水曲柳促生蜡样芽胞杆菌SQL0164的分离鉴定及其根表定殖分析
发布时间：2021-09-01 09:54
【目的】以水曲柳促生细菌（蜡样芽胞杆菌SQL0164）为研究对象,揭示菌株SQL0164在水曲柳根部定殖的动态变化规律,明确其与定殖相关的生物学性状。【方法】梯度稀释法分离纯化细菌菌株;灌根接种细菌分离物至苗期水曲柳植株,筛选促生效果显著的菌株;通过16S rRNA基因序列系统发育分析与生理生化反应鉴定促生菌株SQL0164的分类学地位;采用平板菌落计数与扫描电镜确定菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖量与定殖位点;在不同培养基中观测菌株SQL0164形成的生物膜形态,采用结晶紫染色法对生物膜进行定量;离体条件下,检测菌株SQL0164的运动性。【结果】筛选出对水曲柳促生效果显著的菌株SQL0164,与对照相比,经菌株SQL0164处理21 d的水曲柳幼苗的鲜质量和株高分别增加了51.2%与15.4%;经鉴定,菌株SQL0164为蜡样芽胞杆菌;菌株SQL0164能够通过形成微菌落定殖于水曲柳根表皮细胞表面,且在水曲柳根表的定殖量随着寄主的生长呈现逐渐增加的趋势;菌株SQL0164在0.1×TSB、0.1×LB、MSGG以及0.5×NB培养基中能够形成致密的漂浮型生物膜,在LBGM培养基...
【文章来源】：中南林业科技大学学报. 2020,40(10)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
菌株SQL0164促进水曲柳幼苗生长的作用
分别吸取接种后24、48、72与96 h的SQL0164菌株培养液（LB），经革兰氏染色，显微镜检测芽胞形成（图2C-F）。观察发现，菌株SQL0164的革兰氏染色结果呈阳性，接种后24 h菌株SQL0164未产生芽胞，接种后36 h可观察到菌株SQL0164产生的芽胞呈椭圆形或柱形，近中生，长度1～1.5μm，其中部分芽胞在菌体内部，部分脱离菌体，接种后72 h菌株SQL0164产生的芽胞数量最多，接种后96 h芽胞的数量减少。2.2.2 菌株SQL0164的16S r RNA基因序列系统发育分析
稳定的定殖于寄主植物的表面或者内部是植物促生根细菌（PGPR）发挥有益功能的前提。为了检测菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖，将菌株SQL0164接种于MS培养基中生长的水曲柳幼苗，分别于接种后的第0天、第5天、第10天、第15天采集根系样品，分离并培养定殖于根表的菌株SQL0164，统计其定殖量（图4A）。结果表明，接种后的第0天，菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖量为7.3×106 CFU/g，随着水曲柳的生长，该菌株在水曲柳根表的定殖量逐渐增加，接种后第5天的定殖量为1.8×107 CFU/g，接种后第10天，菌株SQL0164的定殖量达到最大，为5.8×107 CFU/g，为该菌株在第0天定殖量的80倍。接种后第15天，菌株SQL0164的定殖量略微下降，为3.3×107 CFU/g，低于第5天与第10天的定殖量，但未达到显著水平。综上，在接种后的15 d内，菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖量随着寄主的生长呈现逐渐增加的趋势。采用扫描电镜对菌株SQL0164在水曲柳幼苗根表的定殖进行观测，发现该菌株以微菌落的形式聚集并定殖于根表，形成了结构致密的生物膜结构（图4B）。2.4 菌株SQL0164定殖机制的初探
【参考文献】：
期刊论文
[1]广西红壤区林木根际溶磷菌的筛选与鉴定[J]. 邓小军,颜权,李海星,韩华,李武应,唐健,王会利,宋贤冲,覃祚玉. 中南林业科技大学学报. 2019(09)
[2]水曲柳育苗技术要点与栽培技术研究[J]. 赵超越. 农业与技术. 2017(10)
