Galectin-3通过调控E/N-cadherin和CD44的表达促进肿瘤侵袭转移的机制研究

发布时间：2021-03-09 02:02

　　研究背景半乳糖凝集素（galectin）是凝集素超级家族的一个家族,属于β-半乳糖苷连接蛋白,对β-半乳糖苷有高度亲和性。迄今为止发现的半乳糖凝集素共有15种,并且都拥有一个或两个高度保守的糖识别域（carbohydrate cognition domain,CRD）。半乳糖凝集素-3（galectin-3）是galectin家族中唯一的嵌合型代表,拥有一个CRD和一个串联重复结构域。Galectin-3（gal-3）广泛表达于正常组织与肿瘤细胞,在细胞内合成,能够穿梭于胞浆和胞核,还可以转运到细胞膜上,能够调节肿瘤细胞的增值、迁移、凋亡、粘附和血管形成。Gal-3在大多数肿瘤细胞内呈现高表达,并且其表达水平与肿瘤的恶性程度存在着密切联系。近年来的研究表明,多数肿瘤患者血清中gal-3的浓度明显高于正常人,主要集中在乳腺癌、肺癌、口腔癌、胃癌、胰腺癌和结肠癌等患者。血清中的gal-3能够使MUC1极化分布,将细胞表面的粘附分子（cell adhesion molecules,CAMs）暴露出来,从而促进肿瘤细胞和血管内皮细胞之间的粘附。也有文献报道,gal-3的表达可诱导整合素的活化,... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
符号说明
前言
    1. Galectin-3简介
        1.1. Galectin家族
        1.2. Galectin-3的结构
        1.3. Galectin-3的表达
        1.4. Galectin-3的分布与功能
    2. Galectin-3在肿瘤发生发展中的生物学作用
        2.1. Galectin-3与细胞凋亡
        2.2. Galectin-3与肿瘤侵袭转移
            2.2.1. Galectin-3促进血管形成
            2.2.2. Galectin-3促进肿瘤细胞的运动
            2.2.3. Galectin-3促进肿瘤细胞的聚集
            2.2.4. Galectin-3参与免疫调控
    3. Galectin-3为靶点的抑制剂
        3.1. 糖类抑制剂
        3.2. 非糖类抑制剂
    4. E/N-cadherin和CD44与细胞间粘附
    5. EGFR的信号转导通路与肿瘤
    6. 本课题的研究方向
实验部分
    1. 实验材料
        1.1. 化合物
        1.2. 细胞转染试剂
        1.3. 细胞株
        1.4. 试剂
        1.5. 试剂配制
        1.6. 仪器设备
    2. 实验方法
        2.1. 细胞的培养（复苏和传代）
        2.2. siRNA转染实验（方法仅适6孔板）
        2.3. 划痕实验
        2.4. Transwell实验（侵袭实验）
        2.5. 流式细胞仪检测细胞聚集实验
        2.6. 肿瘤细胞与HUVECs的粘附实验
        2.7. Western blotting法检测相关蛋白表达实验
        2.8. 亚细胞结构胞浆和胞核蛋白提取实验
        2.9. 免疫共沉淀实验
        2.10. 统计学方法
    3. 实验结果
        3.1. 细胞内galectin-3对粘附分子的调控及肿瘤细胞侵袭转移的作用
            3.1.1. Galectin-3上调粘附分子E/N-cadherin和CD44的表达
            3.1.2. Galectin-3不影响A549细胞的同型聚集
            3.1.3. Galectin-3通过增加β-catenin入核促进A549细胞与HUVECs间的粘附
            3.1.4. Galectin-3通过增加β-catenin入核上调N-cadherin和CD44的表达
            3.1.5. Galectin-3通过增加β-catenin入核促进A549细胞的迁移和侵袭
        3.2. 细胞外galectin-3对粘附分子的调控及肿瘤细胞侵袭转移的作用
            3.2.1. EGF和galectin-3共存对EGFR磷酸化作用的检测
            3.2.2. 在EGF存在下,galectin-3通过增加NF-kB入核下调E-cadherin的表达
            3.2.3. 在EGF存在下,galectin-3可减少PC3细胞内E-cadherin/β-catenin复合体的形成
            3.2.4. 在EGF存在下,galectin-3可抑制PC3细胞的同型聚集
            3.2.5. 细胞外galectin-3可进入细胞内调控E/N-cadherin和CD44的表达
            3.2.6. Galectin-3促进β-catenin入核
            3.2.7. Galectin-3促进肿瘤细胞与HUVECs间的粘附
            3.2.8. Galectin-3上调N-cadherin和CD44的表达来诱导肿瘤细胞与HUVECs之间的粘附
    4. 讨论
    5. 结论
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的论文
学位论文评阅及答辩情况表


【参考文献】：
期刊论文
[1]半乳糖凝素-3在结肠癌肝转移中的表达及改良柑橘果胶对其抑制作用[J]. 黄志良,刘海鹰.  南方医科大学学报. 2008(08)



本文编号：3072055