全反式视黄酸通过RARα抑制缺氧缺糖引起的原代神经元凋亡

发布时间：2017-10-27 14:22

  本文关键词：全反式视黄酸通过RARα抑制缺氧缺糖引起的原代神经元凋亡

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【摘要】：目的 :探讨全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,ATRA)是否能够抑制缺氧缺糖损伤(oxygen and glucose-deprivation,OGD)诱导的原代神经元凋亡。方法 :采用原代神经元作为研究对象,分为对照组、OGD组、OGD+ATRA组;体外分离培养原代神经元,用神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)鉴定神经元;倒置显微镜观察OGD损伤前后细胞形态变化;流式细胞技术研究OGD损伤后各组原代神经元凋亡水平;Real-time PCR检测视黄酸核受体α(retinoic acid receptor alpha,RARα)、转录生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转录生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3)mRNA表达水平;Western blot印迹检测RARα、TGF-β、Caspase-3蛋白表达水平。结果 :成功培养原代神经元;原代神经元OGD损伤后,倒置显微镜观察发现OGD组死亡的原代神经元较OGD+ATRA组明显增多,细胞更加杂乱;流式细胞计数发现OGD+ATRA组(26.11±2.96)%细胞凋亡率较OGD组(52.14±5.23)%明显降低(P=0.025);OGD+ATRA组RARαmRNA表达水平(1.52±0.43)和蛋白表达水平(0.22±0.02)较OGD组的m RNA表达水平(0.49±013)和蛋白表达水平(0.10±0.02)均明显增高(P=0.006,P=0.005),而OGD+ATRA组TGF-β1、TGF-β2 m RNA表达水平(0.45±0.10,0.41±0.08)分别较OGD组(0.81±0.15,0.98±0.15)明显降低(P=0.034,P=0.018),而且OGD+ATRA组TGF-β、Caspase-3蛋白表达水平(0.22±0.04,0.18±0.03)分别较OGD组(0.39±0.05,0.47±0.06)也明显降低(P=0.016,P=0.002),OGD+ATRA组(1.08±0.49)与OGD组(1.00±0.15)Caspase-3 m RNA表达水平无明显差异(P=0.148)。结论 :ATRA可以激活其受体RARα进而下调TGF-β,抑制凋亡因子Caspase-3的表达,最终抑制OGD损伤引起的原代神经元凋亡。
【作者单位】： 重庆医科大学附属儿童医院营养研究中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室认知发育与学习记忆障碍转化医学重庆市重点实验室儿科学重庆市重点实验室;
【关键词】： 全反式视黄酸 缺氧缺糖损伤 原代神经元 转录生长因子β 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81161120498、81100454、81100476)
【分类号】：R338
【正文快照】： 维生素A(vitamin A,VA)在一系列重要的生物学过程中扮演着重要的角色,包括视觉、繁殖、生长和发育[1]。VA的生物学效应主要以其活性代谢物视黄酸(retinoic acid,RA)发挥作用,RA通过激活其核受体视黄酸受体(retinoic acid receptors,RARs)或视黄酸X受体(retinoid-X receptors,R，

本文编号：1103877