吡虫啉对蚯蚓抗氧化酶系的影响及DNA损伤

发布时间：2025-02-13 19:36

　　化学杀虫剂发展史上最重要的里程碑是新烟碱类杀虫剂的发现。据报道，2006年新烟碱类杀虫剂在全世界的年销量达到十五亿六千万美元，约占世界化学杀虫剂总销售额的17%。吡虫啉是新烟碱类杀虫剂中的典型代表药剂，是世界范围内最有效、销售量最好的杀虫剂，在田间广泛使用，主要用于防治刺吸式口器害虫，害虫接触药剂后，其中枢神经正常传导受阻，使害虫麻痹死亡。 随着吡虫啉的广泛使用，吡虫啉将会通过多种途径进入环境，势必对生态系统的非靶标生物产生不利影响，从而对整个生态系统结构和功能带来各种各样的危害。因此，研究吡虫啉对非靶标生物的毒性，是评价吡虫啉对生态环境安全性的一个重要指标。 为了评估吡虫啉对土壤生态环境的影响，本文以吡虫啉为研究对象，选取土壤中的模式生物--赤子爱胜蚓为生物标志物，将蚯蚓暴露于空白对照土壤和经吡虫啉染毒后浓度为0.10、0.50、1.00mg/kg土壤的处理组土壤中，于染毒后的第7，14，21和28天，取样进行各指标的测定。通过测定吡虫啉对蚯蚓活性氧簇（ROS）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、谷胱甘肽转移酶（GST）活性、丙二醛（MDA）含量的影响...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

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英文摘要
1 引言
    1.1 吡虫啉理化性质概述
        1.1.1 吡虫啉的理化性质及作用机理
        1.1.2 吡虫啉的环境特性
    1.2 吡虫啉对非靶标生物的毒性
        1.2.1 吡虫啉对蜜蜂的毒性
        1.2.2 吡虫啉对家蚕的毒性
        1.2.3 吡虫啉对植物的毒性
        1.2.4 .吡虫啉对水生生物的毒性
        1.2.5 吡虫啉对蚯蚓的毒性．
    1.3 选择指示生物及指标的依据
        1.3.1 赤子爱胜蚓作为指示生物的意义
        1.3.2 选取的指标的价值
    1.4 活性氧自由基（ROS）产生与消除途径
        1.4.1 ROS 简介
        1.4.2 生物体内 ROS 存在意义
        1.4.3 ROS 的清除途径
    1.5 抗氧化酶系清除活性氧簇机理
        1.5.1 超氧化物歧化酶（SOD）消除 O2-机理
        1.5.2 过氧化氢酶（CAT）消除 H2O2机理
    1.6 谷胱甘肽硫转移酶（GST）的解毒机制
    1.7 脂质过氧化终产物--丙二醛（MDA）简介
    1.8 单细胞凝胶电泳（SCGE）概述
        1.8.1 单细胞凝胶电泳简介
        1.8.2 单细胞凝胶电泳基本原理
    1.9 本文研究内容
2 材料与方法
    2.1 药品试剂
    2.2 仪器设备
    2.3 赤子爱胜蚓选取及染毒方式
        2.3.1 OECD 标准人工土及农药贮备液配制
        2.3.2 染毒浓度及时间
        2.3.3 测定指标
        2.3.4 染毒方法
    2.4 蚯蚓体内 ROS 的测定方法
        2.4.1 ROS 试剂配制
        2.4.2 ROS 测定原理
        2.4.3 ROS 测定方法
    2.5 蚯蚓体内抗氧化酶系的测定方法
        2.5.1 蚯蚓酶液制备
        2.5.2 酶液蛋白质含量的测定
        2.5.3 SOD 测定
        2.5.4 CAT 测定
    2.6 蚯蚓体内 GST 活性的测定方法
        2.6.1 GST 试剂配制
        2.6.2 GST 活性测定
        2.6.3 GST 结果与计算
    2.7 蚯蚓体内 MDA 含量的测定方法
        2.7.1 MDA 测定原理
        2.7.2 MDA 试剂配制
        2.7.3 MDA 测定
        2.7.4 MDA 结果与计算
    2.8 蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤的测定方法
        2.8.1 彗星实验试剂配制
        2.8.2 蚯蚓体腔细胞的制备
        2.8.3 电泳胶板的制作
        2.8.4 细胞裂解
        2.8.5 DNA 解旋
        2.8.6 电泳
        2.8.7 中和、脱水
        2.8.8 染色
        2.8.9 观察和分析
    2.9 数据处理
3 结果与分析
    3.1 吡虫啉对蚯蚓 ROS 含量的影响
    3.2 吡虫啉对蚯蚓抗氧化酶活性影响
        3.2.1 吡虫啉对蚯蚓 SOD 活性影响
        3.2.2 吡虫啉对蚯蚓 CAT 活性的影响
    3.3 吡虫啉对蚯蚓解毒酶 GST 活性的影响
    3.4 吡虫啉对蚯蚓 MDA 含量的影响
    3.5. 吡虫啉对蚯蚓体腔细胞 DNA 的损伤
        3.5.1 彗星图像
        3.5.2 吡虫啉对蚯蚓体腔细胞细胞 DNA 损伤程度（Olive 尾矩）的影响
4 讨论
    4.1 吡虫啉对对蚯蚓 ROS 含量的影响
    4.2 吡虫啉对蚯蚓氧化胁迫研究
        4.2.1 吡虫啉对蚯蚓 SOD 活性的影响
        4.2.2 吡虫啉对蚯蚓 CAT 活性的影响
    4.3 吡虫啉对蚯蚓 GST 活性的影响
    4.4 吡虫啉对蚯蚓 MDA 含量的影响
    4.5 吡虫啉对蚯蚓体腔细胞 DNA 的损伤
    4.6 各个测定指标的相关性
5 结论
6 本论文创新之处
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文



本文编号：4034013