肠道病毒71型手足口病重症发病机制研究

  本文关键词：穿行于双重话语角色之间——徐坤小说话语特征论析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)是引起手足口病(hand,foot,andmouthdisease,HFMD)和导致严重神经系统并发症的常见病原体,主要流行于亚太地区。婴幼儿感染EV71引起的HFMD可能导致严重并发症,包括心肌炎、急性弛缓性麻痹、无菌性脑膜炎、脑干脑炎、神经源性肺水肿甚至死亡。然而重症EV71感染致病机制仍未明确阐明。目的本研究目的是通过病毒和宿主两方面研究EV71病毒导致患者罹患重症机制。主要通过对轻症和重症小鼠模型的建立以及比较研究,从实验动物模型方面对重症发病机制进行探讨；通过对轻症和重症病人血清差异蛋白分析,探索与重症转归相关的早期生物学因子；以及通过重症死亡患者和小鼠模型的比较病理学研究揭示重症神经性疾病和并发症的发病机制；从肠道益生菌免疫调节的角度出发,初探干酪乳杆菌在EV71感染中的抗损伤和抗感染作用,为进一步探讨黏膜免疫等方面的调节作用提供理论依据。方法1、通过体外实验比较9株临床病人分离株在神经细胞系中复制能力的差异,并对复制力有差异的病毒株进行全基因组序列分析。2、另外,分别建立小鼠轻症、重症模型,并在小鼠模型上对EV71病毒复制力、抗原在组织中的分布、血清中细胞因子浓度差异进行比较。3、对EV71病毒感染小鼠模型和EV71重症患者开展了比较病理学研究,研究内容包括EV71抗原在组织中分布,受体(SCARB2)分布定位以及血脑屏障基本结构变化,以及原位杂交定位组织中的EV71病毒RNA,并对炎性细胞的分类和分布进行了检测。4、对采集到的临床轻症、重症手足口病患者样本进行了比较、分析,并进一步用iTRAQ技术分析轻症和重症患者血清中表达差异蛋白,为找到重症预警标志物提供数据支撑。5、采用重症EV71小鼠模型对干酪乳杆菌的抗感染作用进行初探,对组织病变和病毒分布等进行检测分析,为探讨干酪乳杆菌在其中的调节机制提供实验依据。结果1、研究结果显示9株EV71毒株都属于C4基因亚型,都能在人源神经细胞系中复制。2、轻症和重症小鼠模型临床表现为,重症组小鼠存活率为71.43%,60%的小鼠出现后肢瘫痪,轻症组小鼠表现竖毛外无其他异常反应。血清中细胞因子检查发现,重症组感染初期IL-5(6hpi)、IL-13(2dpi)、IL-6、MCP-1、CCL5/RANTES(3dpi)表现明显上调,感染后期TNF-α(7dpi)表现明显上调。3、比较病理学研究表明EV71感染死亡患者出现严重的脑脊髓炎、肺水肿和坏死性肠炎,EV71病毒和病毒受体SCARB2主要分布子中枢神经系统(centralnervoussystem,CNS)神经元、小胶质细胞和炎性细胞以及肠上皮细胞。原位杂交结果显示CNS、肠道、肺和扁桃体浸润的炎性细胞中EV71病毒RNA反应阳性,病理检查可发现CNS中典型的血管袖套、胶质结节、嗜神经现象。重症EV71病毒性脑脊髓炎患者的血脑屏障被严重破坏。重症小鼠模型临床表现后肢瘫痪,是以大面积坏死性肌炎为主要病理表现,全身性肌坏死最终导致呼吸衰竭等并发症,致使CNS出现不同程度病变,脊髓前角运动神经元损伤,间质性肺炎等病变。4、通过比较轻症和重症患者临床数据、样本发现,体温、血糖、中性粒细胞比例、CK-MB和LDH血清水平升高是重症的危险因素,可能是与患者体内过强的免疫反应有关。采用iTRAQ技术和通路分析表明轻症和重症患者差异蛋白主要参与免疫应答和细胞凋亡。5、干酪乳杆菌可以降低EV71感染小鼠组织中的病毒载量,减轻组织炎性反应,肠道局部黏膜病变改善,可能是干酪乳杆菌增强局部黏膜免疫,从而使肠道、肺脏等组织中的病毒载量减少,提高小鼠存活率,有显著预防EV71病毒感染的作用,同时有一定抗EV71病毒感染作用。