致病疫霉拮抗菌株B25-Ⅰ-3的鉴定及其次级代谢产物
发布时间：2022-01-23 07:52
【背景】粘细菌是一类具有社会性行为的高等原核生物,能产生丰富、多样、新颖的具有生物活性的次级代谢产物,具有很大的研究开发价值。【目的】从土壤样品中筛选出对致病疫霉（Phytophthora infestans）具有拮抗作用的粘细菌,并对其次级代谢产物进行研究。【方法】对分离到的一株拮抗P. infestans菌株,结合形态观察和16S rRNA基因序列分析确定其分类地位,并通过单因素分析与正交优化相结合的方法对菌株的发酵参数进行研究。采用滤纸片法对其浓缩发酵液中活性物质的稳定性及抗菌活性进行检测,并通过薄层色谱法（thin layer chromatography,TLC）与高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）等初步分离后,将具有抗P. infestans活性的组分利用液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）进行检测,最后通过离体叶片法测定活性物质对马铃薯晚疫病的防病作用。【结果】从土壤样品中分离得到的菌株B25-Ⅰ-3对P. infestans表现出较强的拮抗活性,经鉴定为橙色粘球菌（Myxococcus fulvu...
【文章来源】：微生物学通报. 2020,47(11)北大核心CSCD
【文章页数】：14 页
【部分图文】：
菌株B25-I-3的形态特征
如图2A所示，菌株B25-I-3接种后经2 d的迟缓期，在第2-3天进入快速增长期，第3-5天进入第2个迟缓期，第5-7天再次进入快速增长期，第7天时菌体重量达到最大值，之后急速减少，进入衰亡期，9 d后趋于稳定。将菌株发酵培养后，滤纸片法分别检测其胞内物及胞外物对致病疫霉的抗性。结果如图2B所示，菌株B25-I-3的胞外物对致病疫霉的生长表现出一定的抑制作用，但并未检测到胞内物的抑菌活性，可初步说明菌株B25-I-3的抗致病疫霉活性物质主要存在于细胞外。2.3.2 菌株B25-I-3发酵条件优化结果
温度为25-30°C时，菌株B25-I-3发酵上清液对P.infestans的抑制活性随温度的升高而增强，30°C时达到最高，菌丝生长边缘距滤纸片为6.5 mm，之后抑菌活性随温度的增高而降低(图3D)，说明温度过高或过低都不利于M.fulvus B25-I-3活性物质的产生，因其最佳发酵温度为30°C。选取对抑菌活性影响较大的接种量、温度与周期这3个因素进行正交试验，方案及结果如表6所示。菌株B25-I-3经不同接种量、温度、周期产生的发酵上清液对P.infestans的抑制活性不同。其最优发酵条件为：接种量10%，温度30°C，周期7 d。极差分析可知影响发酵上清液抑制P.infestans活性的顺序为：温度>接种量>周期。
【参考文献】：
期刊论文
[1]耐酸产蛋白酶芽孢杆菌SD48菌株液体发酵豆粕产大豆肽条件的优化[J]. 周星华,董伟洁,姜军坡,刘双,王世英,朱宝成. 河南农业科学. 2019(08)
[2]几种中药提取液对常见的致病菌体外抑菌及抗氧化活性的初步研究[J]. 历雪,夏青,李艳,赵凤胜,何秀霞. 长春理工大学学报(自然科学版). 2019(01)
[3]植物乳杆菌发酵生产苯乳酸的条件优化研究[J]. 杨小院,李渐鹏,史国萃,刘尊英. 食品科技. 2018(09)
[4]抗马铃薯晚疫病菌的粘细菌菌株X6-Ⅱ-1的分离鉴定、拮抗活性及发酵条件的优化[J]. 武志华,郭维维,董晔,郭子文,王雪寒,刘惠荣. 农业生物技术学报. 2018(09)
[5]大兴安岭地区粘细菌资源的多样性及其生物活性[J]. 武志华,李娜,马秀枝,董晔,郭子文,刘惠荣. 微生物学通报. 2018(02)
[6]马铃薯晚疫病菌拮抗粘细菌YR–35的分离鉴定及其代谢产物稳定性[J]. 任兴波,张子良,赵璞钰,武志华,崔海辰,刘惠荣. 中国生物防治学报. 2016(03)
[7]致病疫霉拮抗菌株YR-7的分离鉴定及其活性物质[J]. 任兴波,武志华,崔海辰,高向红,冯福应,刘惠荣. 微生物学通报. 2016(07)
[8]一株抗马铃薯晚疫病菌的黏细菌鉴定及其活性分析[J]. 刘沛生,李娜,冯福应,刘惠荣. 科学技术与工程. 2014(21)
