Enterobacter sp. S-1、S-2对石油烃的降解特性及其功能基因研究

发布时间：2024-04-02 05:15

　　石油污染土壤严重且治理困难,就目前修复手段来说生物修复技术最为绿色环保,目前国内外研究热点集中在相关功能基因的丰度及表达,对相关功能基因进行定位,能够为修复过程的阶段方案调整与优化提供理论依据与技术指导。(1)本文首先从天津石油污染土壤中筛选分离出2株高效石油烃降解菌,通过16S r RNA序列分析表明S-1、S-2菌株均为肠杆菌属。采用基于Box-Behnken设计(BBD)的响应面方法(RSM)研究了温度、p H值和石油烃(TPH)浓度对TPH生物降解的影响。根据方差分析,S-1、S-2菌株的确定系数分别是R²=0.9565、R²=0.9943,表明模型的总变化可以忽略不计。响应面优化得到S-1菌株对TPH降解的最佳条件为温度30℃,p H值7.14和TPH浓度4.83g/L,最佳降解率为87.79%;S-2菌株对TPH降解的最佳条件为温度30℃,p H值7.13和TPH浓度3.93g/L,最佳降解率为81.63%。结果表明,温度对TPH降解速率的影响(p<0.0001)较其他两个参数更为显著。GC-MS图谱证实了两株菌降解石油烃的...

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 课题来源与选题依据
    1.2 国内外研究进展
        1.2.1 石油污染土壤生物修复技术领域的研究热点
    1.3 研究目标及内容、意义
        1.3.1 研究目标
        1.3.2 研究内容
        1.3.3 研究意义
    1.4 研究思路及可行性分析
        1.4.1 研究思路
        1.4.2 技术路线
第二章 石油烃降解菌的筛选、鉴定及降解特性研究
    2.1 实验试剂、仪器与材料
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 高效石油烃降解菌筛选与分离及降解率测定
        2.2.2 菌株鉴定
        2.2.3 RSM方法优化两株石油烃降解菌的最佳降解条件
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 高效石油烃降解菌筛选与分离
        2.3.2 菌株的鉴定
        2.3.3 两株石油烃降解菌的最佳降解条件
    2.4 小结
第三章 肠杆菌属特性及功能基因的初步分析
    3.1 实验试剂、仪器与材料
        3.1.1 实验试剂
        3.1.2 实验仪器
        3.1.3 实验材料
    3.2 实验方法
        3.2.1 高效石油烃降解菌降解特性
        3.2.2 高效石油烃降解菌基因扫描图分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 原油标准曲线的确定
        3.3.2 高效石油烃降解菌株的特性分析
        3.3.3 S-1菌株基因扫描图分析
        3.3.4 S-2菌株基因扫描图分析
        3.3.5 S-1 菌株和S-2 菌株同源基因比较
        3.3.6 参与降解芳香化合物的代谢途径及基因分析
    3.4 小结
第四章 外源菌强化修复石油污染土壤及功能微生物分析
    4.1 实验试剂、仪器与材料
        4.1.1 实验试剂
        4.1.2 实验仪器
        4.1.3 实验材料
    4.2 实验设计
    4.3 实验方法
        4.3.1 生物强化修复过程中土壤石油烃降解率测定
        4.3.2 基于高通量测序分析的生物修复石油污染土壤菌群结构变化
        4.3.3 石油污染土壤总RNA提取方法的初步建立及优化
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 生物强化对土壤中石油烃的去除作用
        4.4.2 测序质量评价
        4.4.3 Alpha多样性分析
        4.4.4 土壤微生物群落结构变化
        4.4.5 RNA提取方法验证
        4.4.6 石油污染土壤中总RNA的提取
    4.5 小结
第五章 结论
参考文献
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢



本文编号：3945873