蓖麻环核苷酸门控离子通道RcCNGC2克隆与盐胁迫下表达分析

发布时间：2022-01-09 15:17

　　为探讨RcCNGC2在蓖麻耐盐中的作用,以通蓖5号叶片为材料,克隆获得环核苷酸门控离子通道RcCNGC2完整编码区序列（CDS）,并对该序列进行序列比对、蛋白结构分析,构建多元表达载体,分析了在盐胁迫下蓖麻RcCNGC2基因根、茎、叶组织中6个时间点的表达量变化。结果显示,RcCNGC2 CDS长度为2 148 bp,编码715个氨基酸,蛋白分子量为34.15 ku,等电点为9.96,存在5个跨膜结构域。氨基酸序列一致性分析表明,RcCNGC2与橡胶树一致性最高,达89.15%。qRT-PCR分析结果显示,NaCl处理后RcCNGC2表达量在根中上调且差异显著,在茎、叶中随NaCl处理时间延长而显著减少。综上,RcCNGC2在蓖麻受到盐胁迫时起重要信号传导作用。 

【文章来源】：华北农学报. 2020,35(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

蓖麻RcCNGC2基因PCR扩增产物

经测序为阳性菌液扩摇,提取质粒后,应用限制性内切酶SmaⅠ和XbaⅠ将该质粒与表达载体pCG-3300进行双酶切,T4连接酶连接酶切产物,转化到大肠杆菌感受态Top10细胞中,通过Kan抗性筛选阳性菌,扩摇后提质粒,进行重组质粒PCR鉴定和双酶切鉴定,琼脂糖凝胶电泳结果(图7)显示,重组质粒约为108 681 bp且明显大于酶切后表达载体电泳条带,酶切后目的片段大小与RcCNGC2序列大小一致,植物表达载体构建成功。图3 RcCNGC2蛋白保守区预测

RcCNGC2蛋白保守区预测

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3578960