RNA干扰endophilin A2抑制大鼠海马神经元突触囊泡内吞

发布时间：2017-10-15 10:18

  本文关键词：RNA干扰endophilin A2抑制大鼠海马神经元突触囊泡内吞

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【摘要】：目的:探讨内吞蛋白(endophilin)A2对大鼠海马神经元突触囊泡内吞的影响。方法:设计干扰endophilin A2的小分子干扰片段,通过Western blot的方法筛选出针对endophilin A2有效的特异性干扰片段;用免疫荧光的方法验证干扰片段对神经元内源性endophilin A2的干扰效果;利用双全细胞膜片钳的方法,记录不同刺激方案下的兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic currents,EPSCs)的情况,以明确endophilin A2对突触囊泡循环的影响。结果:(1)免疫荧光结果显示endophilin A2的干扰片段能显著减少海马神经元内源性endophilin A2的表达(P0.05);(2)双全细胞膜片钳结果显示,0.1 Hz的低频刺激下,干扰endophilin A2表达的神经元EPSCs大小与阴性对照组没有明显差异;而无论是单串高频刺激下还是多串高频刺激下,干扰endophilin A2表达的神经元标准化EPSCs的下降程度都明显增强(P0.05)。结论:(1)成功筛选出特异性干扰endophilin A2的有效干扰片段;(2)干扰endophilin A2的表达不影响海马神经元突触囊泡胞吐;(3)干扰endophilin A2的表达可抑制大鼠海马神经元突触囊泡内吞。
【作者单位】： 暨南大学医学院解剖学教研室;暨南大学医学院中西医结合博士后流动站;广州市红十字会医院 暨南大学附属第四医院神经内科;暨南大学附属第一医院神经内科;
【关键词】： 内吞蛋白A 突触囊泡 内吞 RNA干扰
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.31300885;No.81571191) 广东省自然科学基金资助项目(No.S2013040013256) 广东省科技计划(No.2013B021800036) 中国博士后科学基金资助项目(No.2015M570750) 2015年暨南大学第一临床医学院科研培育专项基金资助项目(No.2015109)
【分类号】：R338
【正文快照】： 网格蛋白(clathrin)介导的细胞内吞作用是真核细胞内在化营养、抗原、生长因子、受体和囊泡的重要机制之一[1],尤其在神经元突触前膜突触囊泡的内吞以及突触后膜受体的内吞中都发挥着重要的作用[2]。内吞蛋白(endophilin)A是网格蛋白依赖型内吞中的重要成员,其3个亚型endophil

【相似文献】

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1 汤勉芝,施玉j;利用苯乙烯染料揭示突触囊泡循环过程的研究进展[J];中国神经科学杂志;2002年01期

2 徐淑君;王萍;夏迪;;海马神经元突触囊泡释放特征及可释放囊泡含量定量分析(英文)[J];生理学报;2009年06期

3 李云,张志文;神经元突触囊泡循环的分子机理[J];生理科学进展;1997年04期

4 李穆丰,施玉，

本文编号：1036553