小鼠生精细胞AAV特异表达载体的构建及表达验证

发布时间：2025-02-09 15:07

　　目的:1.分别构建含有小鼠生精细胞特异启动子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特异表达载体,验证并筛选有效特异启动子。2.构建小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag,并且从体内、外验证其表达特异性。方法:1.筛选小鼠生精细胞特异启动子通过同源重组的方法分别构建含有小鼠生精细胞特异启动子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特异表达载体,分别转染生精细胞GC1细胞,通过比较5种载体在GC1细胞中的表达情况筛选有效的小鼠生精细胞特异启动子。2.构建小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag通过同源重组的方法将小鼠生精细胞特异启动子Dazl片段与酶切后去除CMV启动子的腺相关病毒载体AAV-CMV-RFP-Flag连接,并通过双酶切和基因测序验证小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag的构建。3.小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag体外验证将腺相关病毒载体AAV-CMV-RFP-Flag及小鼠生精细胞特异表达载体AAV-DazlRFP-Flag分别转染GC1细胞和293T...

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图3AAV-Hspa2-RFP的结构及测序结果

山西医科大学硕士学位论文12图3AAV-Hspa2-RFP的结构及测序结果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult图1AAV-Dazl-RFP的结构及测序结果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

图4AAV-pgk2-RFP的结构及测序结果

山西医科大学硕士学位论文12图3AAV-Hspa2-RFP的结构及测序结果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult图1AAV-Dazl-RFP的结构及测序结果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

图1AAV-Dazl-RFP的结构及测序结果

山西医科大学硕士学位论文12图3AAV-Hspa2-RFP的结构及测序结果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult图1AAV-Dazl-RFP的结构及测序结果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

图2AAV-Stra8-RFP的结构及测序结果

山西医科大学硕士学位论文12图3AAV-Hspa2-RFP的结构及测序结果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult图1AAV-Dazl-RFP的结构及测序结果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

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