AMEP蛋白在不同芽孢杆菌中的表达量及活性差异分析

发布时间：2021-08-03 23:44

　　AMEP蛋白是从枯草芽孢杆菌中分离鉴定的一种新型蛋白激发子,能够激发植物免疫,提高植物抗病性。经生物信息学分析发现,AMEP蛋白的编码基因在芽孢杆菌属的菌株中广泛分布,但各菌株AMEP蛋白的表达产量和活性还有待研究。该研究对实验室保藏的多株芽孢杆菌进行PCR扩增鉴定基因,筛选出含有AMEP编码基因的菌株;通过蛋白表达纯化和定量确定了各菌株AMEP蛋白的表达量;并通过过敏反应试验比较各菌株AMEP蛋白的功能活性,确定菌株BU396产AMEP蛋白的表达量最高,且具有正常的功能活性,适合于作为今后AMEP蛋白的表达菌株。 

【文章来源】：安徽农学通报. 2020,26(20)

【文章页数】：3 页

【部分图文】：

多株芽孢杆菌AMEP蛋白编码基因的PCR扩增

经过对AMEP蛋白的表达、纯化以及浓度测定，检测了各芽孢杆菌菌株（BU66、BU108、BU278、BU396和BU412）中AMEP蛋白表达量的差异，其结果如图2所示。由图2可知，5株菌中菌株BU396为AMEP蛋白产量最高的菌株，其产量可达到1.8mg/m L。其他4株菌株BU108、BU278、BU412和BU66的AMEP的蛋白产量分别为1.37mg/m L、1.73mg/m L、1.72mg/m L和1.12mg/m L。5株芽孢杆菌中，菌株BU66目标蛋白的产量最低仅为1.12mg/m L。菌株BU396的AMEP蛋白产量显著高于其他菌株，而BU66、BU108的AMEP蛋白产量则显著低于其他菌株。2.3 各芽孢杆菌菌株AMEP蛋白活性的差异

将测定浓度的AMEP蛋白进行稀释，控制蛋白浓度为0.5mg/m L，以低盐溶液作为对照组CK。采取0.2m L样品量分3次注射于烟草叶片后，将烟草置于黑暗环境下24h后观察烟草叶片坏死枯斑的大小，结果如图3所示。由图3可知，在5株菌株中菌株BU66中AMEP蛋白活性最低，其他4株菌株蛋白激发子活性则大致基本相同。综合分析，可以确定BU396菌株的AMEP蛋白产量最高，且活性好，适合为今后AMEP蛋白的表达菌株。3 讨论

【参考文献】：
期刊论文
[1]正确的高级结构是蛋白质生物学活性的基本前提[J]. 闫荣玲,廖阳.  生物学教学. 2015(11)
[2]蛋白质的折叠调控与包涵体的形成[J]. 井明艳,孙建义.  浙江大学学报(农业与生命科学版). 2004(06)
[3]蛋白质折叠和分子伴侣[J]. 王志珍.  生物学通报. 2004(05)

博士论文
[1]酶活性中心稳定化策略提高褶皱假丝酵母脂肪酶的稳定性[D]. 张小飞.上海交通大学 2016

硕士论文
[1]大丽轮枝菌蛋白激发子纯化、基因克隆与功能分析[D]. 王炳楠.中国农业科学院 2011



本文编号：3320550