RIPK3过表达对mTOR及其相关基因转录的调控作用

发布时间：2017-10-14 15:19

  本文关键词：RIPK3过表达对mTOR及其相关基因转录的调控作用

  更多相关文章： 神经母细胞瘤 受体相互作用蛋白激酶- 基因表达调控

【摘要】：目的探索受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)的下游信号通路。方法向实验组SH-SY5Y细胞内转染pCMV6-RIPK3质粒上调细胞内RIPK3的表达水平,对照组细胞转染相应的空载质粒。通过Western blot检测细胞内RIPK3的表达水平。3-(4,5-二甲基噻唑)[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl),MTT]实验获得2组细胞增殖曲线确定外源性RIPK3在细胞内具有的生物学活性。通过RNAseq检测2组细胞基因转录差异,并在生物通路分析(ingenuity pathway analysis,IPA)数据库中进行数据分析,获得RIPK3的下游信号通路及其中的关键分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)。采用微滴式数字化PCR(droplet digital PCR,ddPCR)对mTOR转录水平的差异进行验证。结果质粒DNA整合到细胞基因组内,Western blot提示外源性RIPK3在实验组细胞内稳定表达,MTT结果证明其在细胞内能够抑制细胞增殖。RNAseq及IPA分析结果提示过表达RIPK3能够导致mTOR转录水平发生上调,并对其下游的基因,包括固醇反应结合蛋白(sterol-response binding proteins,SREBPs)、p70核糖体S6蛋白激酶(p70ribosomal S6protein kinases,S6K)、真核生物起始因子4E结合蛋白(eukaryotic initiation factor 4E-binding proteins,4E-BPs)和ULK(unc-51-like kinase)激酶复合体的转录具有明显的调节作用。ddPCR实验结果中mTOR表达改变趋势与RNAseq基本一致。结论 RIPK3能够调控mTOR及其下游信号通路中SREBPs、S6K、4E-BPs和ULK基因转录水平,进而在神经系统生长发育和疾病进展中发挥重要作用。
【作者单位】： 武警后勤学院附属医院脑科医院天津市神经创伤修复重点实验室武警部队脑创伤与神经疾病研究所;武警后勤学院中心实验室;
【关键词】： 神经母细胞瘤 受体相互作用蛋白激酶- 基因表达调控
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金项目(31200809) 武警部队后勤科研项目(WJHQ2012-20) 武警后勤学院科研创新团队(WHTD201306)
【分类号】：R363
【正文快照】： 受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interactingprotein kinase 3,RIPK3)是肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)介导程序性坏死(necroptosis)信号通路中的关键分子,在TNF-α的作用下能够被受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)激活,

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘效磊;牛燕媚;傅力;;mTOR/S6K1信号通路研究进展[J];中国运动医学杂志;2010年01期

2 黄文秋;黄宏;徐祥;韩娇艳;代卉;崔文慧;蒋建新;王莎莉;;mTOR及其下游信号通路在骨髓间充质干细胞氧化应激损伤中的变化及作用[J];第三军医大学学报;2013年02期

3 随力;任杰;;mTOR在记忆功能中的作用[J];中国药理学通报;2011年06期

4 张笋;王维平;;mTOR信号通路与学习记忆[J];医学综述;2010年13期

5 华春兰;程涛;袁卫平;;mTOR信号通路在造血及其它系统衰老中作用的研究进展[J];中国实验血液学杂志;2013年05期

6 ;Adipose stromal cells amplify the angiogenic signal via VEGF/mTOR/Akt pathway in hindlimb-ischemic mice[J];中国病理生理杂志;2012年11期

7 陈洪菊;唐彬秩;屈艺;母得志;;mTOR信号通路调节HIF-1α及VEGF[J];生命的化学;2011年06期

8 张兴中;李自茹;李茵;张炜真;;mTOR信号传导与能量感知及能量稳态的调控[J];生理科学进展;2013年05期

9 贺洁宇;刘峰;;mTOR信号通路与衰老及衰老相关重大疾病[J];生物化学与生物物理进展;2014年03期

10 葛圣林;彭磊磊;张成鑫;;PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响[J];中国药理学通报;2011年06期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 李自茹;许戈阳;李茵;张炜真;;mTOR调节nesfatin的生成[A];中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2011年消化内分泌生殖学术会议论文摘要汇编[C];2011年

2 ;mTOR signaling play a key role in Tau phosphorylation in SAMP8 mice[A];中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会论文摘要集[C];2011年

，

本文编号：1031772