柑橘超量表达CsNBS-LRR通过SA信号途径增强对溃疡病抗性

发布时间：2021-11-26 06:32

　　克隆了柑橘CsNBS-LRR基因,分析该基因在柑橘溃疡病菌（Xcc）、水杨酸、茉莉酸甲酯诱导下的表达特征,通过在晚锦橙中超量表达验证其功能。结果表明,CsNBS-LRR的开放阅读框为3 633bp,编码1 210个氨基酸。其在感病品种晚锦橙中受Xcc诱导下调表达,而在低感品种四季橘中上调表达;在四季橘中受水杨酸诱导明显上调表达,而晚锦橙中上调幅度较小;两品种CsNBS-LRR受茉莉酸甲酯诱导均不明显;超量表达载体转化晚锦橙获得4个阳性植株;抗性评价表明超量表达CsNBS-LRR明显提升了转基因植株对柑橘溃疡病的相对抗性（病情指数为野生型的75%～88%）;转基因植株中水杨酸含量和水杨酸合成途径中关键基因转录水平明显提高;水杨酸信号途径中的PR基因转录水平也升高。综上所述,CsNBS-LRR是柑橘抗溃疡病的1个抗病基因,它可能通过对水杨酸途径的调控一定程度上增强柑橘对溃疡病抗性。 

【文章来源】：园艺学报. 2020,47(05)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

CsNBS-LRR基因结构（A）和其功能结构域（B)

CsNBS-LRR的诱导表达特征

为了更好的理解CsNBS-LRR在抗Xcc中的作用，利用反向遗传学方法研究了它的功能。构建了具有GUS编码序列的CsNBS-LRR超量表达载体pLGNe-CsNBS-LRR（图3,A）。CsNBS-LRR将在组成型启动子CaMV 35S的驱动下实现超量表达。晚锦橙转基因植株通过基因组PCR鉴定得到4个转基因植株，扩增得到大约1.7 kb的特征片段，而野生型植株无扩增（图3,B）。对这4个植株进行GUS染色均检测到蓝色，为转基因阳性苗，野生型呈无色（图3,C）。就表型而言，同野生型相比，转基因植株表现出相似的生长速率和生长状态（图3,D）。这4个转基因植株中CsNBS-LRR均得到了较高水平的表达，分别为野生型的47倍、68倍、62倍和49倍（图3,E）。2.4 CsNBS-LRR超量表达植株的抗性评价

【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘溃疡病相关基因CsPGIP的克隆与表达[J]. 胡安华,祁静静,张庆雯,陈善春,邹修平,许兰珍,彭爱红,雷天刚,姚利晓,龙琴,何永睿,李强.  中国农业科学. 2019(04)
[2]柑橘溃疡病菌分化及防治研究进展[J]. 姚廷山,周彦,周常勇.  园艺学报. 2015(09)
[3]苹果NBS-LRR1基因的鉴定与表达分析[J]. 宋霄,柏素花,戴洪义.  园艺学报. 2013(07)



本文编号：3519589