红色荧光蛋白基因DsRED在核桃植株再生过程中的表达稳定性

发布时间：2023-04-10 22:30

　　【目的】报告基因是编码易被检测的蛋白质或酶的基因。红色荧光蛋白基因Ds RED因其优异的适用特性已作为报告基因广泛应用于动植物以及酵母等真核细胞内基因表达的研究。课题组前期已将Ds RED成功转入核桃体细胞胚,阳性体胚生长及增殖正常、阳性再生植株长势良好。本研究通过对核桃体细胞胚和再生植株中Ds RED基因的跟踪研究,探讨Ds RED作为报告基因在核桃再生植株中的表达是否稳定以及对再生植株的后续生长和发育是否具有影响,同时为进一步拓宽Ds RED作为报告基因的应用范围提供参考。【方法】通过荧光显微镜检测核桃体细胞胚、继代培养3年的组培苗以及3年生温室苗的Ds RED荧光表达的稳定性,并通过PCR、q RT-PCR以及Western Blot技术检测Ds RED基因及其编码蛋白在核桃体细胞胚和组培苗中表达的稳定性。同时,通过对Ds RED组培苗及3年生苗的形态指标进行测定,从而明确Ds RED作为外源报告基因的可靠性。【结果】核桃Ds RED体细胞胚在白光下呈粉红至红色,荧光下呈明亮的红色;与对照相似,Ds RED体细胞胚发育也经历了球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,且形态正常。Ds ...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 植物材料
    1.2 试验方法1)培养条件
    1.3 数据处理
2 结果与分析
    2.1 红色荧光蛋白基因Ds RED在核桃体胚中表达稳定
    2.2 红色荧光蛋白基因Ds RED在核桃组培苗中表达稳定
    2.3 红色荧光蛋白基因Ds RED在核桃3年生苗中表达稳定
3 讨论
4 结论



本文编号：3788845