经饲强力霉素对猪粪中四环素类抗性基因的影响

发布时间：2023-06-05 05:05

　　强力霉素是生猪养殖过程中常用的治疗用兽用抗生素。经饲强力霉素后,其诱导产生的抗生素抗性基因(Antibiotic resistance gene,ARGs)会随粪便排到体外进入周边环境。因此,本文研究了经饲强力霉素后猪粪中四环素类ARGs的变化规律及其影响因素,为准确评估应用强力霉素的生态毒理学效应、减少动物源ARGs的排放提供理论依据。将27头33.5±0.72 kg的杜×长×大公猪分为3个组,每组各9头猪;空白组(CK组)不添加任何兽用抗生素外,另外两个试验组依据《中华人民共和国兽药典》规定分别在饲料中添加3 mg/kg体重(L组)和5 mg/kg体重(H组)的强力霉素,用药期5天,休药期28天。定期采集猪粪,测定强力霉素浓度、猪粪中的ARGs、可移动遗传元件(Mobile genetic genes,MGEs)、微生物群落结构及相关理化指标等。本文所获结果如下:(1)经饲强力霉素后,L组强力霉素浓度于第5天达到峰值,为157.05±16.43mg/kg DM,H组于第4天达到峰值,为272.49±28.24 mg/kg DM。用药期L组和H组的平均浓度分别为117.63±13.5...

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摘要
abstract
1 前言
    1.1 强力霉素在畜禽养殖业的应用及其生态毒理效应
        1.1.1 强力霉素在畜禽养殖业的应用概况
        1.1.2 强力霉素的生态毒理学效应
    1.2 畜禽粪便中的强力霉素和四环素类抗性基因
        1.2.1 畜禽粪便中强力霉素的残留
        1.2.2 畜禽粪便中四环素类抗性基因的污染现状
    1.3 抗生素抗性基因在环境介质中的传播方式及其影响因素
        1.3.1 抗生素抗性基因在环境介质中的传播方式
        1.3.2 影响抗生素抗性基因传播的因素
    1.4 本文研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 药品与试剂
        2.1.2 试剂的配制
        2.1.3 仪器及其他
    2.2 试验方法
        2.2.1 试验设计
        2.2.2 样品采集
    2.3 指标测定
        2.3.1 强力霉素
        2.3.2 ARGs和 MGEs
        2.3.3 微生物群落结构
        2.3.4 常规理化指标
    2.4 数据处理
3 结果与分析
    3.1 经饲后强力霉素在猪粪中的排泄规律
        3.1.1 经饲后猪粪中强力霉素的浓度变化
        3.1.2 经饲后强力霉素通过猪粪的排泄率
    3.2 经饲强力霉素后猪粪ARGs和 MGEs的变化
        3.2.1 猪粪中总ARGs相对丰度的变化
        3.2.2 猪粪中四环素类ARGs丰度的变化
        3.2.3 猪粪中与四环素类抗性相关的多重ARGs丰度的变化
        3.2.4 猪粪中MGEs丰度的变化
    3.3 经饲强力霉素后猪粪微生物群落结构的变化
        3.3.1 猪粪中细菌绝对丰度的变化
        3.3.2 猪粪微生物群落结构的稀释曲线和等级聚类曲线
        3.3.3 猪粪微生物群落结构
        3.3.4 门(Phylum)水平上的猪粪微生物群落结构组成
        3.3.5 属(Genus)水平上的猪粪微生物群落结构组成
        3.3.6 种(Species)水平上的猪粪微生物群落结构组成
        3.3.7 猪粪微生物的表型预测和功能注释
    3.4 经饲强力霉素后猪粪常规理化指标的变化
        3.4.1 猪粪含水率的变化
        3.4.2 猪粪pH和EC的变化
        3.4.3 猪粪OM的变化
        3.4.4 猪粪TN的变化
        3.4.5 猪粪C/N的变化
        3.4.6 猪粪NH4⁺-N的变化
        3.4.7 猪粪NO3^--N的变化
    3.5 猪粪中四环素类ARGs的影响因素关联分析
        3.5.1 四环素类ARGs和 MGEs之间的关系
        3.5.2 四环素类ARGs与微生物之间的关系
        3.5.3 四环素类ARGs及其影响因素的冗余分析
4 讨论
    4.1 强力霉素在猪粪中的排泄规律
    4.2 经饲强力霉素对猪粪中四环素类ARGs和 MGEs的影响
    4.3 经饲强力霉素对猪粪微生物群落结构的影响
    4.4 猪粪中四环素类ARGs的影响因素
    4.5 研究展望
5 结论
参考文献
附录A 试剂的配制
附录B 猪粪样品微生物总DNA提取
附录C 重组质粒的构建
附录D 攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3831742