香蕉内生细菌G9R-3分离鉴定及其拮抗香蕉枯萎病菌活性评价

发布时间：2022-01-09 17:43

　　【目的】分离、鉴定香蕉内生细菌G9R-3并评价其拮抗香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4）活性,为开发利用该菌株防控香蕉枯萎病（Fusarium wilt）提供理论依据。【方法】通过形态学观察、生理生化特性分析及分子检测鉴定从桂蕉9号健康香蕉植株根部分离的一株香蕉内生细菌G9R-3菌株。分别运用平板对峙法、生长速率法、平板对扣法及杯苗灌根接种法,分析菌株G9R-3拮抗香蕉枯萎病菌的活性并综合评价其防效。【结果】菌株G9R-3鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,对香蕉枯萎病菌平板菌落的抑制率为83.05%;发酵上清液对Foc4菌丝生长抑制率为42.35%;挥发性气体对Foc4菌丝生长抑制率为58.64%。对盆栽香蕉枯萎病的防控结果表明,菌株G9R-3对香蕉枯萎病菌具有拮抗活性,其中接种桂蕉1号的相对防效为65.00%,接种红研2号的相对防效为29.91%,接种万钟4号的相对防效为16.11%,接种桂蕉9号的相对防效为48.83%。【结论】G9R-3是一株对香蕉枯萎病菌具有拮抗活性的内... 

【文章来源】：西南农业学报. 2020,33(07)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

基于gyrB基因序列构建的系统发育进化树

从桂蕉9号植株根部分离得到一株内生细菌,通过平板对峙试验筛选得到具有较强拮抗香蕉枯萎病菌Foc4活性的菌株G9R-3;菌株经革兰氏染色呈阳性,杆状,产芽孢,在NA培养基上菌落呈圆形,边缘不规则,表面光滑湿润(图1),呈淡黄色。其生理生化特性检测结果见表1。PCR扩增菌株G9R-3的16S rDNA序列全长为1427 bp,在NCBI上进行BLAST比对,结果与B. amyloliquefaciens 、B.velezensis和B.subtilis序列相似度均在99 %以上(图2)。选取相应菌种模式菌株序列构建系统发育进化树,菌株G9R-3与B.velezensis SQR9、B.amyloliquefaciens FZB42聚在同一分支,亲缘关系较近。为进一步确认其亲缘关系,采用PCR扩增菌株G9R-3 gyrB基因序列与相应菌种模式菌株序列进行BLAST比对,结果(图3)表明,该菌株基因序列全长为1265 bp,与B.amyloliquefaciens FZB42相似度最高,达99 %,聚于同一分支,亲缘关系更近。综合以上序列比对结果,将菌株G9R-3鉴定为解淀粉芽孢杆菌。表1 菌株G9R-3生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of strain G9R-3 鉴别特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 鉴别特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 革兰氏染色 + 明胶液化 + 氧化酶 + 酯酶 - 接触酶 + 牛奶水解 + 甲基红(M.R) - 精氨酸双水解酶 - V-P测定 + 脲酶 + 3-酮基乳糖 - pH<5.6生长 + 纤维素水解 - 5 %NaCl生长 + 七叶灵水解 + 4 ℃生长 - 淀粉水解 - 50 ℃生长 + 糖醇类发酵 + 注:+表示阳性反应;-表示阴性反应。Note:+ meant positive reaction;-meant negative reaction.

表1 菌株G9R-3生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of strain G9R-3 鉴别特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 鉴别特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 革兰氏染色 + 明胶液化 + 氧化酶 + 酯酶 - 接触酶 + 牛奶水解 + 甲基红(M.R) - 精氨酸双水解酶 - V-P测定 + 脲酶 + 3-酮基乳糖 - pH<5.6生长 + 纤维素水解 - 5 %NaCl生长 + 七叶灵水解 + 4 ℃生长 - 淀粉水解 - 50 ℃生长 + 糖醇类发酵 + 注:+表示阳性反应;-表示阴性反应。Note:+ meant positive reaction;-meant negative reaction.图3 基于gyrB基因序列构建的系统发育进化树


本文编号：3579163