[3]水曲柳天然林改培为母树林的技术要点[J]. 孙国利. 黑龙江科技信息. 2016(30)
[4]内生细菌B3-7的运动性参与其在小麦根系的内生定殖和对小麦全蚀病的生物防治[J]. 王刚,刘凤英,王淼,彭玲. 植物病理学报. 2011(05)
[5]长期不同施肥对稻田土壤有机质和全氮的影响[J]. 李新爱,童成立,蒋平,吴金水,汪立刚. 土壤. 2006(03)
[6]内生菌BS-2对辣椒苗的促生作用及对内源激素的影响[J]. 蔡学清,何红,胡方平. 亚热带农业研究. 2005(04)
[7]桉树与联合固氮菌相互作用的研究[J]. 康丽华. 微生物学通报. 2002(04)
本文编号：3376769
【文章来源】：中南林业科技大学学报. 2020,40(10)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
菌株SQL0164促进水曲柳幼苗生长的作用
分别吸取接种后24、48、72与96 h的SQL0164菌株培养液（LB），经革兰氏染色，显微镜检测芽胞形成（图2C-F）。观察发现，菌株SQL0164的革兰氏染色结果呈阳性，接种后24 h菌株SQL0164未产生芽胞，接种后36 h可观察到菌株SQL0164产生的芽胞呈椭圆形或柱形，近中生，长度1～1.5μm，其中部分芽胞在菌体内部，部分脱离菌体，接种后72 h菌株SQL0164产生的芽胞数量最多，接种后96 h芽胞的数量减少。2.2.2 菌株SQL0164的16S r RNA基因序列系统发育分析
稳定的定殖于寄主植物的表面或者内部是植物促生根细菌（PGPR）发挥有益功能的前提。为了检测菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖，将菌株SQL0164接种于MS培养基中生长的水曲柳幼苗，分别于接种后的第0天、第5天、第10天、第15天采集根系样品，分离并培养定殖于根表的菌株SQL0164，统计其定殖量（图4A）。结果表明，接种后的第0天，菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖量为7.3×106 CFU/g，随着水曲柳的生长，该菌株在水曲柳根表的定殖量逐渐增加，接种后第5天的定殖量为1.8×107 CFU/g，接种后第10天，菌株SQL0164的定殖量达到最大，为5.8×107 CFU/g，为该菌株在第0天定殖量的80倍。接种后第15天，菌株SQL0164的定殖量略微下降，为3.3×107 CFU/g，低于第5天与第10天的定殖量，但未达到显著水平。综上，在接种后的15 d内，菌株SQL0164在水曲柳根表的定殖量随着寄主的生长呈现逐渐增加的趋势。采用扫描电镜对菌株SQL0164在水曲柳幼苗根表的定殖进行观测，发现该菌株以微菌落的形式聚集并定殖于根表，形成了结构致密的生物膜结构（图4B）。2.4 菌株SQL0164定殖机制的初探
【参考文献】：
期刊论文
[1]广西红壤区林木根际溶磷菌的筛选与鉴定[J]. 邓小军,颜权,李海星,韩华,李武应,唐健,王会利,宋贤冲,覃祚玉. 中南林业科技大学学报. 2019(09)
[2]水曲柳育苗技术要点与栽培技术研究[J]. 赵超越. 农业与技术. 2017(10)
[3]水曲柳天然林改培为母树林的技术要点[J]. 孙国利. 黑龙江科技信息. 2016(30)
[4]内生细菌B3-7的运动性参与其在小麦根系的内生定殖和对小麦全蚀病的生物防治[J]. 王刚,刘凤英,王淼,彭玲. 植物病理学报. 2011(05)
[5]长期不同施肥对稻田土壤有机质和全氮的影响[J]. 李新爱,童成立,蒋平,吴金水,汪立刚. 土壤. 2006(03)
[6]内生菌BS-2对辣椒苗的促生作用及对内源激素的影响[J]. 蔡学清,何红,胡方平. 亚热带农业研究. 2005(04)
[7]桉树与联合固氮菌相互作用的研究[J]. 康丽华. 微生物学通报. 2002(04)
本文编号：3376769
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