结论EV71病毒对人具有神经嗜性,而对小鼠具有肌嗜性。重症小鼠模型血清上调的细胞因子,包括IL-5、IL-13、IL-6、MCP-1和CCL5/RANTES,可能是潜在的提示重症预后的标志物。EV71死亡患者病理特征为严重的神经损伤伴有炎性细胞反应,大量浸润的巨噬细胞/小胶质细胞和中性粒细胞可能与EV71复制、CNS传播、神经损伤和并发症有关；EV71小鼠模型病理表现主要是坏死性肌炎,是重症小鼠模型的典型特征,CNS病变尤其是脊髓损伤与肢体瘫痪有一定的关联性。过强免疫反应可能导致EV71感染的HFMD患者发生重症并发症甚至出现死亡。干酪乳杆菌可能通过增强黏膜免疫等作用抗EV71病毒感染,而其具体调节机制有待进一步深入研究。本研究通过对EV71病毒感染力、轻症和重症小鼠模型比较研究、死亡患者和小鼠模型比较病理学研究以及对轻症和重症患者血清差异蛋白的研究,为阐明EV71病毒感染导致的重症神经致病机理、诊断和治疗提供理论依据和数据支撑,并为EV71动物模型建立提供疾病模型的基础研究资料。
【作者】于品；
【导师】秦川；
【作者基本信息】北京协和医学院，病理学与病理生理学，2014，博士
【关键词】肠道病毒71型；手足口病；小鼠；表达谱；发病机理；

【参考文献】
[1]贾耀奇.广域环境下泄漏监测与突发事故抛撒传感器节点的研究[D].河北工业大学,机械工程,2013,硕士.
[2]李裘.穿行于双重话语角色之间——徐坤小说话语特征论析[D].福建师范大学,汉语言文字学,2004,硕士.
[3]赵江伟.基于遥感与GIS的河北坝上地区生态环境质量评价研究[D].河北科技大学,环境工程,2014,硕士.
[4]董晓茹.龙葵素及莨菪烷类生物碱的中毒、检测及评价研究[D].苏州大学,分析化学,2013,硕士.
[5]刘元状.高电压尖晶石LiNi_(0.5)Mn_(1.5)O_4的制备与性能研究[D].宁波大学,物理化学,2014,硕士.
[6]俞方.农村乡镇卫生院三种不同改革形式的比较研究[D].浙江大学,2003.
[7]韩丹.青风藤提取制备工艺与宽筋藤质量控制方法研究[D].北京中医药大学,中药学,2014,硕士.
[8]潘美玲.社会管理哲学论纲[D].湖南科技大学,马克思主义哲学,2013,硕士.
[9]张中华.绍兴黄酒麦曲中微生物群落结构的研究[D].江南大学,发酵工程,2012,硕士.
[10]刘晓鹤.新时期大学生职业观教育的研究[D].内蒙古大学,马克思主义理论,2014,硕士.
[11]翟化龙.SM保险公司人才流失的成因及对策[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[12]张珂.基于德国功能主义的汉英旅游翻译错误分析[D].鲁东大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[13]阮备军.Web使用挖掘若干关键问题研究[D].复旦大学,2004.
[14]胡贞.湘江流域重金属污染防治地方立法研究[D].湖南师范大学,环境与资源保护法学,2013,硕士.
[15]张庆.我国体育保险市场分析及发展前景研究[D].对外经济贸易大学,2002.
[16]王明世,彭永超.石油物探RTK测量作业新方法[J].石油地球物理勘探,2005,S1:134-138.
[17]袁卫.多层钎焊金刚石磨盘的研制[D].南京航空航天大学,机械制造及其自动化,2014,硕士.
[18]杨阳.基于烟叶图像处理的密集化烤房温湿度系统设计[D].重庆大学,电子与通信工程（专业学位）,2014,硕士.
[19]黄百重.高科技纺织品在建筑业上的应用与展望[J].中外建筑.1997(05)
[20]李攀峰.右旋糖酐蔗糖酶工程菌的稳定性及催化产物果糖的结晶研究[D].合肥工业大学,生物化工,2013,硕士.
