人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

发布时间：2017-11-02 10:19

  本文关键词：人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

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【摘要】：目的建立人脐带间充质干细胞标准化、规模化制备技术。方法在无菌条件下,采集剖腹产婴儿脐带30条,长40~50 cm,弃被膜、血管后,剪成1 mm3的组织块,置于含10%胎牛血清的DMEM/F12的培养瓶中进行组织块反复贴壁培养,采用倒置相差显微镜动态观察细胞的生长及形态,对传代培养的第3代细胞采用流式细胞分析法进行细胞周期及表形分析,采用体外定向诱导分化实验观察多向分化潜能。结果组织块贴壁后于第4 d开始向周围呈放射状长出细胞,平均12 d左右长满瓶底,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于4~5 d达80%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90、CD29阳性率99%,CD105阳性率81%,不表达CD34,CD45,在体外能分化成骨、软骨、脂肪细胞。平均每条脐带获得细胞数6×109个。结论通过多条人脐带重复分离培养,建立了体外规模化、标准化的人脐带间充质干细胞的制备与鉴定技术规范及标准,可为人脐带间充质干细胞库建设和临床应用提供技术支持和标准化脐带间充质干细胞。
【作者单位】： 成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室 昆明市干细胞与再生医学研究重点实验室;
【关键词】： 脐带 间充质干细胞 制备 鉴定 规模化 标准化
【基金】：国家科技支撑计划项目(2014BI01B0) 国家973计划项目(2012CB5181060) 云南省科技计划重点项目(2013CA005)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,h UC-MSCs)是一类来源于新生儿脐带组织的具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,具有向神经、血管、肌肉、骨、软骨、脂肪等多种功能细胞分化的潜能[1-6]。该类细胞的特点是[4-5]:(1)来源丰富、取材方便;(2

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本文编号：1131133