产脂肪酶耐冷菌的分离及其对油脂降解吸附的条件优化

发布时间：2023-02-07 08:07

　　随着社会的发展,油脂污水的污染问题不断增多,油脂污水的主要污染物是动植物油。2020年公布的第二次全国污染源普查公告中,全国动植物油污染物排放量为30.97万吨,仅次于总磷的排放量。我国冬季大部分地区处于低温状态,北方地区在夏季也有低温的情况,这导致污水水体温度下降,使得低温条件下油脂污水的生物处理效果不佳。耐冷菌可以在低温、温度波动很大的环境中进行正常的生长代谢活动,其分泌的脂肪酶在低温时仍具有很好的降解油脂效果,因此分离具有高效去除油脂能力的耐冷菌是解决此难题的关键。除此之外,一些疏水性微生物对油脂有着强烈的生物吸附作用。本文从土壤中筛出一株产高效脂肪酶的耐冷菌:LTW-1,通过对该菌的26S r DNA D1/D2区域序列测序并进行Blast比对构建系统发育进化树后,可以确定LTW-1菌属于酵母菌属(Saccharomyces)。该菌最适的温度范围在15～25℃,在15℃条件下测得脂肪酶酶活为108.9U/m L,酶活高于很多已知的低温酵母菌。通过脂肪酶酶活的响应面实验优化,其最佳的产酶培养条件为:发酵时间61h、发酵温度22℃、pH 8、牛肉浸粉12g/L、装液量50m L/2...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 课题来源及背景
        1.1.1 课题来源
        1.1.2 课题背景
    1.2 课题研究的目的与意义
    1.3 国内外研究进展
        1.3.1 耐冷菌的发现
        1.3.2 耐冷菌的耐冷机理
        1.3.3 耐冷菌的应用
        1.3.4 油脂污水处理
        1.3.5 油脂的生物降解
        1.3.6 油脂的生物吸附
    1.4 菌株LTW-1 简介
    1.5 课题技术路线与研究内容
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 菌种来源
        2.1.2 实验器材
        2.1.3 实验所用培养基
        2.1.4 试验试剂与药品
    2.2 实验方法
        2.2.1 耐冷菌的筛选
        2.2.2 筛选产高效脂肪酶耐冷菌株
        2.2.3 菌种初步鉴定
        2.2.4 菌种生长曲线的测定
        2.2.5 除油率
        2.2.6 试验菌株发酵产脂肪酶酶活优化
        2.2.7 试验菌株生物吸附油脂条件的优化
第3章 菌种的筛选与产脂肪酶条件优化
    3.1 产脂肪酶耐冷菌的筛选与鉴定
        3.1.1 耐冷菌的筛选
        3.1.2 脂肪酶产生菌的筛选
        3.1.3 菌种鉴定
        3.1.4 LTW-1 菌株的生长曲线测定
    3.2 LTW-1 产脂肪酶条件的单因素优化
        3.2.1 发酵时间对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.2 发酵温度对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.3 装液量对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.4 接种量对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.5 初始pH对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.6 碳源对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.7 氮源对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.8 金属离子对发酵产脂肪酶的影响
        3.2.9 不同诱导剂对发酵产脂肪酶的影响
    3.3 响应面优化LTW-1 菌株发酵产脂肪酶结果
        3.3.1 PB实验筛选主效应影响因子
        3.3.2 Box-Benhnken Design响应面实验结果分析
    3.4 本章小结
第4章 生物吸附去除油脂的初步探究
    4.1 LTW-1的生物吸附现象
    4.2 初始接种量对吸附的影响
    4.3 装液量对吸附的影响
    4.4 培养时间对吸附的影响
    4.5 吸附时间对吸附效果的影响
    4.6 本章小结
结论
参考文献
致谢



本文编号：3736718