血管紧张素(1-7)对高糖诱导的MIN6细胞去分化及Fox01细胞内定位的影响
发布时间:2024-07-10 19:32
目的:体外培养小鼠MIN6细胞,并给予Ang(1-7)干预,利用免疫荧光技术在共聚焦显微镜下观察细胞表面因子MafA、Ngn3的表达情况,及FoxO1在细胞内表达位置的变化,从而探讨Ang(1-7)能否改善高糖诱导下的MIN6细胞去分化。方法:1.将小鼠MIN6细胞用按照一定比例配制的DMEN培养基接种于25ml培养瓶中,置于37℃、5%CO2浓度的细胞孵箱中进行培养。每24小时更换培养液1次,待细胞生长至贴满瓶壁80%时进行传代培养,根据细胞生长状况,选取第3-4代细胞进行实验操作。2.将细胞随机分为四组,A组为正常对照无干预措施;B组加入提前配制的25mmol/L高糖溶液;C组加入25mmol/L高糖溶液+10-5mol/L的Ang(1-7)溶液,(先加入Ang(1-7),30分钟后加入高糖溶液);D组加入25mmol/L高糖溶液+10-5mol/L的Ang(1-7)+10-5mol/L的A-779溶液(先加入A-779,30分钟后加入Ang(1-7),再过30分钟加高糖溶液);相同条件下共同培养24小时。3.利用免...
【文章页数】:43 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
ABSTRACT
常用缩写词中英文对照表
前言
1 材料与方法
1.1 实验细胞
1.2 实验主要试剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验主要试剂配制方法
2 研究方法
2.1 MIN-6 小鼠胰岛细胞培养
2.2 细胞爬片
2.2.1 玻片制备
2.2.2 细胞爬片
2.3 实验分组
2.4 细胞免疫化学染色
2.5 激光共聚焦显微镜成像
2.6 统计学分析
3 结果
3.1 显微镜下观察各组MIN-6 细胞生长状况
3.2 MIN-6 细胞表面标志物MafA、Ngn3 的表达情况
3.3 不同干预条件下 MIN6 细胞去分化标志物 Ngn3 表达情况
3.4 不同干预条件下 Fox O1 在细胞内的表达位置情况
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
参考文献
致谢
个人简历
本文编号:4004621
【文章页数】:43 页
【学位级别】:硕士
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中文摘要
ABSTRACT
常用缩写词中英文对照表
前言
1 材料与方法
1.1 实验细胞
1.2 实验主要试剂
1.3 实验主要仪器
1.4 实验主要试剂配制方法
2 研究方法
2.1 MIN-6 小鼠胰岛细胞培养
2.2 细胞爬片
2.2.1 玻片制备
2.2.2 细胞爬片
2.3 实验分组
2.4 细胞免疫化学染色
2.5 激光共聚焦显微镜成像
2.6 统计学分析
3 结果
3.1 显微镜下观察各组MIN-6 细胞生长状况
3.2 MIN-6 细胞表面标志物MafA、Ngn3 的表达情况
3.3 不同干预条件下 MIN6 细胞去分化标志物 Ngn3 表达情况
3.4 不同干预条件下 Fox O1 在细胞内的表达位置情况
4 讨论
5 结论
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综述
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本文编号:4004621
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