基于组学技术研究肠道乳酸杆菌L.frumenti对早期断奶仔猪营养物质代谢的影响

发布时间：2023-01-05 19:02

　　仔猪早期断奶措施常伴随着严重的疾病,特别是腹泻。肠道微生物及其代谢产物在维持宿主生理和代谢稳态方面发挥重要作用。我们的前期研究证明灌服弗氏乳杆菌（Lactobacillus frumenti）提高早期断奶仔猪肠道上皮屏障功能并提高了早期断奶仔猪对腹泻的耐受能力。但是早期断奶仔猪对L.frumenti的代谢响应仍不清楚。因此,我们通过肠道蛋白质组学和血清及肝脏代谢组学探究早期断奶仔猪对L.frumenti的代谢响应。本试验选用100头体重接近、健康状况良好的仔猪,随机分为2组（A组和B组）,每组5窝,每窝10头（公母各半）。出生仔猪于6日龄开始灌服。A组灌服2m L无菌PBS（对照组）;B组灌服2m L L.frumenti（用无菌PBS稀释至1×10~8 CFU/m L,处理组）。每日灌服一次,连续灌服15日。仔猪于21日龄进行断奶。26日龄每窝随机选取一头称重、屠宰和采样。本文的主要结果如下:试验一通过蛋白质组学技术筛选早期断奶仔猪肠道响应L.frumenti的代谢相关的差异表达蛋白,并通过生物信息学分析初步阐明L.frumenti对早期断奶仔猪肠道营养物质代谢的调控机制。1.蛋白质... 

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【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
缩略语表(Abbreviation)
第一章 文献综述
    1 仔猪早期断奶措施的研究进展
        1.1 仔猪早期断奶措施
            1.1.1 仔猪早期断奶措施对仔猪胃肠道功能的影响
            1.1.2 仔猪早期断奶措施对仔猪胃肠道微生物的影响
            1.1.3 仔猪早期断奶措施对仔猪免疫的影响
        1.2 缓解仔猪断奶应激的措施
            1.2.1 酶制剂
            1.2.2 益生菌
            1.2.3 谷氨酰胺
            1.2.4 酸化剂
            1.2.5 抗菌肽
    2 益生菌的研究及应用
        2.1 肠道微生物对早期断奶仔猪的影响
        2.2 肠道微生物对营养物质代谢的影响
            2.2.1 肠道微生物对氨基酸代谢的影响
            2.2.2 肠道微生物对脂质代谢的影响
            2.2.3 肠道微生物对能量代谢的影响
    3 研究目的与意义
第二章 蛋白质组学研究灌服L.frumenti对早期断奶仔猪肠道脂质和氨基酸代谢的影响
    1 引言
        2.1 试验材料
            2.1.1 试验动物
            2.1.2 主要药品和试剂
            2.1.3 主要缓冲液及其配制
        2.2 试验方法
            2.2.1 试验分组
            2.2.2 样品采集
            2.2.3 肠上皮细胞样品采集与制备
            2.2.4 蛋白质样品的提取
            2.2.5 蛋白质浓度的BSA测定
            2.2.6 SDS电泳
            2.2.7 蛋白质样品的组学分析
            2.2.8 蛋白质谱数据与生物信息学分析
            2.2.9 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 L.frumenti对早期断奶仔猪生长性能的影响
        3.2 灌服L.frumenti对早期断奶仔猪肠道蛋白质组学显著差异蛋白质的鉴定
        3.3 显著差异蛋白质亚细胞定位
        3.4 早期断奶仔猪肠道蛋白质组学差异蛋白质的功能分类
        3.5 差异蛋白质的GO分析
        3.6 差异蛋白质的代谢通路分析
        3.7 差异蛋白质的网络分析
    4 讨论
    5 小结
第三章 代谢组学研究灌服L.frumenti对早期断奶仔猪血清和肝脏代谢的影响
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 试验材料
            2.1.1 试验动物
            2.1.2 主要药品和试剂
            2.1.3 主要缓冲液及其配制
        2.2 试验方法
            2.2.1 试验分组
            2.2.2 样品采集
            2.2.3 蛋白质样品的提取
            2.2.4 代谢物样品的提取
            2.2.5 色谱和质谱检测条件
            2.2.6 质谱数据与生物信息学分析
            2.2.7 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 血清和肝脏代谢物的鉴定
        3.2 血清和肝脏差异代谢物的筛选
        3.3 血清和肝脏差异代谢物相关性分析
        3.4 L.frumenti对早期断奶仔猪血清和肝脏代谢组学差异代谢物代谢通路的影响
        3.5 L.frumenti对早期断奶仔猪血清和肝脏代谢组学共同差异代谢物的影响
        3.6 L.frumenti对早期断奶仔猪血清核苷酸代谢的影响
        3.7 L.frumenti对早期断奶仔猪肝脏脂肪酸β-氧化的影响
    4 讨论
    5.小结
第四章 总结
参考文献
致谢
攻读博士学位期间已发表或录用的论文



本文编号：3727986