[9]粘细菌STXZ54的分离鉴定及其抗肿瘤活性[J]. 唐少军,肖蓉,文也,秦浩,刘慰,丁学知,夏立秋. 微生物学报. 2014(05)
[10]致病疫霉拮抗细菌的筛选及抑菌作用研究(英文)[J]. 李丽艳,蒋继志,郭文. Plant Diseases and Pests. 2011(03)
博士论文
[1]内蒙古中部地区粘细菌分离及其抑制马铃薯晚疫病菌的活性和成分研究[D]. 武志华.内蒙古农业大学 2018
硕士论文
[1]橙色黏球菌的分离鉴定及其抑菌活性研究[D]. 张宜涛.河南工业大学 2011
本文编号：3603915
【文章来源】：微生物学通报. 2020,47(11)北大核心CSCD
【文章页数】：14 页
【部分图文】：
菌株B25-I-3的形态特征
如图2A所示，菌株B25-I-3接种后经2 d的迟缓期，在第2-3天进入快速增长期，第3-5天进入第2个迟缓期，第5-7天再次进入快速增长期，第7天时菌体重量达到最大值，之后急速减少，进入衰亡期，9 d后趋于稳定。将菌株发酵培养后，滤纸片法分别检测其胞内物及胞外物对致病疫霉的抗性。结果如图2B所示，菌株B25-I-3的胞外物对致病疫霉的生长表现出一定的抑制作用，但并未检测到胞内物的抑菌活性，可初步说明菌株B25-I-3的抗致病疫霉活性物质主要存在于细胞外。2.3.2 菌株B25-I-3发酵条件优化结果
温度为25-30°C时，菌株B25-I-3发酵上清液对P.infestans的抑制活性随温度的升高而增强，30°C时达到最高，菌丝生长边缘距滤纸片为6.5 mm，之后抑菌活性随温度的增高而降低(图3D)，说明温度过高或过低都不利于M.fulvus B25-I-3活性物质的产生，因其最佳发酵温度为30°C。选取对抑菌活性影响较大的接种量、温度与周期这3个因素进行正交试验，方案及结果如表6所示。菌株B25-I-3经不同接种量、温度、周期产生的发酵上清液对P.infestans的抑制活性不同。其最优发酵条件为：接种量10%，温度30°C，周期7 d。极差分析可知影响发酵上清液抑制P.infestans活性的顺序为：温度>接种量>周期。
【参考文献】：
期刊论文
[1]耐酸产蛋白酶芽孢杆菌SD48菌株液体发酵豆粕产大豆肽条件的优化[J]. 周星华,董伟洁,姜军坡,刘双,王世英,朱宝成. 河南农业科学. 2019(08)
[2]几种中药提取液对常见的致病菌体外抑菌及抗氧化活性的初步研究[J]. 历雪,夏青,李艳,赵凤胜,何秀霞. 长春理工大学学报(自然科学版). 2019(01)
[3]植物乳杆菌发酵生产苯乳酸的条件优化研究[J]. 杨小院,李渐鹏,史国萃,刘尊英. 食品科技. 2018(09)
[4]抗马铃薯晚疫病菌的粘细菌菌株X6-Ⅱ-1的分离鉴定、拮抗活性及发酵条件的优化[J]. 武志华,郭维维,董晔,郭子文,王雪寒,刘惠荣. 农业生物技术学报. 2018(09)
[5]大兴安岭地区粘细菌资源的多样性及其生物活性[J]. 武志华,李娜,马秀枝,董晔,郭子文,刘惠荣. 微生物学通报. 2018(02)
[6]马铃薯晚疫病菌拮抗粘细菌YR–35的分离鉴定及其代谢产物稳定性[J]. 任兴波,张子良,赵璞钰,武志华,崔海辰,刘惠荣. 中国生物防治学报. 2016(03)
[7]致病疫霉拮抗菌株YR-7的分离鉴定及其活性物质[J]. 任兴波,武志华,崔海辰,高向红,冯福应,刘惠荣. 微生物学通报. 2016(07)
[8]一株抗马铃薯晚疫病菌的黏细菌鉴定及其活性分析[J]. 刘沛生,李娜,冯福应,刘惠荣. 科学技术与工程. 2014(21)
[9]粘细菌STXZ54的分离鉴定及其抗肿瘤活性[J]. 唐少军,肖蓉,文也,秦浩,刘慰,丁学知,夏立秋. 微生物学报. 2014(05)
[10]致病疫霉拮抗细菌的筛选及抑菌作用研究(英文)[J]. 李丽艳,蒋继志,郭文. Plant Diseases and Pests. 2011(03)
博士论文
[1]内蒙古中部地区粘细菌分离及其抑制马铃薯晚疫病菌的活性和成分研究[D]. 武志华.内蒙古农业大学 2018
硕士论文
[1]橙色黏球菌的分离鉴定及其抑菌活性研究[D]. 张宜涛.河南工业大学 2011
本文编号：3603915
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