重组溶葡萄球菌酶的PEG定点修饰
发布时间:2017-11-05 08:08
本文关键词:重组溶葡萄球菌酶的PEG定点修饰
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【摘要】:为获得高抗菌活性聚乙二醇(PEG)定点修饰的溶葡萄球菌酶(Lysn),根据该酶的高级结构,在它的催化域和结合域上优选8个位点(Q9、N13、N40、T172、N174、G197、V240和T244),将其分别突变成半胱氨酸,纯化后的溶葡萄球菌酶突变体经DTT处理后与20 kDa的单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺(m PEG-MAL)进行定点修饰反应,RP-HPLC分析显示PEG修饰率大于70%,修饰产物经MacroCap SP阳离子交换层析纯化后,PEG化溶葡萄球菌酶的纯度大于95%。比浊法和最小抑菌浓度(MIC)实验表明20K-PEG-Lysn V240C和20K-PEG-Lysn T244C的抗菌活性维持在原来的50%左右。研究结果为溶葡萄球菌酶全身给药治疗金黄色葡萄球菌感染奠定基础。
【作者单位】: 上海高科联合生物技术研发有限公司;复旦大学生命科学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室;
【基金】:中国博士后科学基金(No.2014M551322) 上海市博士后科研资助计划(No.14R21421300) 上海市工业菌株工程技术研究中心(No.13DZ2252000)资助~~
【分类号】:R3416
【正文快照】: 金黄色葡萄球菌是临床主要病原菌,它能引起肺炎、骨髓炎、心内膜炎及败血症等多种感染性疾病[1-2]。随着抗生素的广泛使用,金葡菌耐药性问题日益突出,尤其是耐甲氧西林金葡菌(MRSA)[3-4]。MRSA已经造成临床治疗上的困难及病死率增高,严重威胁人类健康[5-6]。溶葡萄球菌酶(Lyso
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2 ;[J];;年期
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1 陆海荣;溶葡萄球菌酶高效裂解细菌细胞壁的机制研究[D];复旦大学;2013年
,本文编号:1143310
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