验的结果,本文通过对SAMP8小鼠海马区内Ap和GAP-43含量及脑组织、肝脏组织和血清中相关氧化应激指标的测定,探究海参脑苷脂改善学习和记忆能力的作用机制。实验结果表明,SAMP8小鼠海马组织内Aβ含量明显增多,GAP-43含量显著下降,脑内出现严重的氧化应激现象,但海参脑苷脂可明显改善小鼠海马组织内Ap沉积现象、降低NO、MDA、8-OHdG及8-oxo-G的含量并升高SOD活力,表明海参脑苷脂可通过降低SAMP8小鼠海马组织内Ap含量,提高脑内抗氧化物酶活力,抑制NO毒性,降低脑内脂质、DNA和RNA的过氧化现象,提高小鼠的学习和记忆能力。本文首次发现海参脑苷脂及海参磷脂均可在Aβ致老年性痴呆模型中发挥神经保护作用,海参脑苷脂可改善老年性痴呆模型小鼠的学习和记忆能力,并通过体内外实验初步探明其作用机制。本文为海参极性脂质在预防老年性痴呆方面的作用提供了科学依据,为相关功能性食品的开发奠定了理论基础。
【关键词】：海参极性脂质 老年性痴呆 Aβ沉积 突触生长 SAMP8小鼠 学习记忆能力
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285
【目录】：

• 英文缩略词5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-15
• 前言15-26
• 1. 阿尔兹海默病15-22
• 1.1 概述15-16
• 1.2 发病机制16-19
• 1.2.1 β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积假说16-17
• 1.2.2 中枢胆碱能损伤学说17
• 1.2.3 Tau蛋白异常学说17-18
• 1.2.4 基因突变学说18-19
• 1.2.5 氧化应激学说19
• 1.3 老年性痴呆治疗药物的研究进展19-21
• 1.3.1 改善脑内胆碱能水平药物19-20
• 1.3.2 清除自由基及抗氧化剂20
• 1.3.3 神经营养类药物20
• 1.3.4 调节Aβ生成过程药物20
• 1.3.5 生物活性成分20-21
• 1.4 老年性痴呆的模型研究进展21-22
• 1.4.1 老年性痴呆的动物模型建立21-22
• 1.4.2 老年性痴呆的体外模型建立22
• 2. 海参概述22-24
• 2.1 海参活性成分研究进展23
• 2.2 海参极性脂质研究现状23-24
• 2.2.1 海参脑苷脂的结构极其生物活性23-24
• 2.2.2 海参磷脂的结构极其生物活性24
• 3. 立题依据及研究的目的和意义24-26
• 第一章 两种海参极性脂质对Aβ致老年性痴呆细胞模型的保护作用26-47
• 第一节 海参脑苷脂对Aβ致PC12细胞损伤的保护作用27-37
• 1. 实验材料及方法27-31
• 1.1 材料与仪器27-28
• 1.2 实验方法28-31
• 2. 实验结果31-37
• 2.1 海参脑苷脂对PC12细胞存活率的影响31
• 2.2 Aβ_(25-35)对PC12细胞存活率的影响31-32
• 2.3 对Aβ_(25-35)诱导细胞损伤的细胞存活率影响32-33
• 2.4 对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤的形态学影响33-34
• 2.5 对Aβ_(25-35)模型中LDH释放量的影响34
• 2.6 对Aβ_(25-35)模型中相关凋亡基因表达量的影响34-37
• 第二节 海参磷脂对APP/PS1双转细胞Aβ分泌量的影响37-44
• 1. 实验材料及方法37-40
• 1.1 材料与仪器37-38
• 1.2 实验方法38-40
• 2. 实验结果40-44
• 2.1 APP/PS1质粒进入CHO细胞的验证40-41
• 2.2 对APP/PS1双转细胞外Aβ_(1-40)浓度的影响41-42
• 2.3 对APP/PS1双转细胞外Aβ_(1-42)浓度的影响42-43
• 2.4 对APP/PS1双转细胞内APP水平的影响43-44
• 本章讨论44-46
• 本章小结46-47
• 第二章 两种海参极性脂质对PC12细胞突触重塑的影响47-56
• 1. 实验材料及方法47-50
• 1.1 材料与仪器47-48
• 1.2 实验方法48-50
• 2. 实验结果50-54
• 2.1 SCC和SCP对PC12细胞突触伸长的影响50-51
• 2.2 SCC和SCP对PC12细胞内突触素含量的影响51-52
• 2.3 免疫荧光检测SCC和SCP对PC12细胞内突触素和GAP-43的影响52-54
• 本章讨论54-55
• 本章小结55-56
• 第三章 海参脑苷脂对SAMP8小鼠认知障碍的改善作用56-80
• 第一节 海参脑苷脂对SAMP8小鼠学习记忆能力的影响56-67
• 1. 实验材料及方法57-62
• 1.1 材料与仪器57
• 1.2 实验方法57-62
• 2. 实验结果62-67
• 2.1 旷场实验结果62
• 2.2 巴恩斯迷宫实验结果62-64
• 2.3 水迷宫实验结果64-67
• 第二节 海参脑苷脂对SAMP8小鼠行为学改善效果的机制研究67-76
• 1. 材料和方法68-70
• 1.1 材料与仪器68-69
• 1.2 实验方法69-70
• 2. 实验结果70-76
• 2.1 对海马组织中Aβ_(1-42)的影响70-71
• 2.2 对海马组织中GAP-43的影响71-72
• 2.3 对脑组织中氧化应激指标的影响72-75
• 2.4 对肝脏组织及血清中氧化应激指标的影响75-76
• 本章讨论76-79
• 本章小结79-80
• 参考文献80-88
• 结论88-89
• 本论文的特色及创新之处89-90
• 致谢90-91
• 个人简历91-92
• 硕士期间发表论文情况92

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李平;;维生素E对创伤恢复的作用[J];国外医学情报;1995年06期

2 ;[J];;年期

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 丁宁;两种海参极性脂质对Aβ致老年性痴呆的保护作用研究[D];中国海洋大学;2015年

2 程恳;乳脂质体制备方法及牛乳极性脂质理化性质的研究[D];哈尔滨工业大学;2012年

3 张婷婷;极性脂质的质谱分析方法研究及其应用[D];浙江工商大学;2015年

  本文关键词：两种海参极性脂质对Aβ致老年性痴呆的保护作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：279014