[21]陈超.冬病夏治内外同治法对慢性阻塞性肺疾病稳定期的临床疗效观察[D].北京中医药大学,中医内科学,2014,硕士.
[22]毕万全.初始释放瓦斯膨胀能测定装置的局部优化研究[D].中国矿业大学,安全技术及工程,2014,硕士.
[23]孔翠文.缬沙坦对尿酸性肾病大鼠肾间质纤维化机制的干预研究[D].青岛大学,内科学,2013,硕士.
[24]孟宪玲.民事申请再审审查程序法律问题研究[D].吉林大学,法律,2012,硕士.
[25]刘俊林.胃恶性肿瘤Her2蛋白表达及其基因拷贝数的临床意义[D].青岛大学,肝胆血管外科,2013,硕士.
[26]王志英.苯甲腈选择性催化加氢制苄胺催化剂研究[D].上海大学,材料工程（专业学位）,2014,硕士.
[27]谢晨.小学美术课程表现性评价创新取向研究[D].沈阳师范大学,美术,2014,硕士.
[28]王媛媛.渗透淤堵作用对卓玉水库坝基渗透性及渗流影响的模拟研究[D].吉林大学,地质工程,2013,硕士.
[29]赵立祥.NAD对血管紧张素II诱导的大鼠心肌纤维化的影响[D].山东大学,内科学,2013,硕士.
[30]高凌云.透明的碳同素异形体[J].现代物理知识,2011,01:57.
[31]衣政伟.粳稻碾米品质的基因型差异和氮素效应研究[D].南京农业大学,作物栽培学与耕作学,2013,硕士.
[32]周文.基于概念的若干知识表示模型及相关方法研究[D].上海大学,2007.
[33]李丰如.“教学案”语文课堂教学模式研究[D].扬州大学,课程教学论,2011,硕士.
[34]曹意伟.华侨投资与广州城市近代化（1862-1937）[D].广西师范大学,中国近现代史,2013,硕士.
[35]王涵.跨媒体时代中国动画艺术形态研究[D].武汉纺织大学,设计学,2014,硕士.
[36]路林林.虚拟学习社区成员间互动行为研究[D].曲阜师范大学,教育技术学,2013,硕士.
[37]杨成梧,史国军,邹云.严格正实引理和严格界实引理的一般描述——非最小实现的情形[J].自动化学报,1993,03:361-364.
[38]陈丽莉.褪黑素对小鼠Leydig细胞睾酮合成的抑制作用及机制[D].苏州大学,卫生毒理学,2014,硕士.
[39]李佳宁,张骏飞,李阳,王梁昊,李东晓,张明.基于体分割重建的增强现实交互系统[J].光电子技术,2014,02:140-143.
[40]齐雯.基于计算实验方法的我国投资基金有限套利行为研究[D].天津财经大学,金融学,2012,硕士.
[41]马立静.基于网络的矿井提升机远程监测与故障诊断系统设计[D].中国矿业大学,机械电子工程,2014,硕士.
[42]罗兰兰.以功能转变为突破走出信访制度困境[D].西南政法大学,宪法学与行政法学,2012,硕士.
[43]边磊.基于远程寄主定位机理的假眼小绿叶蝉化学生态和物理调控[D].中国农业科学院,农业昆虫与害虫防治,2014,博士.
[44]邓恒进.价值工程主导下的企业竞争优势构造研究[D].广西大学,企业管理,2004,硕士.
[45]付文娟.西北地区城镇群落发展研究[D].兰州大学,城市与区域规划,2013,硕士.
[46]张怡之.儿童福利机构教师队伍建设研究[D].湖南师范大学,教育管理（专业学位）,2013,硕士.
[47]兰玉波.化学驱波及系数和驱油效率的研究[D].大庆石油学院,2006.
[48]王任.鱼类蛋白质的双向电泳比较研究[D].浙江工商大学,食品科学与工程,2012,硕士.
[49]陈贇.企业办公自动化系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[50]孙洪晶.论泰伦斯·马利克电影的诗意[D].上海师范大学,广播电视艺术学,2013,硕士.

  本文关键词：穿行于双重话语角色之间——徐坤小说话语特征论析，由笔耕文化传播整理发布。