Taqman探针RT-qPCR法检测柑橘黄龙病与海南柑橘主产区黄龙病现状
发布时间:2024-05-11 00:47
为柑橘黄龙病快速准确检测与海南柑橘黄龙病防控提供方法和依据支持,采用Taqman探针RT-qPCR法检测了红肉蜜柚、红江橙植株不同部位组织中柑橘黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,Las)的含量与海南柑橘主产区主栽品种斑驳黄化型叶样的Las含量。结果表明:采用Taqman探针RTqPCR法可实现对Las的灵敏快速检测,检测极限为1.49×107个/g叶中脉。在疑似感染Las的红肉蜜柚和红江橙植株根、茎、叶、梢等组织中均检测出Las,但不同组织的含量差异较大。其中:红肉蜜柚的次级根中Las含量最高、达2.31×1011个/g,新梢中Las含量最低、为1.15×107个/g;红江橙的新叶中Las含量最高、达3.65×1011个/g,主根中的Las含量最低、为1.51×109个/g。在部分表现正常的柑橘叶片中也检测出Las,但斑驳黄化型叶片Las含量显著高于表型正常叶片,老叶高出104~106倍,新...
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本文编号:3969269
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图1RT-qPCR检测HLBaspr引物探针组和内参COXfpr
对感染了Las的临高红肉蜜柚样品DNA进行10倍的连续浓度梯度100、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6稀释(表1)后进行qPCR。检测结果表明:HLBaspr引物探针组在DNA稀释到10-5时,每5μLDNA中仍能检测到Las(图1),而稀释到10-6....
图2qPCR定量检测红肉蜜柚和红江橙不同组织中黄龙病菌的含量差异
对临高县的红肉蜜柚和澄迈县的红江橙2品种各3株疑似黄龙病感病植株按主根、次级根、茎、新梢、老叶、新叶6个部位取样进行qPCR。检测结果(表2)表明:红肉蜜柚和红江橙植株各部位均可检测出Las病原菌,且各部位Las的含量差异较大。红肉蜜柚各部位Las的含量从次级根、老叶、主根、新叶....
图3RT-qPCR定量检测红肉蜜柚和红江橙显症与不显症叶片中黄龙病菌的含量
采用Taqman探针RT-qPCR法对海南省琼中县、澄迈县、屯昌县、临高县、儋州市等柑橘主产区主栽的红肉蜜柚、水晶蜜柚、甜橙、福橙、柠檬等品种的疑似黄龙病样品进行检测的结果表明(表3):在主产区采集的23个疑似黄龙病样品DNA样品中,只有来自儋州市的其中1份水晶蜜柚样品检测呈阴性....
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