霍山石斛苯丙氨酸解氨酶活力测定条件的优化

发布时间：2021-11-16 13:39

　　以霍山石斛一年生和三年生鲜条为原料,采用L-苯丙氨酸法对霍山石斛中的苯丙氨酸解氨酶进行提取并测定其活力.从实验中所需缓冲液的p H值、苯丙氨酸解氨酶的酶浓度、反应温度和生长年限这四个方面对实验提取条件进行优化.生长年限为一年生的霍山石斛苯丙氨酸解氨酶在缓冲溶液p H值为9.0、酶浓度为1.0ml、反应温度为40℃的条件下测定的酶活力为最高值是34U.测定结果较传统方法酶活力显著提高,说明优化后测定条件准确可靠,为霍山石斛苯丙氨酸解氨酶的活性测定提供了新的条件基础. 

【文章来源】：枣庄学院学报. 2020,37(05)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

缓冲溶液p H值对酶活力的影响

影响酶活力的因素反应温度如图2所示.当反应温度从20.0℃上升到40.0℃时，酶活力显著增大;当温度继续升高之后，酶活力反而减小.在反应温度为40℃的时候，酶活力最大，所以反应温度40℃是最佳水平．分析反应温度对酶活力的影响，可以确定温度对酶活力的影响也是有最适的条件，超过最佳条件酶活性都不能完全展现，酶活力只有在合适温度下才能达到最佳，本条件反应温度40℃是最佳测定值．

影响酶活力的因素酶浓度如图3所示.在反应过程中，加入的酶浓度逐渐加大，整个反应体系中酶活力不断增强.当酶浓度达到1.0ml时，再继续增加酶浓度后酶活力平缓减小，由此得出当酶浓度为1.0ml时，酶活力达到最大．分析酶浓度对酶活力的影响，可以了解在一定范围内，酶浓度对酶活力的影响是成正比的，随着酶用量的增加，酶活力逐渐增强.当酶达到一定用量时，酶活力趋于平缓，继续增加酶浓度酶活力也不再出现太大变化.因此确定霍山石斛苯丙氨酸解氨酶的酶浓度为1.0ml是最优．

【参考文献】：
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本文编号：3498994