改良高盐高pH法提取大豆DNA

发布时间：2023-04-02 11:48

　　大豆除了含有大量的脂类和蛋白质外,还含有糖类和酚类物质,为解决难于从大豆中提取高质量DNA和传统提取方法耗时长的问题,本研究以中豆41与天隆一号的幼嫩叶片(V3)和成熟种子作为材料,对高盐低pH法进行改良,提高其裂解液pH值,同时结合冷冻裂解法缩短裂解时间,使用不同pH值醋酸钠纯化DNA,并与经典CTAB法进行比较,评价其提取DNA的效果及其应用范围。结果表明,高盐高pH法对成熟种子的DNA提取效率较高,且蛋白与RNA污染少。CTAB法提取的DNA虽然完整性较高,但是耗时较长,蛋白与RNA污染较多。另外,高盐高pH法提取的DNA PCR扩增条带清晰,与常规CTAB法提取DNA扩增效果一致,但其DNA质量不能满足高通量测序要求。综上,改良的高盐高pH法是一种快速有效的大豆DNA提取方法,可满足常规分子试验的要求。

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 试验设计
    1.4 方法
        1.4.1 高盐高pH法
        1.4.2 CTAB法
        1.4.3 DNA质量检测
        1.4.4 PCR扩增检测
        1.4.5 建库合格性检测
    1.5 数据分析
2 结果与分析
    2.1 不同方法提取DNA得率分析
    2.2 不同方法提取DNA质量分析
    2.3 PCR扩增结果
    2.4 建库合格性检测结果
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3779169